天津医药 ›› 2015, Vol. 43 ›› Issue (9): 974-977.doi: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.09.004
赵艳, 李丽华△, 赵颂
ZHAO Yan, LI Lihua△, ZHAO Song
摘要: 摘要: 目的 探讨天然小分子化合物青蒿琥酯 (Akt) 通过诱导人头颈部鳞癌细胞凋亡而抑制肿瘤生长的分子机制。方法 培养人头颈部鳞癌细胞系 UM-SCC-10A, 利用四甲基偶氮唑蓝 (MTT) 法检测 Akt 半数抑制浓度 (IC50 );在荧光显微镜下观察不同浓度 (0、 2.5、 5、 10、 20、 40 μmol/L) Akt 对细胞形态的影响; 流式细胞仪检测细胞周期及凋亡情况; 免疫印迹 (Western blot) 分析 Akt 诱导凋亡相关蛋白和细胞周期调节因子表达水平的变化。结果 Akt 对 UM- SCC-10A 细胞的生长有明显抑制作用, 且生长抑制率随药物浓度增加而增加; 当 Akt 处理细胞 48 h 时, IC50 为 15.01 μmol/L。荧光显微镜下, 使用细胞核染料 Hoechst33258 观察到细胞核内出现凋亡小体; 流式细胞仪分析显示 Akt 诱导细胞周期阻滞在 G1 期, 细胞出现大量凋亡; Western blot 结果显示 P53、 P21 蛋白表达量上调、 细胞周期蛋白 D (Cy⁃ cline D) 下调; 线粒体途径诱导的 Bcl-2 相关 X 蛋白 (Bax)、 细胞色素 C (cytochrome C) 及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 (caspase-3) 表达上调, B 细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、 procaspase-3 表达下调, 线粒体膜电位降低。结论 Akt 经由线粒体途径诱导 UM-SCC-10A 细胞凋亡, 阻滞细胞周期于 G1期, 进而抑制肿瘤细胞增殖。