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人胰腺癌细胞SOCS1基因沉默对细胞增殖和干扰素-γ敏感性的影响

吕清林   

  1. 聊城大学医院
  • 收稿日期:2014-04-09 修回日期:2014-05-22 出版日期:2014-09-15 发布日期:2014-09-15
  • 通讯作者: 吕清林

LYU Qinglin   

  1. The Affiliated Hospital of Liaocheng University, Liaocheng252000, China
  • Received:2014-04-09 Revised:2014-05-22 Published:2014-09-15 Online:2014-09-15
  • Contact: LYU Qinglin

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摘要：

【摘要】目的在人胰腺癌细胞中观察细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）沉默对细胞增殖及干扰素-γ （IFN-γ）敏感性的影响，探讨SOCS1作为胰腺癌治疗靶点的可能。方法Western blot及PCR验证SOCS1干扰序列沉默人胰腺癌细胞系PANC1中SOCS1的表达；给予IFN-γ刺激后，采用Western blotting方法观察转录激活因子（STAT）1及磷酸化STAT（pSTAT）1的变化；采用定量PCR的方法观察IFN-γ调节因子1（IRF-1）表达水平变化； MTT法检测胰腺癌细胞对IFN-γ敏感性的变化；细胞计数的方法观察细胞的增殖速度；采用流式细胞术的方法检测细胞周期的变化。结果将SOCS1干扰序列转染PANC1细胞后，SOCS1mRNA及蛋白表达水平均明显下降。沉默 SOCS1表达后，pshSOCS1-PANC1组细胞的IRF-1mRNA水平及pSTAT1蛋白表达水平均显著升高（P<0.05），IFN-γ 对PANC1细胞的半数抑制浓度（IC50）显著降低（P<0.01）；转染72h后PANC1细胞数量较对照组显著减少（P< 0.05）；SOCS1表达抑制后PANC1细胞G0/G1期细胞比例明显升高，而S期和G2/M期细胞比例明显减小，与对照组比较差异均有统计学意义。结论SOCS1表达抑制后，人胰腺癌细胞株PANC1的增殖能力下降，并且对IFN-γ的敏感性增强。

关键词: 胰腺肿瘤, 癌, 基因沉默, 细胞增殖, 干扰素Ⅱ型, 转染, 半数抑制浓度

Key words: pancreatic neoplasms, carcinoma, gene silencing, cell proliferation, interferon type II, transfection, IC50