天津医药 ›› 2018, Vol. 46 ›› Issue (1): 32-37.doi: 10.11958/20170824
闫美玲 1,秦寅鹏 1,王文一 2,张弋 1△
YAN Mei-ling1, QIN Yin-peng1, WANG Wen-yi2, ZHANG Yi1△
摘要: 目的 探讨 Toll 样受体 4(TLR4)在棕榈酸诱导 RAW264.7 巨噬细胞炎症反应中的作用及可能机制。方 法 观察正常对照组(正常饮食)和高脂饲料组(高脂饮食诱导肥胖小鼠模型)C57BL/6J 小鼠血清自由脂肪酸(FFA) 水平及内脏脂肪组织炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP- 1)的表达;采用棕榈酸(150 μmol/L 组和 300 μmol/L 组)刺激小鼠 RAW264.7 巨噬细胞,观察这 2 组和空白对照 (Control)组、无 FFA 牛血清白蛋白(BSA)组的 TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的表达和分泌,同时检测 TLR4 的蛋白表达和 核因子-κB(NF-κB)的激活情况;利用 siRNA 干扰实验抑制 TLR4,观察在 Control 组、BSA 组、棕榈酸(300 μmol/L) 组、棕榈酸(300 μmol/L)+Control siRNA 组、棕榈酸(300 μmol/L)+TLR4 siRNA 组中棕榈酸诱导巨噬细胞炎症因子的 表达和分泌。结果 高脂饲料组体质量和 Lee’s 指数高于正常对照组,血清中 FFA 水平升高,内脏脂肪组织中 TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的表达明显增加(P<0.05)。与 BSA 组比较,棕榈酸 150 μmol/L 组和棕榈酸 300 μmol/L 组 炎症因子 TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的表达和分泌均明显增加,TLR4 和 NF-κB p65 磷酸化蛋白水平均增加(P<0.05)。 与 BSA 组比较,棕榈酸 300 μmol/L 组 NF-κB p65 的核转运水平和细胞内水平明显升高(P<0.05)。TLR4 被抑制 后,棕榈酸+TLR4 siRNA 组的 TLR4、TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的 mRNA 表达和分泌水平明显低于棕榈酸组(P< 0.05)。结论 TLR4 可能参与棕榈酸诱导的 RAW264.7 巨噬细胞炎症反应,诱导炎症因子 TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的释放,且其介导的炎症反应与 NF-κB 的激活有关。