目的 探讨腺病毒介导的斑点蛋白酪氨酸激酶底物(SPRY)1过表达对人肝癌细胞增殖、凋亡及自噬的影响及其作用机制。方法 构建携带SPRY1的腺病毒载体Ad5-SPRY1,感染人肝癌细胞系Huh7和Hep3B,实验分为对照组(空白对照)、Ad5-GFP组(感染空载腺病毒Ad5-GFP)和Ad5-SPRY1组(感染重组腺病毒Ad5-SPRY1)。采用qPCR检测SPRY1 mRNA表达水平;Western blot检测SPRY1、细胞-髓细胞瘤病毒癌基因同源物(c-MYC)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(BCL2)及自噬标志蛋白微管相关蛋白1A/1B轻链3(LC3)Ⅰ/Ⅱ的表达;流式细胞术检测细胞凋亡率;透射电子显微镜观察自噬体超微结构;Ad-mCherry-GFP-LC3B荧光报告系统检测自噬流变化。结果 Ad5-SPRY1感染Huh7、Hep3B细胞48 h后,SPRY1 mRNA和蛋白表达水平高于对照组和Ad5-GFP组(P<0.05)。流式细胞术检测显示,感染Huh7、Hep3B细胞24 h后,Ad5-SPRY1组细胞凋亡率低于对照组和Ad5-GFP组(P<0.05)。Western blot结果显示,Ad5-SPRY1组c-MYC和BCL2蛋白表达水平高于对照组和Ad5-GFP组(P<0.05)。透射电镜观察显示,Ad5-SPRY1组细胞质中可见大量双层膜自噬体结构;Western blot结果显示,Ad5-SPRY1组LC3Ⅱ蛋白表达水平高于对照组和Ad5-GFP组(P<0.05)。Ad-mCherry-GFP-LC3B荧光检测显示,Ad5-SPRY1组黄色斑点数量多于对照组和pcDNA3.1组(P<0.05)。结论 腺病毒介导的SPRY1过表达可显著抑制肝癌细胞凋亡并诱导自噬,其作用机制可能与上调c-MYC、BCL2表达及增强LC3介导的自噬流有关;SPRY1可能成为肝癌治疗的潜在新靶点。