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    细胞与分子生物学
    3-O-C12-HSL通过抑制lncRNA CD48-AS和CD48的表达而阻碍Mo-DCs成熟
    罗燕芬 , 庄奇真 , 张轩 , 陈茶 , 刘杨 , 颜星星 , 肖倩 , 李有强
    2021, 49 (12):  1233-1239.  doi: 10.11958/20210909
    摘要 ( 522 )   PDF(1437KB) ( 2888 )  
    目的 筛选并阐明长链非编码RNA(lncRNA)CD48-AS与其反义互补分子CD48 mRNA在N-3-氧代十二 烷酰-L-同型丝氨酸内酯(3-O-C12-HSL)阻碍人单核细胞诱导的树突状细胞(Mo-DCs)成熟过程中发挥作用的机制。 方法 从健康人外周血中分离Mo-DCs,将未成熟的Mo-DCs细胞分为阴性对照组(0.1% DMSO)、脂多糖(LPS)阳性 对照组(100 μg/L的LPS)和实验组(100 μg/L LPS+40 μmol/L 3-O-C12-HSL)进行lncRNA芯片检测。筛选lncRNA表 达谱中差异表达 5 倍以上的自然反义 lncRNA 进行聚类分析,从中筛选差异具有统计学意义的自然反义 lncRNA CD48-AS。未成熟的 Mo-DCs 分为阴性对照组、LPS 阳性对照组以及 LPS+C5、C10、C25 实验组(分别加入 5、10、 25 μmol/L的3-O-C12-HSL)。利用荧光定量PCR检测lncRNA CD48-AS和反义分子CD48 mRNA在实验体系中的表 达水平;通过生物信息学分析lncRNA CD48-AS与CD48反义互补区及其蛋白编码功能;通过核糖核酸酶保护实验 (RPA)验证lncRNA CD48-AS是否与CD48形成二聚体,从而通过影响靶CD48的表达来发挥调控作用。最后检测 lncRNA CD48-AS在细胞内的定位。结果 3-O-C12-HSL处理Mo-DCs后lncRNA表达谱出现了特异性改变。3-OC 12-HSL可下调由LPS诱导的Mo-DCs中lncRNA CD48-AS及其反义靶分子CD48的表达。生物信息学分析lncRNA CD48-AS 不具备蛋白编码功能,为非编码 RNA;lncRNA CD48-AS 与 CD48 形成 RNA 二聚体从而减少 RNA 酶对 CD48 mRNA的降解,使得CD48 mRNA表达增加;lncRNA CD48-AS在Mo-DCs中主要定位在细胞核中,细胞质中表 达量较少。结论 3-O-C12-HSL可通过下调lncRNA CD48-AS,进而影响CD48的表达来阻碍Mo-DCs的成熟。
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    低氧对HTR-8/SVneo细胞增殖及HIF-1α、VEGF、MMP-9、TIMP-1表达的影响
    袁烁 , 刘湘云 , 张家旗 , 邓高丕
    2021, 49 (12):  1240-1244.  doi: 10.11958/20211483
    摘要 ( 576 )   PDF(592KB) ( 2855 )  
    目的 采用二氯化钴(CoCl2)模拟体外低氧环境,探讨低氧状态对滋养细胞株HTR-8/SVneo细胞增殖及缺 氧诱导因子(HIF)-1α、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子 1 (TIMP-1)蛋白表达的影响。方法 采用0、50、100、200、400、800、1 000、1 200 μmol/L的CoCl2处理HTR-8/SVneo细 胞,建立化学缺氧模型,CCK8法检测以上浓度培养24 h、48 h后对HTR-8/SVneo细胞增殖的影响;根据CCK8实验结 果拟定 CoCl2低、中、高浓度组,Western blot 检测 CoCl2低、中、高浓度组作用 48 h 对 HTR-8/SVneo 细胞中 HIF-1α、 VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响。结果 CCK8实验提示低氧状态激活HTR-8/SVneo细胞增殖,CoCl2作用于 HTR-8/SVneo细胞48 h后,OD值随浓度增加而上升;同一CoCl2浓度作用下,作用48 h较作用24 h的OD值均上升。 选择100、200、400 μmol/L的CoCl2作为CoCl2低、中、高浓度组。与空白组对比,CoCl2低、中、高浓度组HTR-8/SVneo 细胞中HIF-1α、MMP-9蛋白表达水平上调(P<0.05),MMP-9/TIMP-1比例上升,呈浓度依赖性(P<0.05),CoCl2中、 高浓度组的VEGF的蛋白表达水平上调(P<0.05),CoCl2低、中、高浓度组的TIMP-1蛋白表达水平下降,但随CoCl2浓 度增加而呈上升趋势。结论 低氧状态可增强 HTR-8/SVneo 细胞的增殖能力,并可能通过 HIF-1α 的介导上调 VEGF的表达与MMP-9/TIMP-1比值。
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    白藜芦醇抑制人牙龈成纤维细胞炎症和氧化应激的机制研究
    李丽华, 王玉娇, 李俊雄, 李思玉, 唐婉容, 邱亚
    2021, 49 (12):  1245-1249.  doi: 10.11958/20210918
    摘要 ( 563 )   PDF(696KB) ( 2865 )  
    目的 探讨白藜芦醇(RSV)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(HGF)的炎症和氧 化应激的调节作用。方法 原代培养HGF,将细胞分为实验1和实验2:实验1细胞分为对照组、LPS组、RSV 20 μmol/L 组、RSV 40 μmol/L组、RSV 80 μmol/L组、LPS+RSV 20 μmol/L组、LPS+RSV 40 μmol/L组和LPS+RSV 80 μmol/L组;实 验2细胞分为对照组、LPS组、LPS+RSV 40 μmol/L 组、LPS+RSV 40 μmol/L+E5564组和LPS+E5564组。通过CCK-8 法评估细胞活力。利用酶联免疫吸附试验测定白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α、超氧化物歧 化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。通过Western blot分析测量蛋白的表达水平。结 果 20、40和80 μmol/L RSV对HGF均没有明显的细胞毒性作用。在LPS诱导的HGF细胞中,40和80 μmol/L RSV 通过下调IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的表达减弱炎症反应,降低了MDA的含量,并显著提高了SOD的水平,80 μmol/L RSV显著提高了GSH-Px水平(P<0.05)。此外,20、40和80 μmol/L RSV可诱导Toll样受体4(TLR4)/MyD88/NF-κB 信号通路的失活,其均可降低TLR4、MyD88和p-p65蛋白的表达水平(P<0.05)。TLR4抑制剂(E5564)通过下调IL- 1β、IL-6、IL-8和TNF-α的产生以及上调GSH-Px水平进一步增强了RSV对炎症和氧化应激损伤的缓解作用(P< 0.05)。结论 RSV可通过诱导TLR4/MyD88/NF-κB信号通路失活,减轻LPS导致的HGF炎症和氧化应激损伤。
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    DNMT1通过下调SOX1表达参与宫颈癌生长和转移的机制研究
    智艳芳, 张婷, 刘慧, 曾宪旭, 班振英, 张威
    2021, 49 (12):  1250-1255.  doi: 10.11958/20211084
    摘要 ( 526 )   PDF(851KB) ( 2876 )  
    目的 探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)通过调节性别决定区Y-框1(SOX1)表达对宫颈癌(CC)生长和转 移的影响。方法 采用亚硫酸氢盐定量PCR测定CC组织和细胞及CC癌旁组织和正常宫颈细胞中SOX1甲基化水 平,Western blot检测DNMT1、SOX1蛋白表达。将HeLa229和SW756细胞分为DNMT1-NC组、DNMT1-siRNA组和空 白组,采用亚硫酸氢盐定量 PCR 测定 SOX1 甲基化比例,Western blot 检测 DNMT1、SOX1、c-Myc、Cyclin D1 及 β- catenin蛋白表达,细胞克隆和裸鼠成瘤实验测定细胞增殖,Transwell实验测定细胞迁移和侵袭。结果 CC组织较癌 旁组织DNMT1表达水平及SOX1甲基化比例增高,SOX1蛋白表达降低(P<0.05);宫颈癌HeLa229、ME-180、SiHa、 SW756细胞较宫颈上皮Ect1/E6E7细胞DNMT1表达水平及SOX1甲基化比例增高,SOX1蛋白表达降低(P<0.05)。 与空白组、DNMT1-NC组比较,DNMT1-siRNA组HeLa229和SW756细胞体外克隆形成数、迁移和侵袭数量减少,裸 鼠内瘤体质量减轻,DNMT1、c-Myc、Cyclin D1、核/质β-catenin蛋白表达及SOX1甲基化比例降低,SOX1蛋白表达增 加(P<0.05)。结论 DNMT1在CC组织和细胞中高表达,可能通过维持SOX1启动区高甲基化并抑制其蛋白表达, 促进CC生长和转移。
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    m6A修饰调控的COL6A5对肺腺癌细胞侵袭能力的影响
    王馨, 黄嘉星, 潘辉林, 冯正富, 汤锐明, 邱惠思
    2021, 49 (12):  1255-1260.  doi: 10.11958/20202783
    摘要 ( 602 )   PDF(1246KB) ( 3030 )  
    目的 明确6型胶原蛋白α5(COL6A5)在肺腺癌中的表达及意义。方法 通过在线数据库及实时荧光定 量PCR(qPCR)法检测COL6A5在肺腺癌细胞和组织中的表达。采用GEPIA数据库分析COL6A5的表达量与肺腺癌 患者预后的相关性。生物信息学预测结合 RNA 甲基化免疫沉淀-实时荧光定量 PCR(MeRIP-qPCR)实验检测 COL6A5转录本上的m6A位点。qPCR法检测RNA去甲基酶ALKBH5在肺腺癌组织中的表达量,并分析ALKBH5与 COL6A5在27例肺腺癌组织中表达的相关性。qPCR和Western blot检测ALKBH5对COL6A5的抑制作用。生物信息 学预测结合Transwell实验和Western blot验证COL6A5在肺腺癌中的作用。结果 在线数据库Oncomine分析显示, COL6A5 在肺癌中低表达,GEPIA 数据库分析显示肺腺癌组织中 COL6A5 mRNA 表达水平显著低于正常组织(P< 0.05)。qPCR 结果显示,COL6A5 mRNA 在 27 例肺腺癌组织中的表达量低于癌旁组织;与正常肺上皮细胞相比, COL6A5 mRNA在肺腺癌细胞中的表达量明显受到抑制(P<0.05)。生物信息学预测结合MeRIP-qPCR 实验证实, COL6A5 mRNA上存在m6A位点。肺腺癌组织中ALKBH5 mRNA的表达水平高于癌旁正常组织,且与COL6A5 mRNA 表达呈负相关(r=-0.599,P<0.01)。在H1299细胞中敲低ALKBH5,可显著上调COL6A5的表达。分析与COL6A5共 表达的基因,结果显示 COL6A5 可能参与调控肺腺癌细胞上皮间质转换、止血和细胞表面相互作用等生命活动。 Transwell和Western blot证实,过表达COL6A5可显著抑制H1299细胞的侵袭转移能力。结论 ALKBH5在肺腺癌中 下调COL6A5,过表达COL6A5可明显抑制肺腺癌细胞的侵袭转移能力。
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    实验研究
    单眼剥夺性弱视小鼠图形视觉诱发电位时间频率调制变化的研究
    马博文, 吕文超, 王珏, 张伟, 史学锋
    2021, 49 (12):  1261-1264.  doi: 10.11958/20211190
    摘要 ( 452 )   PDF(521KB) ( 3039 )  
    目的 探讨单眼剥夺性弱视小鼠图形视觉诱发电位(PVEP)的时间频率调制的变化。方法 生后26 d健 康C57BL/6J小鼠18只,随机均分为正常对照组和单眼剥夺(MD)组。MD组小鼠右眼眼睑行褥式缝合,5 d造成单眼 形觉剥夺,建立弱视模型。对照组在相同环境下饲养至生后31 d。随后,2组小鼠均于视皮层硬脑膜表面埋置电极。 于生后32 d在麻醉状态下对小鼠的右眼行不同时间频率(2.50、1.25、1.00、0.75、0.50和0.25 Hz)的图形视觉刺激,记 录PVEP,比较2组在不同时间频率的视觉刺激下PVEP的P100波幅值的差异。结果 对照组小鼠对所有6种时间 频率的PVEP P100波反应幅值差异无统计学意义(F=2.214,P>0.05);MD组小鼠对6种时间频率的PVEP P100波反 应幅值差异有统计学意义(F=6.588,P<0.01),其时间频率调制曲线表现为低通特性。与对照组相比,高时间频率 (2.50和1.25 Hz)视觉刺激条件下,MD组P100波幅值显著降低(t分别为2.362和2.425,P<0.05)。在中低时间频率 (1.00、0.75、0.50和0.25 Hz)刺激条件下,与对照组相比,MD组的P100波反应幅值差异无统计学意义(均P>0.05)。 结论 MD小鼠对高时间频率视觉刺激的PVEP反应降低,而中低时间频率下的PVEP反应未受到明显影响。
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    APETx2及粪菌移植对母婴分离诱导肠易激综合征大鼠内脏敏感性的影响及机制
    李欢 , 闫波 , 王金坤 , 袁丽萍
    2021, 49 (12):  1265-1270.  doi: 10.11958/20211135
    摘要 ( 512 )   PDF(726KB) ( 2899 )  
    目的 探讨粪菌移植对母婴分离诱导的肠易激综合征(IBS)大鼠内脏敏感性的影响并观察酸敏感离子通 道3(ASIC3)抑制剂APETx2对其作用及可能机制。方法 取SD孕鼠10只,待其生产后取仔鼠,采用母婴分离法构 建IBS模型,收集建模成功的大鼠粪便制成粪菌液。18只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照(Con) 组、母婴分离(NMS)组、NMS+APETx2 处理组,每组 6 只。NMS 组、NMS+APETx2 组均予以含有抗生素的鸡尾酒 (ABX-water)连续灌胃5 d,构建伪无菌鼠模型,之后给予NMS大鼠粪菌液(1.6 mL/kg)灌胃;Con组给予等体积生理盐 水灌胃,每天1次,连续灌胃5 d。灌胃结束后,NMS+APETx2组给予100 μg/kg APETx2连续腹腔注射7 d,每天1次。 采用墨汁推进实验测定肠道推进率,结直肠扩张刺激后评估内脏敏感性。免疫组化染色法检测结肠组织中ASIC3、 c-kit蛋白表达。分离3组大鼠结肠cajal间质细胞(ICC),显微镜观察细胞形态学和数量变化。结果 与Con组比较, NMS组肠道推进率减慢,腹部回撤反射(AWR)评分升高,内脏敏感性增加,结肠组织ASIC3、c-kit表达上调,ICC形态 改变。与NMS组相比,NMS+APETx2组肠道推进率加快,AWR评分下降,内脏敏感性降低,结肠组织ASIC3、c-kit表 达下调,ICC形态趋于正常,数量明显减少。结论 IBS粪菌移植可以诱导内脏高敏感发生和降低肠道传输速率, APETx2可改善其内脏敏感性和肠道传输速率,其机制可能与APETx2下调ASIC3表达、抑制与ICC相关的c-kit信号 有关。
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    临床研究
    高频脉冲电场肾动脉消融可行性探究
    张俊民 , 卢成志 , 薛志孝 , 苏司颖 , 刘尚忠
    2021, 49 (12):  1270-1275.  doi: 10.11958/20211943
    摘要 ( 528 )   PDF(1188KB) ( 2905 )  
    目的 探究高频脉冲电场消融在肾动脉去神经术中的可行性及安全性。方法 使用脉冲电场消融仪在 电压500 V和700 V,脉冲个数500,脉冲模式为单脉冲、长脉冲、双向脉冲5-5-5-5、双向脉冲5-3-3-5、双向脉冲7- 3-3-7下消融人体神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y和大鼠胸大动脉平滑肌细胞A7r5,MTT法检测细胞存活率。4只巴马 香猪经皮股动脉穿刺植入电极并消融肾动脉交感神经系统,术后取消融组织制作切片,染色后镜下观察,验证消融 效果。结果 显微镜下可见A7r5细胞和SH-SY5Y细胞分别在电压500 V和700 V时接近全部凋亡。电压500 V时, SH-SY5Y细胞存活率均高于同类型脉冲下A7r5细胞(P<0.01),A7r5细胞单脉冲与长脉冲细胞存活率差异无统计 学意义,但低于双向脉冲5-5-5-5(P<0.05),双向脉冲5-5-5-5、5-3-3-5、7-3-3-7细胞存活率依次升高(P<0.05); 电压700 V时,A7r5细胞双向脉冲5-3-3-5消融后细胞存活率高于双向脉冲5-5-5-5(P<0.05),其余脉冲模式下细 胞存活率差异无统计学意义。猪肾动脉消融中,双向脉冲5-5-5-5模式下发生轻微抽搐,双向脉冲5-3-3-5、7-3-3- 7的消融过程平稳。消融后肾动脉HE染色可见动脉局灶外膜、中膜断裂,管壁纤维化,局部内皮受损,血栓形成。 Masson染色可见动脉血管壁纤维化,Warthin-starry银染色可见交感神经组织呈浅褐色,神经细胞死亡。结论 高频 脉冲电场对平滑肌细胞A7r5和神经细胞SH-SY5Y消融效果良好,高频脉冲电场可消融猪肾动脉交感神经,双向不 对称脉冲5-3-3-5可有效避免肌肉收缩,为最优参数组。
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    实验研究
    姜黄素对酒精性肝损伤大鼠CYP3A的影响及机制探讨
    陈洁 , 刘斌 , 袁桥玉
    2021, 49 (12):  1276-1281.  doi: 10.11958/20210852
    摘要 ( 437 )   PDF(557KB) ( 2840 )  
    目的 探究姜黄素对酒精性肝损伤(ALD)大鼠细胞色素P450 3A(CYP3A)的影响及其机制。方法 60只 建模成功的ALD大鼠按随机数字表法分为模型组,姜黄素低、中、高剂量组(分别灌胃40、80、160 mg/kg姜黄素)及阳 性对照组(腹腔注射200 mg/kg腺苷蛋氨酸),每组12只;对照组12只正常饲养,灌胃等体积生理盐水,连续6周。全 自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)水平;苏木精-伊红 (HE)染色观察肝脏形态变化;荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测肝脏组织中孕烷X受体(PXR)、组成型雄甾烷受 体(CAR)、CYP3A25 mRNA水平;Western blot检测肝脏组织中PXR、CAR蛋白水平。以大鼠原代肝细胞为研究对象, 分别用0、100、200、300、400、500 mmol/L乙醇培养细胞,取细胞增殖抑制率约为50%时的乙醇浓度进行下一步实验; 0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 μmol/L姜黄素培养细胞,取最适姜黄素浓度进行后续研究。实验分为对照组、乙醇组、姜 黄素组、姜黄素+siRNA-NC 组及姜黄素+siRNA-CYP3A25 组。CCK-8 检测细胞增殖情况;qPCR 检测细胞中 CYP3A25 mRNA水平;Western blot检测细胞中PXR、CAR蛋白水平。结果 动物实验:与对照组相比,模型组血清中 ALT、AST、ALP水平升高(P<0.05);与模型组相比,姜黄素低剂量组血清中ALT、ALP水平降低,肝脏组织中PXR、 CAR mRNA和蛋白,CYP3A25 mRNA水平升高(P<0.05),姜黄素中、高剂量组血清中ALT、AST、ALP水平降低,肝脏 组织中PXR、CAR mRNA和蛋白,CYP3A25 mRNA水平升高(P<0.05);随着剂量升高,各指标逐渐恢复。细胞实验: 与对照组相比,乙醇组细胞增殖抑制率升高(P<0.05),细胞中PXR、CAR蛋白水平降低(P<0.05);与乙醇组相比,姜 黄素组细胞增殖抑制率降低(P<0.05),细胞中CYP3A25 mRNA,PXR、CAR蛋白水平升高(P<0.05);与姜黄素组相 比,姜黄素+siRNA-CYP3A25 组细胞增殖抑制率升高(P<0.05),细胞中 CYP3A25 mRNA,PXR、CAR 蛋白水平降低 (P<0.05)。结论 姜黄素可上调 CYP3A25 水平,促进药物代谢,实现对 ALD 的缓解,这一过程可能与升高 PXR、 CAR表达有关。
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    临床研究
    纤维蛋白原/白蛋白比值与急性缺血性卒中患者rt-PA静脉溶栓后早期神经功能恶化的关系
    古春青, 张运克, 杨广华, 武继涛
    2021, 49 (12):  1282-1286.  doi: 10.11958/20211514
    摘要 ( 757 )   PDF(449KB) ( 2834 )  
    目的 探讨纤维蛋白原/白蛋白比值(FAR)与急性缺血性卒中(IS)患者重组组织型纤溶酶原激活剂(rtPA)静脉溶栓后早期神经功能恶化(END)的关系。方法 纳入接受rt-PA静脉溶栓治疗的IS患者156例,根据是否 出现END将其分为END组36例和非END组120例。收集患者基线资料,采用Pearson相关分析急性IS患者FAR与 溶栓前美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析相关指标预测急性IS 患者rt-PA静脉溶栓后END的价值,多因素Logistic回归分析影响急性IS患者rt-PA静脉溶栓后END的危险因素。 结果 IS患者rt-PA静脉溶栓后END发生率为23.08%。END组患者溶栓前NIHSS评分、血糖、白细胞计数、血清纤 维蛋白原(FIB)水平及FAR均明显高于非END组患者,血清白蛋白(ALB)水平明显低于非END组(P<0.05)。IS患 者 FAR 与溶栓前 NIHSS 评分呈正相关(P<0.05)。FAR 预测 IS 患者 rt-PA 静脉溶栓后 END 的曲线下面积为 0.806 (0.710~0.902),高于ALB[0.609(0.494~0.724)]和FIB[0.639(0.524~0.754)],但低于溶栓前NIHSS评分[0.963(0.931~ 0.994),P<0.05]。FAR和溶栓前NIHSS评分升高是影响IS患者rt-PA静脉溶栓后END的独立危险因素(P<0.05)。 结论 FAR升高与IS患者rt-PA静脉溶栓后END有关,可预测IS患者rt-PA静脉溶栓后END的发生。
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    离心泵和滚压泵对体外循环下Stanford A型主动脉夹层术中血小板影响的比较
    纪振华 , 武婷 , 姜楠
    2021, 49 (12):  1287-1291.  doi: 10.11958/20211132
    摘要 ( 400 )   PDF(442KB) ( 2908 )  
    目的 比较离心泵与滚压泵对体外循环下Stanford A型主动脉夹层术中血小板的影响。方法 纳入拟行 Stanford A型主动脉夹层手术的患者40例,按照随机数字表法分为离心泵组(20例)和滚压泵组(20例)。记录2组体 外循环(CPB)时间、主动脉阻断时间、停循环时间、尿量、出血量、用血量、凝血功能、肝肾功能、血常规、术后胸腔引流 量、机械通气时间、重症监护病房(ICU)停留时间、住院时间、并发症。分别在麻醉诱导后(T1)、鱼精蛋白中和后0.5 h (T2)、入ICU 4 h(T3)、入ICU 24 h(T4)、入ICU 48 h(T5)检测血小板α颗粒膜蛋白-140(GMP-140)、血小板因子4(PF4) 水平,并进行血小板计数。结果 2组基线资料、术中指标(CPB时间、主动脉阻断时间、停循环时间、术中尿量、用血 量、出血量)比较差异无统计学意义(P>0.05)。在 T2~T4时,与滚压泵组相比,离心泵组血小板计数升高,PF4 和 GMP-140水平降低;入ICU 4 h和24 h离心泵组胸腔引流量和术后用血量明显少于滚压泵组(P<0.05),2组48 h胸 腔引流量、机械通气时间、术后清醒时间、ICU停留时间、术后住院时间和并发症比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 在Stanford A型主动脉夹层术中,离心泵可减少血小板激活和消耗,减少术后引流量和用血量。
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    microRNA-1诊断支气管哮喘急性发作及预测激素治疗敏感性的价值
    陈迪, 戴标, 陈如华
    2021, 49 (12):  1291-1296.  doi: 10.11958/20210571
    摘要 ( 456 )   PDF(460KB) ( 2803 )  
    目的 探讨外周血microRNA-1(miR-1)与支气管哮喘急性发作的关系,及其在预测支气管哮喘急性发作 期患者激素治疗敏感性方面的价值。方法 纳入72例支气管哮喘急性发作期患者并作为观察组,其中无吸入性糖 皮质激素(无ICS组)患者16例、激素敏感型(SS组)患者45例和激素抵抗型(SR组)患者11例。另外,纳入同期门诊 健康体检者30例作为对照组。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测血清miR-1的表达水平,采用Spearman秩 相关分析其与白细胞介素(IL)-5、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、免疫球蛋白E(IgE)、呼出 气一氧化氮(FeNO)的相关性。受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-1诊断支气管哮喘急性发作及预测糖皮质激素 治疗敏感性的价值。结果 SS组和SR组的miR-1的表达水平低于无ICS组及对照组(P<0.05)。相关分析显示, miR-1与IFN-γ呈正相关,与IL-5、IL-6、IL-8、TNF-α、IgE、FeNO呈负相关(均P<0.01)。ROC曲线分析显示,在诊 断支气管哮喘急性发作时,miR-1的曲线下面积(AUC)在所有测试标志物中较高(AUC=0.794,95%CI:0.706~0.882, P<0.001);联合诊断的结果显示,miR-1 与 IFN-γ 联合诊断的效能较高(AUC=0.834,95%CI:0.757~0.912,P< 0.001)。在对哮喘患者糖皮质激素治疗的敏感性进行预测时,miR-1 的预测价值尚可(AUC=0.797,95%CI:0.668~ 0.926,P=0.002);联合预测结果显示,miR-1 联合 FeNO 的预测价值更高(AUC=0.976,95%CI:0.928~1.000,P< 0.001)。结论 支气管哮喘患者血清中的miR-1表达水平降低,有可能成为诊断哮喘急性发作的潜在生物标志物; 而糖皮质激素抵抗型哮喘患者外周血中的miR-1水平进一步降低,可作为一项预测激素治疗敏感性的指标。
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    同步整合加量调强联合选择性淋巴结照射根治性治疗食管鳞癌的长期预后分析
    李运华, 颜学军, 谭亚丽, 胡亚, 肖茂良
    2021, 49 (12):  1297-1302.  doi: 10.11958/20211069
    摘要 ( 473 )   PDF(406KB) ( 2777 )  
    目的 探讨同步整合加量调强(SIB-IMRT)联合选择性淋巴结照射(ENI)加或不加化疗根治性治疗食管鳞 癌患者的长期预后。方法 对130例接受根治性放(化)疗的食管鳞癌患者进行回顾性分析,分析患者的长期生存情 况及其预后影响因素、治疗失败模式和不良反应情况。结果 所有患者1、3、5年总生存(OS)率和无进展生存(PFS) 率分别为81.5%、52.7%、39.8%和70.7%、40.6%、35.8%,中位OS期和PFS期分别为36.37个月和23.89个月。多因素 Cox分析显示,cT3期、cN1期、未接受化疗和GTV-V>37.0 cm3为影响患者OS的独立危险因素,cT3期为影响患者PFS 的独立危险因素(P<0.05)。所有患者出现局部区域复发39例(30.0%),远隔部位转移20例(15.4%),其中两者并存 4例;单纯局部区域复发的35例患者中原食管病变局部复发32例,区域淋巴结复发1例,食管局部联合区域淋巴结复 发2例。所有患者治疗期间及治疗后未出现≥4级相关不良反应。化疗组患者的≥2级不良反应发生率与未化疗组患 者差异无统计学意义。结论 SIB-IMRT联合ENI治疗食管鳞癌患者安全有效,对一般情况较好的患者可予以联合 化疗。
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    超声引导精索阻滞下F4.8可视肾镜治疗附睾良性肿物的疗效分析
    黎灿强, 徐乐, 梁鸿毅, 邱敏捷, 杨毅
    2021, 49 (12):  1303-1307.  doi: 10.11958/20211508
    摘要 ( 472 )   PDF(541KB) ( 2817 )  
    目的 评估在超声引导精索阻滞下,应用F4.8可视肾镜治疗附睾良性肿物的疗效及安全性。方法 选取 82例附睾肿物患者,采用随机数字表法分为盲探穿刺组和超声引导穿刺组,每组41例。所有患者均应用F4.8可视肾 镜作为阴囊镜施行手术。盲探穿刺组于腹股沟管外环处盲探穿刺进行精索阻滞;超声引导穿刺组利用彩色多普勒 超声诊断仪完成精索阻滞。记录患者的手术时间、围手术期并发症、精索阻滞成功率、血管性并发症、术中麻醉性药 物追加以及麻醉方式更改情况。采用视觉模拟评分(VAS)对患者进行疼痛评估,并对患者进行随访。结果 64例 附睾囊肿患者均予镜下钬激光囊肿去顶术;18例附睾实性肿物患者镜下确诊为附睾附件不全扭转,予钬激光切除。 与盲探穿刺组相比,超声引导穿刺组的精索阻滞成功率更高,血管性并发症发生率、麻醉方式更改率更低(P<0.05), 2组术中麻醉性药物追加率差异无统计学意义。超声引导穿刺组在手术5 min、术后2 h的VAS和住院费用低于盲探 穿刺组(P<0.05),术后6 h、12 h VAS,住院时间2组差异无统计学意义。随访患者术后1个月、3个月及12个月复查 阴囊彩超,未见患侧睾丸、附睾及精索异常。结论 超声引导精索阻滞下F4.8可视肾镜治疗附睾肿物安全有效,可 作为理想的检查、治疗方法,具有较好的应用价值。
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    经脐单孔+1孔与传统腹腔镜结直肠癌根治术的安全性及 可行性对比研究
    范琳峰, 曾祥福, 曾翔辉, 邓伟
    2021, 49 (12):  1307-1310.  doi: 10.11958/20211357
    摘要 ( 576 )   PDF(419KB) ( 2812 )  
    目的 比较经脐单孔+1孔腹腔镜与传统腹腔镜结直肠癌根治术的安全性及可行性。方法 收集42例 结直肠癌患者的临床资料,并根据术式不同将患者分为研究组及对照组各 21 例,分别采用经脐单孔+1 孔腹腔镜 根治术和传统腹腔镜根治术。比较2组患者的手术时间、术中出血量、术后住院时间、术后排气时间、淋巴结清扫 数目以及术后相关并发症等情况。结果 研究组患者术后住院时间明显短于对照组(P<0.05);2 组患者手术时 间、术中出血量、术后排气时间及淋巴结清扫数目差异无统计学意义(P>0.05);2组患者术后均无吻合口瘘,对照组 出现肠梗阻、吻合口出血各1例,切口感染2例,研究组出现吻合口出血及切口感染各1例,2组并发症发生率差异无 统计学意义(P>0.05)。结论 经脐单孔+1 孔腹腔镜结直肠癌根治术安全可行,在术后恢复方面优于传统腔镜 手术。
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    微小RNA-18a联合子宫动脉血流参数对早发型子痫前期的预测价值
    王勇 , 李传刚
    2021, 49 (12):  1311-1315.  doi: 10.11958/20211196
    摘要 ( 452 )   PDF(469KB) ( 2801 )  
    目的 探讨微小RNA-18a(miR-18a)联合阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、子宫动脉收缩期与舒张期血流速 度比值(S/D)等子宫动脉血流参数对早发型子痫前期(E-PE)的预测价值。方法 纳入孕检的孕妇628例根据其是 否发生E-PE分为E-PE组(34例)和对照组(594例)。采用彩色多普勒超声诊断仪检测RI、PI、S/D等参数,采用实时 定量PCR法检测血清miR-18a的相对表达水平。采用受试者工作特征曲线分析血清miR-18a、RI、PI、S/D对E-PE的 预测价值。结果 E-PE组的血清miR-18a相对表达水平低于对照组,RI、PI、S/D高于对照组(P<0.05);E-PE患者 血清miR-18a相对表达水平与RI、PI、S/D均呈负相关(P<0.05);血清miR-18a、RI、PI均可用于预测E-PE的发生风 险,曲线下面积分别为0.780(95%CI:0.727~0.832)、0.729(95%CI:0.644~0.814)、0.782(95%CI:0.695~0.870),而S/D 对E-PE的预测价值较低,曲线下面积为0.602(95%CI:0.496~0.708)。miR-18a联合PI对E-PE的预测价值较高,敏 感度为82.35%、特异度为83.84%,约登指数为0.662。结论 miR-18a在E-PE患者血清中异常低表达,且其表达水 平与RI、PI、S/D等子宫动脉血流参数均呈负相关,miR-18a联合PI对E-PE的预测价值较高。
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    镇痛药不同给药时机对中等面积二度烧伤患者换药镇痛效果的影响
    刘玉树, 刘飞飞, 李家光, 刘文明
    2021, 49 (12):  1315-1318.  doi: 10.11958/20210702
    摘要 ( 439 )   PDF(378KB) ( 2812 )  
    目的 观察镇痛药的不同给药时机对烧伤换药所产生的疼痛强度及持续时间的影响。方法 男性下肢 烧伤患者40例按照随机数字表法均分为前换药组(Pre组)与后换药组(Post组)。Pre组患者于换药前30 min给予氟 比洛芬酯50 mg,Post组患者待换药结束后立刻给予相同剂量的氟比洛芬酯,记录2组患者换药过程中心率(HR)、收 缩压(SBP)、舒张压(DBP)及主观疼痛评分(数字评分法,NRS)的最高值(max)。同时记录2组患者自换药后0.5、1、 2、4、8、14及24 h的HR、SBP、DBP、NRS值及患者恢复至轻度疼痛时所需时间。结果 与Post组比较,Pre组在换药 过程中及换药结束后1 h内的HR、SBP及DBP均较低,4 h、14 h时SBP低于Post组,8 h时DBP低于Post组(P<0.05); 与Post组比较,Pre组在换药过程中及换药结束后4 h内的NRS均较低(P<0.05);与Post组比较,Pre组在换药结束后 可更快地恢复至轻度疼痛状态(P<0.05)。结论 在烧伤换药前30 min给予镇痛药可明显减轻患者换药疼痛强度及 换药后疼痛持续时间。
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    HR+/HER2-乳腺癌患者Ki-67临界值的确定及表达对早期复发转移的影响
    马琴 , 厚玉瑾 , 高旭彤 , 刘新兰
    2021, 49 (12):  1319-1323.  doi: 10.11958/20210930
    摘要 ( 1531 )   PDF(512KB) ( 2929 )  
    目的 确定激素受体阳性和人表皮生长因子受体2阴性(HR+/HER2-)乳腺癌患者Ki-67表达高低的临界 值,探讨不同Ki-67表达水平对HR+/HER2-乳腺癌早期复发转移的影响。方法 回顾性分析我院近5年经手术病理 确诊的956例HR+/HER2-乳腺癌患者的病历资料,以中位数作为HR+/HER2-乳腺癌Ki-67表达高低的临界值,分析 Ki-67表达水平对HR+/HER2-乳腺癌早期复发转移的影响。结果 956例HR+/HER2-乳腺癌患者Ki-67表达的中 位数为20%,5年间Ki-67值分布差异无统计学意义(χ2=16.010,P>0.05)。以20%作为区分Ki-67表达高低的临界 值,与国际通用的Ki-67临界值(14%)相比,2种方法判断一致性较好(Kappa值=0.846)。956例患者经4~71个月的 随访,共56例出现复发或转移。单因素分析发现,Ki-67表达水平、T分期、N分期、组织学分级、脉管/神经侵犯是 HR+/HER2-乳腺癌患者出现早期复发转移的影响因素。多因素分析发现,淋巴结N1~N3分期(HR=2.130,95%CI: 1.200~3.781)、Ki-67≥20%(HR=3.271,95%CI:1.441~7.421)是HR+/HER2-乳腺癌无病生存时间(DFS)的独立危险因 素。进一步将Ki-67≥20%的患者分层为20%~<30%、30%~<50%和≥50%共3个亚组。与Ki-67<20%患者相比, 随着Ki-67表达水平的增高,患者早期复发转移风险比增加(HR分别为2.784、4.409、6.168),5年DFS降低(分别为 94.9%、91.3%、87.5%)。结论 本中心HR+/HER2-乳腺癌Ki-67表达高低的临界值为20%;随着Ki-67表达水平的 增高,患者早期复发转移风险增加,DFS降低。
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    血清PTX3联合CHA2DS2-VASc评分对OSAHS合并房颤患者发生脑梗死的预测价值
    冯慧琼 , 董峰 , 孟祥君 , 牛文亮 , 席富强 , 王伟
    2021, 49 (12):  1324-1327.  doi: 10.11958/20211181
    摘要 ( 456 )   PDF(436KB) ( 2935 )  
    目的 探讨血清正五聚蛋白-3(PTX3)联合CHA2DS2-VASc 评分对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征 (OSAHS)合并房颤患者发生脑梗死的预测价值。方法 选取OSAHS合并房颤患者198例,根据随访期间是否发生 脑梗死分为脑梗死组(36例)和无脑梗死组(162例)。比较脑梗死组和无脑梗死组的各项指标,分析OSAHS合并房 颤患者血清PTX3水平与其他指标的相关性,Logistic回归分析OSAHS合并房颤患者发生脑梗死的危险因素,受试者 工作特征曲线分析PTX3联合CHA2DS2-VASc评分对OSAHS合并房颤患者发生脑梗死的预测价值。结果 脑梗死 组的收缩压、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、左心房内径(LAD)、呼吸暂停低通气指数(AHI)、CHA2DS2-VASc评分 以及PTX3水平均高于无脑梗死组(P<0.05);OSAHS合并房颤患者血清PTX3水平与LDL-C、LAD、AHI、CHA2DS2- VASc评分均呈正相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,较高水平的AHI、CHA2DS2-VASc评分以及PTX3均 为OSAHS合并房颤患者发生脑梗死的危险因素(P<0.05);PTX3与CHA2DS2-VASc评分预测OSAHS合并房颤患者 发生脑梗死的曲线下面积分别为0.785(0.695~0.875)和0.794(0.698~0.890),两者联用分析后敏感度和约登指数均有 了明显的提升。结论 血清PTX3联合CHA2DS2-VASc评分对OSAHS合并房颤患者发生脑梗死的预测价值较高。
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    应用研究
    创伤后脑积水合并严重意识障碍患者脑室-腹腔分流术预后预测模型的建立与评价
    卞琴, 杨鹏, 张秋芳
    2021, 49 (12):  1328-1332.  doi: 10.11958/20210135
    摘要 ( 400 )   PDF(494KB) ( 2825 )  
    目的 探讨创伤后脑积水合并严重意识障碍患者脑室-腹腔分流术预后的危险因素,并构建列线图预测 模型,指导早期识别高危患者。方法 以确诊创伤后脑积水合并严重意识障碍患者为研究对象,所有患者均接受脑 室-腹腔分流术治疗。治疗后3个月时根据格拉斯哥预后评分(GOS)判断患者预后,分为预后良好组(GOS评分>3 分)和预后不良组(GOS评分≤3分)。采用多因素Logistic回归筛选危险因素,并在该基础上构建列线图预测模型,采 用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)和Hosmer-Lemeshow检验对模型进行评价。结果 共218例患 者纳入分析,其中模型组 153 例,验证组 65 例;模型组预后良好 90 例(58.8%),预后不良 63 例(41.2%)。多因素 Logistic回归分析显示,年龄≥50岁(OR=1.356,95%CI:1.101~1.639)、中度脑积水(OR=2.859,95%CI:2.325~3.212)、发 病时格拉斯哥昏迷评分为 9~12 分(OR=2.421,95%CI:2.056~2.857)和发病至分流术的间隔≥3 个月(OR=1.639, 95%CI:1.325~2.124)是影响预后的独立危险因素(均P<0.05)。根据上述因素绘制的列线图预测模型组和验证组临 床预后的AUC分别为0.896(95%CI:0.842~0.933)和0.875(95%CI:0.825~0.916)。Hosmer-Lemeshow检验显示列线图 模型有较好的拟合度(模型组χ2=0.896,验证组χ2=0.567,均P>0.05)。根据列线图模型进行风险分层后,模型组和验 证组高、中风险患者预后不良比例明显高于低风险患者。结论 本研究构建的列线图模型对评估创伤后脑积水合 并严重意识障碍患者脑室-腹腔分流术后的预后有较好的价值,可指导临床早期识别高危患者。
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    技术规范
    依据《诊断性介入肺脏病学快速现场评价临床实施指南》的报告模板 #br#
    冯靖
    2021, 49 (12):  1333-1334.  doi: 10.11958/20211829
    摘要 ( 440 )   PDF(331KB) ( 2852 )  
    具体介绍快速现场评价(ROSE)的定义与工作内容、ROSE细胞组学的定义和ROSE报告签发的资质问题,
    并提供了依据《诊断性介入肺脏病学快速现场评价临床实施指南》的报告模板。

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    综述
    反复轻型颅脑创伤的颅内病理变化进程及治疗策略研究进展
    陈芳莲, 葛歆瞳, 王栋, 雷平
    2021, 49 (12):  1335-1339.  doi: 10.11958/20211348
    摘要 ( 404 )   PDF(417KB) ( 2793 )  
    在颅脑创伤患者中,大多数属于轻度颅脑创伤,其中部分患者的脑组织在伤后远期会发生神经退行性变, 此病的相关病理进展机制至今尚未得到充分阐明,严重影响了其治疗策略的探索和发展。在概括中、重型颅脑创伤 后颅内病理改变进程的基础上对比论述已报道的反复轻型颅脑创伤病变进展的机制,并针对上述病理进程的治疗 策略的研究进展予以总结,为今后探索该病长期、综合性的治疗方案提供理论依据。
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    神经胶质细胞与突触可塑性关系的研究进展
    张宁, 谢璐霜, 刘奇 , 吕沛然
    2021, 49 (12):  1340-1344.  doi: 10.11958/20211127
    摘要 ( 771 )   PDF(406KB) ( 2791 )  
    :突触可塑性与神经系统的发育、损伤后修复等密切相关。神经胶质细胞通过能量物质传递、信号转导通 信等方面与神经元保持密切交流,是促进突触可塑性的重要途径。星形胶质细胞在形态上和功能上均与突触联系 密切,是调控突触可塑性的重要影响因素;小胶质细胞与突触进行双向信息交互,是发育和成年期突触可塑性的关 键调节因子;少突胶质细胞参与髓鞘形成,为突触传递提供代谢底物,是促进突触可塑性的潜在力量。就星形胶质 细胞、小胶质细胞以及少突胶质细胞与突触可塑性关系的相关研究进展进行综述,以期为深入认识神经胶质细胞与 突触可塑性的相互关系提供参考。
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