天津医药 ›› 2019, Vol. 47 ›› Issue (1): 5-9.doi: 10.11958/20181312
皮闻森,刘家明,黄山虎,刘志礼△
PI Wen-sen, LIU Jia-ming, HUANG Shan-hu, LIU Zhi-li△
摘要: 目的 探讨 Aurora-B 介导 NPM1(nucleophosmin1)蛋白磷酸化水平改变对骨肉瘤细胞恶性表型的影响。 方法 运用生物信息学数据库预测NPM1在肉瘤中的表达情况以及Aurora-B与NPM1的相互关系。构建重组慢病 毒载体,获得沉默 Aurora-B 慢病毒(LV/ShAurora-B)、过表达 NPM1 慢病毒(LV/NPM1)和阴性对照慢病毒(LV/ negative)。转染人源骨肉瘤细胞系143B及U2-OS细胞,分为Lv/ShAurora-B组、NC(LV/negative)组和LV/ShAuroraB+LV/NPM1共转染组。Western blot分别检测LV/ShAurora-B组和NC组中Aurora-B、磷酸化NPM1ser125蛋白表达。采 用CCK-8法检测3组细胞增殖情况,Wound healing 法检测细胞迁移能力,Transwell invasion 法检测细胞侵袭能力。 结果 生物信息学结果显示,NPM1在肉瘤中高表达以及NPM1高表达患者的预后较差,且NPM1存在丝氨酸和苏氨 酸磷酸化位点,Aurora-B与NPM1之间可能存在磷酸化作用。Western blot结果显示,与NC组相比,LV/ShAurora-B组 中Aurora-B和磷酸化NPM1ser125蛋白的表达均降低(P<0.05),而NPM1蛋白差异无统计学意义(P>0.05)。体外表型 实验显示,LV/ShAurora-B组细胞的增殖、迁徙和侵袭能力均低于NC组(P<0.05),且LV/ShAurora-B+LV/NPM1共转 染组能部分恢复下调Aurora-B对骨肉瘤细胞恶性表型的抑制(P<0.05)。结论 Aurora-B通过介导NPM1蛋白磷酸 化促进骨肉瘤细胞恶性表型。