目的 基于干扰素基因刺激因子(STING)/长链酰基辅酶A合成酶家族成员4(ACSL4)通路探讨复元活血汤(FHD)抑制膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞铁死亡的作用机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、模型(KOA)组、FHD低剂量(FHD-L)组、FHD高剂量(FHD-H)组、塞来昔布阳性对照(PC)组及FHD-H+STING激活剂(FHD-H+DMXAA)组,每组12只。采用改良Hulth法建立KOA模型。造模成功后各组分别给予相应药物灌胃或尾静脉注射干预,连续8周。采用Lequesne MG评分评估膝关节功能;HE染色观察软骨组织形态;番红O-固绿染色结合OARSI评分评估软骨退变程度;酶联免疫吸附试验检测软骨组织中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、基质金属蛋白酶(MMP)-13及血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5(ADAMTS-5)水平;生化试剂盒测定软骨组织Fe2+、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)及超氧化物歧化酶(SOD)水平;DCFH-DA探针法检测软骨组织活性氧(ROS)水平;普鲁士蓝染色观察铁沉积;透射电镜观察软骨细胞超微结构;免疫组化法检测软骨组织谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、环氧化酶-2(COX-2)蛋白表达;Western blot法检测软骨组织STING及ACSL4蛋白表达。结果 与Sham组相比,KOA组Lequesne MG评分,OARSI评分,软骨组织炎症及基质降解因子(IL-1β、TNF-α、MMP-13、ADAMTS-5),铁死亡相关指标(Fe2+、MDA、ROS),普鲁士蓝染色阳性面积比,COX-2阳性表达面积及STING、ACSL4蛋白表达均显著升高(P<0.05),而GSH、SOD水平及GPX4、SLC7A11阳性表达面积均显著降低(P<0.05);HE染色、番红O-固绿染色及透射电镜显示KOA组软骨结构严重破坏,软骨基质丢失,线粒体萎缩、嵴断裂。与KOA组相比,FHD-L组、FHD-H组及PC组上述指标均有不同程度改善(P<0.05),其中FHD-H组效果优于FHD-L组(P<0.05)。与FHD-H组相比,FHD-H+DMXAA组上述指标的改善效应被显著逆转(P<0.05)。结论 FHD可能通过抑制STING/ACSL4通路减轻软骨细胞铁死亡,从而改善KOA大鼠的关节功能与软骨损伤。