天津医药

天津医药 ›› 2016, Vol. 44 ›› Issue (12): 1418-1422.doi: 10.11958/20160597

• 细胞与分子生物学 • 上一篇    下一篇

香芹酚诱导非小细胞肺癌1299细胞凋亡的实验研究

罗磊， 王永坤， 李世康△   

  1. 广西医科大学第一附属医院心胸外科 （邮编 530021）
  • 收稿日期:2016-06-28 修回日期:2016-10-09 出版日期:2016-12-15 发布日期:2017-01-26
  • 通讯作者: 李世康 △通讯作者 E-mail： shikangli@hotmail.com E-mail:23822082@qq.com
  • 作者简介:罗磊 （1983）， 男， 主治医师， 硕士在读， 主要从事肺癌研究

Study on the carvacrol induced apoptosis in human non-small cell lung cancer cell line H1299

LUO Lei, WANG Yongkun, LI Shikang△   

  1. Department of Thoracic and Cardiovascular Diseases, the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021,China
  • Received:2016-06-28 Revised:2016-10-09 Published:2016-12-15 Online:2017-01-26
  • Contact: LI Shikang △Corresponding Author E-mail: shikangli@hotmail.com E-mail:23822082@qq.com

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摘要： 摘要： 目的 探讨香芹酚 （CV） 对人非小细胞肺癌 （NSCLC） NCI-H1299 细胞的增殖、 凋亡及侵袭的作用及可能机制。方法 以不同浓度的 CV （20、 40、 60、 80 μmol/L） 处理 NCI-H1299 细胞， 以未经 CV 处理的细胞为对照组。采用四甲基偶氮唑蓝 （MTT） 比色法检测细胞存活率； 流式细胞术检测各组细胞凋亡率； Transwell 法检测 40 μmol/L CV 处理组和对照组细胞侵袭能力； 实时荧光定量 PCR 及 Western blot 检测 40 μmol/L CV 处理组和对照组的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 （caspase） -9、 基质金属蛋白酶 （MMP） -9、 TIMP-1 的 mRNA 及蛋白水平的表达变化。结果 与对照组比较， CV 各处理组 NCI-H1299 细胞存活率均明显降低， 而凋亡率增加 （P＜0.05）， 但抑制效应均不呈浓度依赖性（P＞0.05）。CV 处理组侵袭细胞数 （40.67±3.63） 个明显低于对照组 （76.00±5.78） 个 （P＜0.01）。CV 处理组较对照组 caspase-9、 TIMP-1 的 mRNA 和蛋白表达水平均增高， MMP-9 的 mRNA 和蛋白表达水平均降低 （P＜0.01）。结论 CV 可诱导人 NSCLC NCI-H1299 细胞凋亡， 抑制其侵袭， 作用机制可能与 caspase-9 的活性增加及 MMP-9 的下调有关。

关键词: 非小细胞肺癌, 细胞凋亡, 肿瘤侵润, 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 9, 基质金属蛋白酶 9, 金属蛋白酶类组织抑制剂, 香芹酚, 人非小细胞肺癌NCI-H1299细胞

Abstract: Abstract：Objective To study whether carvacrol can cause apoptosis in non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line NCI-H1299, and explore its possible molecular mechanism. Methods NCI-H1299 cells were treated with different concentrations of carvacrol (20, 40, 60 and 80 μmol/L) for 24 or 48 h. The viability of cells was evaluated by MTT assay, apoptosis was analyzed by flow cytometry (FCM) and the effect of carvacrol on metastasis of NCI-H1299 was analyzed by Transwell assay. The expression level of caspase-9, MMP-9 and TIMP-1 were detected by quantitative realtime-PCR and Western blot assay. Results After treatment with carvacrol, the viability of NCI-H1299 cells was suppressed dramatically (P<0.05), without dose-dependent manner (P>0.05). After being incubated with carvacrol for 24 h, FCM analysis indicated that carvacrol effectively induced apoptosis in NCI-H1299 cells (P<0.05), without dose-dependent manner (P>0.05). The ability of invasion was decreased (40.67±3.63 vs. 76.00±5.78). Carvacrol inhibited the protein and mRNA expression levels of caspase-9, but increased the expression of MMP-9 and TIMP-1 (P＜0.05). Conclusion Carvacrol can induce apoptosis of NCI-H1299 cells and inhibit their invasion, which may be associated with up-regulation of caspase- 9 expression and down-regulation of MMP-9 expression.

Key words:  carcinoma, non-small-cell lung, apoptosis, neoplasm invasiveness, caspase 9, matrix metalloproteinases 9, tissue inhibitor of metalloproteinases, Carvacrol human non-small cell lung cancer NCI-H1299 cells