摘要: 目的:构建OCIL shRNA表达载体,转染UMR106成骨细胞,观察OPG和RANKL mRNA的表达及转染后的成骨细胞对破骨细胞分化的影响。方法:设计针对大鼠OCIL mRNA的shRNA编码序列,克隆于pRNAT-U6.1/Neo 载体;使用lipofectamine2000将OCIL shRNA重组表达载体转染UMR106成骨细胞系,实时荧光定量PCR检测各组UMR106细胞中OCIL mRNA的表达及OPG和RANKL mRNA的表达。用OCIL shRNA转染的成骨细胞条件培养基干预PTH诱导骨髓细胞,观察破骨细胞样细胞生成情况。结果:1、成功构建了针对大鼠OCIL shRNA重组表达载体。转染OCIL shRNA表达载体的UMR106细胞中OCIL mRNA 表达受到明显抑制。2、OCIL shRNA转染UMR106成骨细胞后,RANKL mRNA表达水平明显升高;而OPG mRNA表达水平明显降低。3、OCIL shRNA转染的成骨细胞条件培养基促进骨髓细胞向破骨细胞样细胞分化。结论:RANKL/OPG系统参与了OCIL对破骨细胞分化的调节作用。