天津医药 ›› 2015, Vol. 43 ›› Issue (11): 1253-1257.doi: 10.11958/j.issn.0253-9896.2015.11.009
刁小伟， 李园， 皮玉瑞， 李同辉， 刘平， 卢山△#br#
DIAO Xiaowei， LI Yuan， PI Yurui， LI Tonghui， LIU Ping， LU Shan△#br#
摘要： 目的 探讨雄激素依赖性前列腺癌细胞中促红细胞生成素产生肝细胞 A 型受体（EphA） 3 表达和雄激素受体 （AR） 信号通路的关联。方法 首先通过逆转录聚合酶链式反应 （RT-PCR） 和蛋白免疫印迹实验 （Western blot）分别检测前列腺癌细胞 LNCaP 和 22Rv1 中 EphA3 和 AR 的 mRNA 及蛋白水平， 然后用双氢睾酮（DHT）刺激 48 h，测定细胞 EphA3、 AR 和前列腺特异抗原（PSA）表达水平的变化。同时， 将成功构建的荧光素酶报告基因重组质粒EphA3-Luc（-789~+146）与 AR 表达质粒 pcDNA3.1（+） -AR 或 AR 特异性小分子干扰 RNA（siAR）共转染 22Rv1 细胞， 分析 AR 对 EphA3 转录活动的影响。结果 EphA3 在前列腺基质细胞 WPMY-1 中表达水平极低， 但在前列腺癌细胞 LNCaP 和 22Rv1 中则明显升高， 与 AR 表达模式相似。10 nmol/L DHT 不仅明显上调 22Rv1 细胞中 AR、 PSA和 EphA3 表达水平， 也显著升高 LNCaP 细胞中相关基因和蛋白水平。而且细胞内不同 AR 表达水平会显著影响EphA3 启动子活性。结论 AR 通过提高 EphA3 启动子活性上调EphA3 表达水平。
