天津医药 ›› 2018, Vol. 46 ›› Issue (2): 126-131.doi: 10.11958/20171057
张槐1 , 彭吾训2△, 刘钢2 , 张健2 , 张飞1 , 王健波1 , 赵胤1 , 李青2
ZHANG Huai 1 , PENG Wu-xun2△, LIU Gang2 , ZHANG Jian2 , ZHANG Fei 1 , WANG Jian-bo1 , ZHAO Yin1 , LI Qing2
摘要: 摘要: 目的 观察在体外培养条件下, 慢病毒载体介导的碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF) 基因转染对兔骨髓基质干细胞 (BMSCs) 生物学特性的影响。方法 采用密度梯度离心法及贴壁筛选法获取 BMSCs; 利用慢病毒载体将 bFGF 基因转染到 BMSCs 中, 根据转染条件分为 bFGF 转染组、 空病毒组、 未转染组, 转染后分别对 3 组细胞的形态 bFGF mRNA 及蛋白表达、 细胞增殖情况、 细胞周期及碱性磷酸酶 (ALP) 活性进行观察。结果 采用密度梯度离心法和贴壁筛选法, 成功获得高纯度的 BMSCs。载有 bFGF 基因的慢病毒转染 BMSCs 后, 细胞形态无明显变化, 而 bFGF mRNA 与蛋白表达均明显增强、 细胞增殖曲线上移、 增殖期细胞比例增大、 ALP 活性明显增高, 与空病毒组及未转染组比较, 差异均有统计学意义 (P<0.05)。结论 利用慢病毒载体将兔 bFGF 基因导入体外培养的 BMSCs, 目的基因获得稳定表达, 并且自身过表达的bFGF 可以促进BMSCs 的增殖与成骨分化。