孟英韬1,宋力2,舒剑波1,党利亨1
摘要： 目的：建立一种快速检测苯丙氨酸羟化酶基因新突变G344D和P362L的方法，通过对正常人群检测，以确定本实验室首次发现的这两种突变类型的性质。方法：针对新突变自行设计错配引物介导的PCR/限制性酶切分析方法对100例正常对照者的200个等位基因进行检测。G344D对应的扩增产生151bp片段长度, 正常对照含内切酶Afa I 位点，可切成132bp和19bp两片段，含突变个体不能被Afa I切割；P362L对应的扩增产生140bp片段长度, 正常对照含内切酶Hae III 位点，可切成120bp和20bp两片段，突变个体不能被Hae III切割，琼脂糖凝胶电泳可区分正常与含突变个体。结果：正常对照组未检出这两种突变等位基因。结论：证明G344D和P362L不属于正常人群的多态性表现，确属苯丙氨酸羟化酶基因致病性新突变。苯丙氨酸羟化酶基因具有高度遗传异质性，搞清楚本地区PAH基因突变特点，对建立本地区常见PAH突变的快速检测方法，研究基因型与表型的关系，指导遗传咨询和产前基因诊断具有重要意义。
