天津医药 ›› 2015, Vol. 43 ›› Issue (8): 871-875.doi: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.08.011
王欣,秦宇
WANG Xin, QIN Yu
摘要: 目的观察白细胞介素(IL)-1β对大鼠软骨细胞基质金属蛋白酶(MMP)-13 表达的影响及miR-27b 的调控作用。方法雄性Wistar 大鼠7 只提取软骨细胞。Western blot 检测IL-1β刺激软骨细胞0 h、24 h、48 h 各时间点 MMP-13 表达变化;miRNAs 微阵列分析48 h 内软骨细胞差异表达的miRNAs;Real-time PCR 定量分析筛选出下调最为明显的miRNAs;荧光素酶报告基因实验验证miR-27b 与MMP-13 的靶定调控关系。结果IL-1β刺激软骨细胞后,MMP-13 蛋白在0 h、24 h、48 h 各时间点表达逐渐增加(P < 0.05);miRNAs 微阵列分析发现48 h 内软骨细胞有36 个miRNAs 出现表达变化,变化最为明显的有6 个,分别为miR-27b、miR-31、miR-26a、miR-26b、miR-23、 miR-204;Real-time PCR 显示miR-27b 下调最为明显;miR-27b 拟似物和荧光素酶表达质粒共转染软骨细胞后,荧光素酶活性受到明显抑制(P < 0.05)。结论IL-1β刺激软骨细胞后,出现miR-27b 的表达下调和MMP-13 蛋白的表达上调,miR-27b 与MMP-13 存在靶定调控关系。