天津医药

天津医药 ›› 2017, Vol. 45 ›› Issue (3): 229-233.doi: 10.11958/20161334

• 细胞与分子生物学 • 上一篇    下一篇

肖沉 1,2， 孙莉 1,2∆， 曹杉杉 1,2， 梁浩 1,2， 程焱 1,2

肖沉 1,2， 孙莉 1,2?， 曹杉杉 1,2， 梁浩 1,2， 程焱 1,2   

  1. 1 天津医科大学总医院神经内科 （邮编 300052）； 2 天津市神经病学研究所
  • 收稿日期:2016-11-15 修回日期:2017-02-13 出版日期:2017-03-15 发布日期:2017-03-21
  • 通讯作者: 孙莉 E-mail:lisun@tmu.edu.cn
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目 （81571201， 81401023）

The inhibitory effect of PNS on brain 3-NT formation in vitro

XIAO Chen1,2, SUN Li1,2?, CAO Shan-shan1,2, LIANG Hao1,2, CHENG Yan1,2   

  1. 1 Department of Neurology, General Hospital of Tianjin Medical University, Tianjin 300052, China； 2 Tianjin Neurology Institute
  • Received:2016-11-15 Revised:2017-02-13 Published:2017-03-15 Online:2017-03-21
  • Contact: SUN Li E-mail:lisun@tmu.edu.cn

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摘要： 摘要： 目的 研究三七总皂苷（PNS）对体外过氧化亚硝基离子（ONOO－）依赖途径和亚铁血红素-亚硝酸盐-过 氧化氢 （heme/NO2－/H2O2） 依赖途径诱导的脑组织 3-硝基酪氨酸 （3-NT） 形成的抑制作用。方法 依据体内 3-NT 形成的主要途径， 分别建立 heme/NaNO2/H2O2和 ONOO－诱导的 3-NT 形成体外模型； 分别以牛血清白蛋白 （BSA） /大鼠血浆蛋白、 大鼠脑组织匀浆蛋白为底物， 分为对照组、 模型组及低、 中、 高浓度干预组（PNS 终浓度分别为 50、 100 及200 mg/L）， Western blot 法检测各组 3-NT 水平。结果 与对照组相比， 模型组 BSA、 血浆蛋白、 脑组织匀浆蛋白中均有 3-NT 形成 （均 P＜0.05）。与模型组相比， 两种途径下， 加入不同浓度 PNS 后， BSA、 大鼠血浆蛋白中 3-NT 表达水平均降低 （均 P＜0.05）， 而低浓度干预组脑组织匀浆蛋白中 3-NT 降低不明显 （P＞0.05）， 中、 高浓度干预组脑组织匀浆蛋白 3-NT 水平降低明显， 且高浓度干预组作用最大 （均 P＜0.05）。结论 中、 高浓度的 PNS 对脑组织 3-NT 形成具有抑制作用， PNS 可能对 3-NT 参与损伤机制的多种脑组织疾病 （如颅脑外伤、 脑卒中、 神经系统变性疾病等） 具有保护作用。

关键词: 脑损伤, 化学疗法, 辅助, 体外研究, 三七总皂苷, 3-硝基酪氨酸, 亚铁血红素, 过氧化亚硝基阴离子

Abstract: Abstract: Objective To study the inhibitory effect of panax notoginseng saponins (PNS) on 3-nitrotyrosine (3-NT) formation in brain induced by heme/NO2 －/H2O2 or ONOO － pathways in vitro. Methods According to the two major pathways of 3-NT formation in vivo, the models of protein nitration induced by heme/NaNO2/H2O2 or ONOO － system were established, respectively, in vitro. Bovine serum albumin (BSA)/rat plasma protein or rat brain homogenate protein were utilized as reactive substrates in both systems. Samples were divided into blank-control group, 3-NT group and PNS group(including low-, medium- and high-concentration subgroups). In 3-NT group, samples were exposed to heme /NaNO2 /H2O2 or ONOO－ system, respectively, at 37 ℃ for 30 min, whereas in PNS group, samples were pre-incubated with PNS (at final concentrations of 50 mg/L, 100 mg/L, and 200 mg/L) at 37 ℃ for 5 min before the nitrating system exposure. The 3-NT level in each group was detected by Western blot assy. Results Compared with the blank-control group, both heme/NaNO2/H2O2 and ONOO－ system can induce significant 3-NT generation in BSA/ rat plasma protein or rat brain homogenate protein (P＜0.05). Compared with model group, PNS pre-treatment markedly inhibited 3-NT expression in BSA/rat plasma protein in a dose-dependent manner (P＜0.05), the inhibitory effect of low intervention on the level of 3-NT in rat brain homogenate protein was not significant (P＞0.05). Medium- and high-concentrations of PNS pre-treatment markedly inhibited 3-NT accumulation, with maximum effect at the concentration of 200 mg/L (P＜0.05). Conclusion Medium- and highconcentrations of PNS can inhibit 3-NT formation in brain tissue mediated by either heme/NO2－/H2O2 or ONOO－ pathways,implying that potential neuroprotective action against 3- NT involves pathological conditions, like trauma, stroke, and neurodegenerative diseases.

Key words: brain injuries, chemotherapy, adjuvant, in vitro, panax notoginseng saponins(PNS), 3-nitrotyrosine(3-NT), heme, peroxynitrite anion