王海博,李忠廉△
WANG Hai-bo, LI Zhong-lian△
摘要: 目的 探讨长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1(lncRNA UCA1)表达沉默对人肝癌HepG2细胞增殖和 侵袭的影响,并初步探讨其作用机制。方法 应用Real-time PCR检测各20例肝癌组织和癌旁组织中lncRNA UCA1 的表达水平。体外培养肝癌HepG2细胞并转染lncRNA UCA1特异性短发夹shRNA质粒(shRNA1和shRNA2),利用 CCK-8法、Transwell小室和划痕实验观察沉默lncRNA UCA1表达对细胞增殖、侵袭及迁移的影响,并分别通过Realtime PCR和Western blot检测沉默lncRNA UCA1表达对细胞周期蛋白(Cyclin)D1、血管内皮生长因子(VEGF)、基质 金属蛋白酶(MMP)-9、黏着斑激酶(FAK)和整合素(Integrin)β3 mRNA和蛋白表达的影响。结果 lncRNA UCA1在 肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织。沉默lncRNA UCA1表达对肝癌HepG2细胞的生长有明显的抑制作用,同时 细胞侵袭和迁移能力明显下调。Western blot和Real-time PCR结果显示,Cyclin D1、VEGF、MMP-9、FAK和Integrin β 3的表达明显受到抑制。结论 lncRNA UCA1的异常表达与肝癌的发生发展有关,沉默lncRNA UCA1可抑制癌细胞 的增殖、侵袭和迁移。