-514 bp 及-250bp位点基因多态性对肝脂酶转录活性的影响

-514 bp 及-250bp位点基因多态性对肝脂酶转录活性的影响

蔡泽园¹,赵莉莉²,毛用敏²,崔让庄²

1. 天津市胸科医院心血管病研究所
2. 天津市胸科医院

收稿日期:2011-08-03 修回日期:2011-12-02 出版日期:2012-08-15 发布日期:2012-08-15
通讯作者: 蔡泽园

The effect of Hepatic Lipase Gene Promoter Polymorphisms on its transcriptional activity

Received:2011-08-03 Revised:2011-12-02 Published:2012-08-15 Online:2012-08-15
Contact: CAI ze Yuan

蔡泽园1 ,赵莉莉2 ,毛用敏2 ,崔让庄2 . -514 bp 及-250bp位点基因多态性对肝脂酶转录活性的影响[J]. .

摘要/Abstract

摘要： 摘要目的：构建同时含肝脂酶（HL）启动子-514和-250多态位点的野生型及变异纯合子型的荧光素酶表达质粒，将其转染至HepG2细胞中表达，比较该基因变异对HL转录活性的影响。方法：PCR法扩增含不同目的基因的DNA片段，将目的基因插入到pUCm-T质粒中，获取含 SacI及BagII酶切位点的目的基因，再将该基因与含荧光素报告基因的pGL2质粒相连，构建pGL2-HL/ -514T+-250A变异纯合型以及 pGL2-HL/-514C+-250G野生型荧光素酶表达质粒，转染至HepG2细胞内表达，双荧光素酶检测系统检测不同重组质粒荧光素酶报告基因的活性。结果：（1）成功构建了同时含HL启动子部位-514/ -250位点的野生型和变异纯合型的荧光素酶表达质粒。（2）pGL2-HL/ -514T+-250A变异纯合型的荧光素酶相对表达活性明显低于野生型荧光素酶表达活性。结论：HL启动子-514及-250位置基因的联合变异可直接影响HL的转录活性。

关键词: 肝脂酶, 启动子, 多态现象, 转录活性, 荧光素酶

Abstract: Abstract Objective： To construct the recombinant plasmid containing the double luciferase report gene and the HL promoter -514/-250 sites.and tansfect the plasmids to HepG2 cells.Then to analyse HL transcriptional activity. Method: Construct luciferase reporter vector containing HL promoter -514T/-250A and -514C/-250G polymorphisms, tested by Dual Luciferase Reporter Assay System, use Fluoroskan Ascent FL test the 10 second value. Result: The luciferase reporter vector contain with HL promoter -514T+-250A present higher HL transcriptional activity than the vector with -514C+-250G. Conclusion: HL promoter -514C together with -250G alleles are associated with higher HL tanscriptional activity, so proved that HL promoter polymorphisms can influence the HL transcriptional activity on the molecular mechanism.

Key words: Hepatic lipase, Promoter, Polymorphism, Transcriptional activity, Luciferase

[1]	刘雨, 吕冬梅, 薛婷, 丑晓华, 高杏. JAK2 rs10119004基因多态性对伏立康唑治疗ICU侵袭性真菌感染患者的影响[J]. 天津医药, 2021, 49(10): 1063-1067.
[2]	薛敏敏, 刘丽萍, 邹喜娣, 杜光辉, 王月英, 张心怡, 付志刚△. FTO基因rs8050136多态性与多囊卵巢综合征相关性的Meta分析 #br#[J]. 天津医药, 2020, 48(6): 558-562.
[3]	代龙光, 朱丽英, 沈婕, 钱雯, 张競之, 朱金凤, 许永劼, 刘歆蕾, 许雯, 朱科静, 张令, 潘卫, 李兴, △. IRX5促进肝癌细胞的侵袭迁移及其与miR-136-5p靶向关系的验证#br#[J]. 天津医药, 2020, 48(5): 358-363.
[4]	杨念 , 李琛 , 李洪亮 , 郑燕 , 房树华 , 汪选斌 , 赵雅玮 . 基于双荧光素酶报告基因系统的人源SREBP1基因启动子的活性研究[J]. 天津医药, 2019, 47(9): 897-902.
[5]	张蕊, 赵辉, 赵福梅, 任珉, 刘婷, 刘珊, 丛洪良. 载脂蛋白E启动子区域-427T/C多态性与冠心病的关系及其对转录活性的影响[J]. 天津医药, 2019, 47(8): 842-847.
[6]	李晓娟, 周芝熠, 王珏 , 钱源 . HOTAIR上调miR-152靶向调控HLA-G的生物信息作用预测与验证[J]. 天津医药, 2019, 47(10): 1014-1019.
[7]	马五林，杨芳△，杨娜，运莉娜，王川川，赵双凤，李霞. MTHFR C677T 基因多态性与慢性肺源性心脏病易感性研究[J]. 天津医药, 2017, 45(2): 184-186.
[8]	王珊 1,2，李晓霞 2，周杰 1，王宝利 1△. Nfic 基因 3′UTR 双荧光素酶报告质粒的构建及其与 miR-20a 靶向关系的验证[J]. 天津医药, 2016, 44(9): 1065-1068.
[9]	白朝. 雌激素受体基因多态性与黄褐斑发病的关系[J]. 天津医药, 2016, 44(7): 887-891.
[10]	刘晓彬，仝颖娜，张露芳，周云丽. 雌激素受体对乳腺癌细胞截短型神经激肽受体-1 的调控作用[J]. 天津医药, 2016, 44(12): 1409-1413.
[11]	梁恩利，吴长利△，王莹，胡海龙，田大伟. CCNE1、RIP2基因多态性与膀胱癌发病风险的关系[J]. 天津医药, 2015, 43(9): 1022-1025.
[12]	方玉莲,马世坤, 石鸥燕,张鹏, 蔡春泉. MTHFR基因C677T多态性与神经管缺陷相关性的Meta分析[J]. 天津医药, 2015, 43(5): 552-558.
[13]	谭艳萍1,刘寅2△,高静2,孙根义2. PCSK9基因 rs11206510多态性与血脂及冠心病的关系[J]. 天津医药, 2015, 43(2): 179-182.
[14]	张蕾 1，蔡伟娟 1，张丽翠 1，张红梅 1，潘泽民 2，程江 1△. 胱硫醚β合成酶基因T833C多态性与新疆哈、汉民族原发性高血压的相关性研究[J]. 天津医药, 2015, 43(1): 8-11.
[15]	张娜 1，史云芳 1，李晓洲 1，李岩 1，琚端 1，辛力 2，姚静怡 2，谢晓媛 2，刘殿芹 1，杨晓惠 1，. 天津汉族人女性群HPRTB、DXS6803、DXS6809 STR基因座遗传多态性研究[J]. 天津医药, 2015, 43(1): 12-16.