天津医药 ›› 2020, Vol. 48 ›› Issue (3): 177-181.doi: 10.11958/20192608
于明懂,李佩,于泳浩,卢悦淳,陈会敏,王新,谢克亮
YU Ming-dong,LI Pei,YU Yong-hao,LU Yue-chun,CHEN Hui-min,WANG Xin,XIE Ke-liang
摘要: 目的 评价吸入氢气对脓毒症小鼠海马组织的 DNA甲基化状态的影响。方法 54只健康雄性 C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为 3组:假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sepsis组)和氢气治疗组(Sepsis+H2组),每组 18只。Sepsis组和 Sepsis+H2组采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制备小鼠脓毒症模型,Sepsis+H2组小鼠于手术后 1 h和 6 h吸入用空气混合的 2%氢气 1 h,Sham组只开腹不进行盲肠结扎和穿孔。3组小鼠于假手术或 CLP后 1、3、7 d取小鼠海马组织,比色法测定全基因组 DNA甲基化水平;实时定量 PCR法检测 DNA甲基化转移酶(DNMTs,包括 DNMT1、DNMT3a和 DNMT3b)的 mRNA水平;Western blot法检测 DNMT1、DNMT3a和 DNMT3b蛋白表达水平。结果 与 Sham组比较,Sepsis组小鼠在建模后 1、3、7 d海马组织全基因组甲基化水平明显下降(P<0.05),DNMT1和 DNMT3a的 mRNA和蛋白表达水平升高,DNMT3b的 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与 Sepsis组比较,Sepsis+H2组全基因组甲基化水平升高(P<0.05),DNMT1和 DNMT3a的 mRNA和蛋白表达水平下降,DNMT3b的 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 吸入氢气可纠正脓毒症小鼠海马组织的 DNA甲基化紊乱状态,改善 DNA甲基化紊乱状态是氢气治疗脓毒症相关性脑病的重要机制之一。