天津医药 ›› 2015, Vol. 43 ›› Issue (7): 792-796.doi: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.07.025
刘敏,马富玲,韩荣,李美,刘淑芬,张淑敏
LIU Min, MA Fuling, HAN Rong, LI Mei, LIU Shufen, ZHANG Shumin
摘要: 目的:应用吖啶橙荧光(AO-F)染色法搭建循环肿瘤细胞(CTCs)筛选平台,以及该方法在肾癌患者外周血中的应用初探。方法:传代培养肾肿瘤细胞,AO-F染色后随机计数5个视野下AO-F+细胞占肿瘤细胞的比例,评估AO-F染料对肿瘤细胞的敏感性;清晨空腹抽取10例健康体检者(对照组)外周血,红细胞裂解后富集单个核细胞,与一定数量的肿瘤细胞混合,建立肾癌外周血CTCs模型,AO-F染色后计算肿瘤细胞回收率,评估本方法特异性及稳定性;选取27例转移性肾癌患者作为实验组,采用AO-F法检测两组(对照组、实验组)外周血AO-F+细胞的检出率并分析检出率与患者临床参数之间的关系。结果: 平均每个视野下AO-F+细胞占肿瘤细胞的比例为93%±3%。含500、200、100、50个细胞的悬液组肿瘤细胞回收率(%)分别为:10.2±3.8、9.2±2.3、10.8±2.6、10.5±1.9,组间差异无统计学意义(F=1.001,P>0.05)。含10个细胞的悬液组偶然可检测到AO-F+细胞。对照组无一例阳性,实验组9例检测到AO-F+细胞,检出率为33.33%;检出率与年龄、性别、肿瘤大小、病理类型、Furhman分级、转移部位及带瘤状态均没有统计学差异(P>0.05)。结论:本研究证实了AO-F染色法筛查外周血CTCs切实可行,并具有高度的特异性和可重复性。对早期预测肾癌复发转移有一定参考价值。