• 实验研究 •
王力1,张宁坤2,高连如2,朱智明2,徐小红2
WANG Li 1,ZHANG Ning kun2,GAO Lian ru2,ZHU Zhi ming2,XU Xiao hong2
摘要:
【摘要】 目的 探讨含有增强型绿色荧光蛋白标记基因的慢病毒(Lentivirus-EGFP)体外转染人脐带华通胶间充质干细胞(HUWMSCs)的最佳方案及其对细胞增殖活性的影响。 方法 设计A、B、C、D共4种转染方案,分别以1、10、100的感染复数(MOI)转染体外培养的HUWMSCs,荧光显微镜及流式细胞仪检测各组荧光表达强度及转染效率,MTT法检测细胞增殖倍数。 结果 转染4d后所有实验组转染率在10.6%~87.3%,并与MOI值存在量效关系,聚凝胺(5mg/L)可显著增加病毒转染效率(P<0.05)。MTT实验结果显示,与对照组比较,不同转染方案细胞增殖存在显著差异(P<0.001)。A方案MOI=10组及B方案MOI=10组细胞增殖情况较其他组好。 结论 B方案MOI=10实验组为最佳转染方案。Lentivirus-EGFP能高效转染HUWMSCs且在2周内稳定表达转染基因,是一种安全、有效的基因转移载体。