天津医药 ›› 2019, Vol. 47 ›› Issue (12): 1205-1209.doi: 10.11958/20191656
王梦平1,王丽2,高利超1,肖文1,甘林望1,吴蔚桦1,刘建1,3△
WANG Meng-ping1, WANG Li2, GAO Li-chao1, XIAO Wen1, GAN Lin-wang1, WU Wei-hua1, LIU Jian1,3△
摘要: 目的 探讨生松素(Pb)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质(ECM)合成的影响及其机制。方法 以大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,将实验分为以下5组:正常对照(NC)组、1×10-6mol/L AngⅡ(Ng)组、1×10-6 mol/L AngⅡ+1‰ DMSO(Ng-D)组、 1×10-6 mol/L AngⅡ+30 μmol/L Pb(Ng-Pb)组、1×10-6 mol/L AngⅡ+10 μmol/L缬沙坦(Ng-Val)组。分别在干预12、24、48 h搜集细胞和上清液,采用Western blot检测Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤连蛋白(FN)、转化生长因子-β( 1 TGF-β1 )、Smad3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化NF-κB(pNF-κB)的蛋白水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中ColⅣ、FN、TGF-β1、TNF-α、IL-6的mRNA水平。结果 (1)Pb对 AngⅡ诱导的系膜细胞合成ECM的影响:与NC组相比,Ng组细胞内ColⅣ和FN的蛋白质和mRNA 水平升高(P<0.05),而Ng-Pb组和Ng-Val组细胞内ColⅣ和FN的蛋白质和mRNA水平均较Ng组降低(P<0.05)。(2)Pb对TGF-β1/Smad3通路的 影响:与NC组相比,Ng组细胞内TGF-β1的蛋白质和mRNA水平增加,p-Smad3/Smad3水平增加( P<0.05),而Ng-Pb组和Ng-Val组细胞内TGF-β1的蛋白质和mRNA水平以及p-Smad3/Smad3水平均较Ng组降低(P<0.05)。(3)Pb对NF-κb介导的促炎症因子产生的影响:与NC组相比,Ng组 p-NF-κb/NF-κb水平增加,IL-6和TNF-α的蛋白质和mRNA水平增加(P<0.05),而Ng-Pb组和 Ng-Val组p-NF-κb/NF-κb水平以及IL-6和TNF- α的蛋白质和mRNA水平均较Ng组降低(P<0.05)。结论 Pb可能通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路和NF-κb介导的促炎症因子的产生, 从而抑制AngⅡ诱导的大鼠系膜细胞合成ECM。
中图分类号: