天津医药 ›› 2017, Vol. 45 ›› Issue (3): 225-228.doi: 10.11958/20160773
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田园, 张苗苗, 时文涛, 李申, 王玉川, 何玉坤, 李卫东△
TIAN Yuan, ZHANG Miao-miao, SHI Wen-tao, LI Shen, WANG Yu-chuan, HE Yu-kun, LI Wei-dong△
摘要: 摘要: 目的 探讨缺氧环境下雷公藤甲素 (TP) 对人脐静脉内皮细胞 (HUVECs) 中缺氧诱导因子 1α (HIF1α) 和血管内皮生长因子 (VEGF) 表达的影响。方法 (1) HUVECs 加入 0、 40、 80、 160、 320 nmol/L 的 TP (分别为缺氧组, TP40组、 TP80 组、 TP160 组、 TP320 组) 在缺氧条件下 (37 ℃、 5%CO2、 1%O2、 94%N2) 培养 12 h, 同时设常氧组 (不加 TP) 作为 对照, Western blot 检测各组 HIF1α 蛋白表达。(2)细胞设 TP80 组、 缺氧组和常氧组, 免疫荧光法检测 HIF1α 在细胞中的表达定位。(3) 设 TP80 组和缺氧组, 处理结束后 Western blot 检测 VEGF 蛋白表达水平。(4) 设缺氧组、 TP80 组,TP80+KF20 组(80 nmol/L TP 和 20 μmol/L KC7F2)、 TP80+KF30 组(80 nmol/L TP 和 30 μmol/L KC7F2), 处理 12 h 后Western blot 检测各组 HIF1α、 VEGF 蛋白表达。结果 (1)常氧条件下 HUVECs 不表达 HIF1α; 缺氧条件下, TP80组 HIF1α 表达水平较缺氧组明显升高(P < 0.05), TP160 组和 TP320 组 HIF1α 表达水平与缺氧组相比无明显变化。(2)细胞免疫荧光结果显示 HIF1α 主要表达于细胞核。(3) TP80 组 VEGF 表达水平较缺氧组升高(P < 0.05)。(4)经KC7F2 干预后, TP80+KF20 组和 TP80+KF30 组 HIF1α、 VEGF 表达水平较 TP80 组明显降低 (P < 0.05)。结论 缺氧环境下 TP 可通过提高 HIF1α 和 VEGF 表达来促进内皮细胞的增殖。