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MLH1 R217C/BRAF V600E 突变型家族性甲状腺乳头状癌永生化细胞系的建立及鉴定

郝伟静 1，于洋 1，王青松 2，赵丽 3，叶艳 4，董莉 1，李健森 5，孟祥睿 5，运新伟 1，高明 1

2016, 44 (6): 657-661. doi: 10.11958/20150376

摘要 ( 1519 )

PDF(668KB) ( 4105 )

摘要：目的建立家族性甲状腺乳头状癌（FPTC）永生化细胞系，为研究家族性非髓样甲状腺癌（FNMTC）提供新的途径。方法选取 FPTC 患者的肿瘤标本，采用消化法分离原代细胞。使用改良的 DMEM/F12 培养基，添加促甲状腺激素（TSH）、三碘甲状腺原氨酸（T3）、表皮细胞生长因子（EGF）及氢化可的松等进行培养。在原代细胞早期分 2种方式导入外源基因 SV40T/TERT 用于诱导永生化。利用 RT-PCR 检测甲状腺过氧化物酶（TPO）、甲状腺球蛋白（TG）、促甲状腺激素受体（TSHR）、钠/碘共同转运体（NIS）等基因的表达，同时利用免疫荧光技术检测 TPO 及磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（GPC3）蛋白的表达。提取该患者外周血 DNA，进行突变基因的检测。提取细胞基因组 PCR 扩增后测序，进行突变基因的检测。结果分离的 FPTC 原代细胞呈梭形或不规则多角形贴壁生长；细胞生长 6 个月，转染 SV40T 组（标记为 FPTC-S）传代至 p26， FPTC 细胞传代至 p23，转染 SV40T+hTERT 组（标记为 FPTC-ST）传代至p19，细胞增殖能力较好； FPTC-S 与 FPTC-ST 细胞均能够在基因水平稳定表达 TPO、 TG 与 TSHR；患者外周血中存在 MLH1 R217C 胚系突变；原代细胞存在 BRAF V600E 突变；原代细胞及永生化的细胞系中均存在 MLH1 R217 基因突变。结论本研究初步建立了 FPTC 永生化细胞系，且该细胞系中存在 MLH1 R217C 及 BRAF V600E 突变，该细胞系将为研究以上突变及其相互作用关系提供研究模型。

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人脐静脉内皮细胞 1-磷酸鞘氨醇受体鉴定及其应用探讨

梁云 1，罗光华 2，刘宏 1，喻妙梅 2，王敏 1，刘洪尧 1，黄波 1，徐宁 3，张晓膺 1

2016, 44 (6): 662-664. doi: 10.11958/20160032

摘要 ( 859 )

PDF(953KB) ( 3689 )

摘要：目的鉴定人脐静脉内皮融合细胞株 EA.hy926 和人脐静脉内皮细胞（HUVEC） CRL-1730 1-磷酸鞘氨醇受体（S1PR）亚型和胞浆中 C-myc 及 His 标签蛋白的表达情况，为研究载脂蛋白 M （ApoM） -1-磷酸鞘氨醇轴（ApoMS1P 轴）的功能提供参考。方法体外培养 EA.hy926 及 CRL-1730 至细胞密度达到 60%～70%时，采用细胞免疫荧光技术鉴定内皮细胞标志凝血八因子（FⅧ）、 ApoM、 S1PR1~S1PR5、 C-myc 和 His 标签蛋白。结果（1）两种细胞均表达 FⅧ和 ApoM， FⅧ在 CRL-1730 中呈散在颗粒状分布，在 EA.hy926 中呈均匀分布。（2）两种细胞均主要表达 S1PR1，少量表达 S1PR2 和 S1PR3，不表达 S1PR4 和 S1PR5。（3）两种细胞胞浆中均有 C-myc 和 His 标签蛋白的表达。结论两种细胞都具有内皮细胞的特性；因其自身表达 ApoM、 C-myc 和 His 标签蛋白，在应用这两种细胞研究 ApoM-S1P 轴的功能时，不适合选用带有 C-myc 和（或） His 标签的重组 ApoM 蛋白。

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基于原子力显微镜的损伤星形胶质细胞弹性模量变化的研究

陈淼彬 1，李晓红 2，吴森 3，王景景 2，孙洪涛 2

2016, 44 (6): 665-668. doi: 10.11958/20160059

摘要 ( 1130 )

PDF(1618KB) ( 3806 )

目的探讨星形胶质细胞受到损伤刺激后弹性模量的变化。方法分离、提取新生 2 d SD 大鼠星形胶质细胞，通过胶质纤维酸性蛋白（GFAP）抗体免疫荧光染色对其进行鉴定。实验分为对照组和损伤组，损伤组为应用细胞损伤仪损伤后 6 h 的星形胶质细胞，对照组不予损伤。应用原子力显微镜在液相下测试各组细胞的弹性模量，并对两组结果进行比较、分析。结果大鼠星形胶质细胞纯化率达 95%以上。损伤后 6 h 的星形胶质细胞形态紊乱，部分细胞胞体可见肿胀。获得了星形胶质细胞的力学地形图和力压痕曲线。损伤组星形胶质细胞弹性模量较对照组显著增加［（1 689±693） Pa vs.（724±283） Pa， P＜0.01］。结论损伤刺激会造成星形胶质细胞弹性模量增大，为进一步从细胞水平了解创伤性脑损伤后的颅内物理微环境提供理论基础。

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脂多糖对小胶质细胞血管内皮生长因子表达的影响

曾勇，吕靖芳，郁龚杰，高伟伟，张建宁

2016, 44 (6): 669-671. doi: 10.11958/20150374

摘要 ( 962 )

PDF(1475KB) ( 4209 )

摘要：目的探讨脂多糖（LPS）是否能够通过低氧诱导因子-1α（HIF-1α）调节小胶质细胞血管内皮生长因子（VEGF）的表达。方法培养 BV2 小胶质细胞系，分为 4 组：对照组、 LPS （100 µg/L）刺激组、 LRS 干预组（LPS 100 µg/L及脂多糖拮抗剂 200 µg/L）， HIF-1α抑制剂干预组（LPS 100 µg/L 及 FM19G11 10 mmol/L）。分别采用免疫荧光、 Western blot、 ELISA 检测 VEGF 和 HIF-1α 的表达情况。结果与对照组比较， LPS 可显著增加 BV2 细胞 VEGF 表达，脂多糖拮抗剂可明显抑制 LPS 的这一作用。HIF-1α的表达在 LPS 刺激 8 h 后明显增加。HIF-1α抑制剂 FM19G11 可减少 LPS 引起的 BV2 细胞 VEGF 表达增加。结论 LPS 促进小胶质细胞 VEGF 的表达， HIF-1α参与这一调节过程。

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一氧化碳对脂多糖诱导大鼠肺巨噬细胞损伤的影响

刘伟，余剑波，王丹，史佳

2016, 44 (6): 672-674. doi: 10.11958/20150377

摘要 ( 906 )

PDF(346KB) ( 5066 )

摘要：目的探讨一氧化碳（CO）对脂多糖（LPS）诱导大鼠肺巨噬细胞损伤的影响及可能机制。方法用含有10%胎牛血清的细胞培养基，在 37 ℃、 5%CO2细胞培养孵箱内培养大鼠肺巨噬细胞，采用随机数字表法将其分为 4组（n=10）：空白对照组（C 组）、 CO 组、 LPS 组、 LPS+CO 组。CO 组加入体外一氧化碳释放分子-2（CORM-2） 100μmol/L 孵育， LPS 组加入 LPS 10 mg/L， LPS+CO 组加入 CORM-2 100 μmol/L 预处理 1 h 后加入 LPS 10 mg/L 孵育， C组加入等量 PBS 液作为对照。每组细胞处理完毕后继续孵育 24 h，采用 MTT 法测定细胞活力；流式细胞仪测定细胞凋亡率和线粒体膜电位； ATP 酶含量试剂盒测定细胞内 ATP 含量； RT-PCR 法测定细胞中线粒体分裂相关蛋白Drp1 的 mRNA 含量； Western blot 法测定 Drp1 的蛋白表达。结果与 C 组相比， LPS 组和 LPS+CO 组细胞活力、 ATP含量和线粒体膜电位下降，细胞凋亡率、线粒体分裂蛋白 Drp1 mRNA 及蛋白表达增加（P < 0.05）， CO 组上述指标比较差异无统计学意义；与 LPS 组比较， LPS+CO 组细胞活力、 ATP 含量和线粒体膜电位增加（P < 0.05），细胞凋亡率、Drp1 mRNA 及蛋白表达减少（P < 0.05）。结论 CO 可减轻 LPS 诱导的大鼠肺巨噬细胞损伤，其机制与下调线粒体分裂相关蛋白 Drp1 和改善线粒体功能有关。

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盐霉素对乳腺癌 MCF-7 球囊细胞增殖与上皮间质转化作用的研究

马赫遥，付婴子，何苗，颜媛媛，江茜，孙也之，魏敏杰

2016, 44 (6): 675-678. doi: 10.11958/20150221

摘要 ( 1029 )

PDF(514KB) ( 4085 )

摘要：目的探讨盐霉素（Salinomycin）对MCF-7球囊细胞（MCF-7 MS）的增殖与上皮间充质转化 (EMT）的作用。方法通过乳腺癌MCF-7细胞无血清悬浮培养富集乳腺癌干细胞（BCSCs）得到MCF-7 MS；CCK-8 assay检测0、10、30、100、300、1 000、3 000及10 000 nmol/L的浓度盐霉素处理24 h对MCF-7 MS细胞生存率的影响，并计算半抑制浓度（IC50）值。 Western blot检测30 nmol/L、60 nmol/L终浓度的盐霉素对MCF-7 MS细胞上皮标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)和间质化标志物Snail的表达影响，以等体积的DMSO处理的MCF-7 MS细胞作为对照组。BALB/c裸鼠皮下接种MCF-7 MS细胞制备荷瘤鼠模型并分为对照组（等体积的生理盐水）和盐霉素给药组（5 mg/kg盐霉素），免疫组织化学染色检测瘤组织的Snail和E-cadherin的表达。结果随着浓度的增加，MCF-7 MS细胞的存活率逐渐下降（P < 0.05），24 h的IC50值为989 n mol/L。与对照组比较，30和60 nmol/L的盐霉素均可增加E-cadherin的表达，而降低Snail的表达，且后者作用更明显（P < 0.05）。与对照组相比，盐霉素给药组荷瘤鼠瘤组织内的Snail的表达下调，而E-cadherin的表达升高（P < 0.01）。结论盐霉素能够抑制具有BCSCs特性的MCF-7 MS细胞的增殖，且可抑制MCF-7 MS细胞的EMT，是靶向肿瘤干细胞潜在药物。

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RNAi 靶向沉默 CDX2 基因对白血病细胞生物学行为的影响及其作用机制

孙维梅 1，李建厂 1，贾秀红 1，李有杰 2，唐慎华 1

2016, 44 (6): 679-682. doi: 10.11958/20150299

摘要 ( 845 )

PDF(3504KB) ( 3856 )

Abstract: Objective To detect the effects of siRNA targeting CDX2 gene expression on of BCR-ABL, caspase and Bax expressions, and the mechanisms thereof. Methods According to the earlier experiments, siRNA specifically targeting CDX2 gene (CDX2-siRNA) and the negative control sequence (CDX2-siRNA-NC) were selected, and then were transfected into K562 cells by Roche X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent. The flow cytometry analysis was used to detect the effects of siRNA on cell apoptosis. The expressions of BCR-ABL, caspase- 9, Bax mRNA and protein were tested by RTPCR and Western blot assay. Results MTT and flow cytometry analysis showed that after the silence of CDX2 gene expression, the proliferation of K562 cells was prohibited and the apoptotic rate of K562 cells was distinctly increased compared with that of normal cell group, but the negative control group had no significant change. According to the RT-PCR and Western blot assay, in comparison with the normal cell group and the negative control group, the expression levels of BCR-ABL mRNA and protein were obviously decreased, and the difference was statistic significance. On the other hand, the expressions of caspase- 9 and Bax mRNA and protein were significantly higher than those of other two groups (P＜0.05).Conclusion CDX2-siRNA can promote apoptosis of K562 cells obviously, and the mechanism is related with the downregulation of BCR-ABL and the up-regulation of caspase-9 and Bax.

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干扰素γ增强脂肪间充质干细胞对淋巴细胞的免疫调节作用

王平 1，顾昕 2，张娜 3，张红 1，师帅南 4，王玉亮 4

2016, 44 (6): 683-686. doi: 10.11958/20150261

摘要 ( 1251 )

PDF(389KB) ( 3801 )

摘要：目的观察干扰素（IFN） -γ增强成人自体脂肪间充质干细胞（ADSCs）对外周血淋巴细胞免疫调节的作用及机制。方法取亲体移植供体术中腹部皮下脂肪组织并留取外周血，分离单个核细胞（PBMCs）；分离、培养 ADSCs；将 IFN-γ预刺激 ADSCs（IFN-γ预刺激组）及未刺激 ADSCs（未刺激组）分别与 PBMCs 在植物血凝素（PHA） +白细胞介素（IL） -2 刺激条件下共培养 5 d 后，用 MTT 法检测活化 T 细胞增殖抑制率，流式细胞术检测 CD4+CD25+调节性 T细胞（Treg）比例；实时定量 RT-PCR 法检测 ADSCs 内吲哚胺 2,3 双加氧酶（IDO） mRNA 水平；观察共培养细胞加入1-甲基色氨酸（1-MT； IDO 阻断组）后活化 T 细胞的增殖能力。结果分离的自体 ADSCs 高表达 CD73、 CD90、CD105；具有分化为成脂和成骨细胞的能力。IFN-γ预刺激组 ADSCs 显著增强活化 T 细胞增殖抑制率，呈剂量依赖关系，高于未刺激组； IFN-γ预刺激组 CD4+CD25+Treg 比例与未刺激组相比显著升高； IFN-γ预刺激组 ADSCs 内 IDOmRNA 表达水平显著高于未刺激组； IDO 阻断组对活化 T 细胞增殖抑制率较 IFN-γ预刺激组显著降低（P < 0.01）。结论 IFN-γ促进 ADSCs 对活化 T 细胞免疫抑制能力， IDO 在 ADSCs 介导的免疫抑制中起重要免疫调节作用。

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大蒜素抑制牙龈卟啉单胞菌诱导人肺上皮细胞凋亡的作用

孟田甜，李新

2016, 44 (6): 687-690. doi: 10.11958/20150281

摘要 ( 1346 )

PDF(463KB) ( 3687 )

摘要：目的探讨不同浓度大蒜素对牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis， P.gingivalis）诱导人肺上皮细胞A549 凋亡的影响。方法以微量肉汤稀释法，通过检测不同浓度大蒜素在不同时间点对 P. gingivalis 的抑制作用，测定大蒜素对P.gingivalis 的最低抑菌浓度（MIC）以及最低杀菌浓度（MBC）。分别于 12 h 及 24 h 时，以四唑盐（MTT）比色法检测不同浓度（64、 96、 128 mg/L）大蒜素对 P.gingivalis 感染后的 A549 存活率的影响，以流式细胞术FITC/PI 染色法检测 24 h 时， P.gingivalis 与大蒜素（128 mg/L）分别以及共同作用对 A549 细胞凋亡率的影响。结果大蒜素对 P.gingivalis 的 MIC 为 64 mg/L， MBC 为 128 mg/L。MTT 检测结果显示， P.gingivalis 感染后，随着大蒜素浓度的增加，细胞存活率增加，差异有统计学意义（P < 0.05）。大蒜素（128 mg/L）组的存活率与细胞对照组比较差异无统计学意义，表明大蒜素对 A549 无明显细胞毒性。流式细胞术检测结果显示，各组细胞凋亡率由高到低为： P.gingivalis 组>P.gingivalis+大蒜素组>大蒜素组>细胞对照组，差异有统计学意义（P < 0.01），大蒜素对 P.gingivalis 感染后 A549 的凋亡有明显抑制作用。结论大蒜素可有效抑制 P.gingivalis 对肺上皮细胞的感染，对于治疗牙周炎合并肺部感染有良好的应用前景。

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大鼠放射性脑损伤所致血脑屏障通透性改变与EBA 及 VEGF 表达的相关性研究

陈泊霖 1，孙熠 2，梁宾 3，金学隆 1

2016, 44 (6): 691-693. doi: 10.11958/20150439

摘要 ( 965 )

PDF(917KB) ( 3866 )

摘要：目的探究脑皮质内皮屏障抗原（EBA）及血管内皮生长因子（VEGF）在放射性血脑屏障损害条件下的动态变化规律，为临床提供参考。方法使用随机数字表法将 48 只清洁级雄性 SD 大鼠分为对照组和放射性脑损伤后 7、 14 和 28 d 4 组，每组 12 只。采用 X 线电子计算机断层扫描设备制备大鼠放射性脑损伤模型。大鼠按照 3 mL/kg的剂量尾静脉注射 3%伊文思蓝（EB），开颅并暴露脑皮质血管，放于微循环显微镜下观察 EB 渗出情况，并借助微循环显微成像系统评估血脑屏障通透性；使用免疫组化染色的方法来检测各组大鼠脑皮质 EBA 和 VEGF 的表达。结果与对照组相比，损伤组大鼠脑皮质微血管 EB 外渗量和 VEGF 的表达水平于伤后 7、 14、 28 d 均有不同程度升高（均 P＜0.05），从伤后 7 d 至 28 d 逐渐降低，损伤各亚组之间差异均有统计学意义（均 P＜0.05），二者呈正相关（r=0.898， P < 0.001）； EBA 表达水平于伤后各个时间点均下降（均 P＜0.05），从伤后 7 d 至 28 d 逐渐升高，损伤各亚组之间差异均有统计学意义（均 P＜0.05），与 EB 外渗量呈负相关（r=-0.866， P < 0.001）。结论大鼠放射性脑损伤后血脑屏障通透性增加与 EBA 表达减少、 VEGF 表达增加具有重要关联性。

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血管内皮祖细胞-血管再生在缺血再灌注损伤中的作用探讨

张智申，董贝贝，谢克亮，于泳浩

2016, 44 (6): 694-699. doi: 10.11958/20160042

摘要 ( 1012 )

PDF(3280KB) ( 4244 )

摘要：目的探讨血管内皮祖细胞（EPCs） -血管再生途径在血红素结合蛋白（HPX）改善大鼠脑缺血再灌注（I/R）后认知功能障碍中的作用。方法 SD 雄性大鼠依处理方式不同分为假手术（Sham）组 31 只、局灶性 I/R（MCAO，0.9%生理盐水 10 μL）组 30 只、 MCAO+叠氮钠（Vehicle， 0.1% Vehicle 10 μL）组 30 只、 MCAO+ HPX（1.86 g/L 的 HPX10 μL）组 30 只。采用改良的神经功能缺损评分（mNSS）评价大鼠 I/R 后神经功能缺损程度，Morris 水迷宫（MWM）实验检测大鼠 I/R 后的学习记忆能力改变；流式细胞技术（FCM）结合 CD34/CD133 双抗体标记技术检测大鼠 I/R 后外周血中 EPCs 数量变化；免疫组织化学技术结合 CD31/vWF 免疫荧光显色技术检测大鼠 I/R 后缺血半暗带皮质区新生血管数量。结果与 Sham 组相比， MCAO 组大鼠 I/R 后 mNSS 升高，逃避潜伏期延长，目标象限时间百分比减少，外周血中 EPCs 数量增加，缺血半暗带皮质区血管数量增加（均 P < 0.05）； MCAO+Vehicle 组大鼠与 MCAO 组相比， I/R 后 mNSS、逃避潜伏期、目标象限时间百分比、外周血中 EPCs 数量和缺血半暗带皮质区血管数量均无明显变化（均 P > 0.05）； MCAO+HPX 组大鼠与 MCAO 组、 MCAO+Vehicle 组相比， I/R 后 mNSS 显著降低，逃避潜伏期显著缩短，在目标象限时间百分比明显增加，外周血中 EPCs 计数显著增加，缺血半暗带皮质区血管数量明显增加（均 P <0.05）。结论 EPCs-血管再生机制在 HPX 改善大鼠局灶性 I/R 后认知功能障碍中发挥积极的作用。

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右美托咪定对痛觉过敏大鼠脊髓 PKCγ、 CaMKⅡα及pCaMKⅡα表达的影响

孙哲，王志芬，何颖，王国林，于泳浩，元元

2016, 44 (6): 700-703. doi: 10.11958/20150404

摘要 ( 1101 )

PDF(375KB) ( 3915 )

摘要：目的探讨右美托咪定对切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓蛋白激酶 C （PKC） γ、钙/钙调素依赖性蛋白激酶（CaMK） Ⅱα及 pCaMKⅡα表达的影响。方法雄性 SD 大鼠 40 只，体质量 240~260 g， 2~3 月龄，随机数字表法分为 5 组（n=8）：空白对照组（C 组）、瑞芬太尼+切口痛组（R+I 组）、右美托咪定+瑞芬太尼+切口痛组（D+R+I 组）、右美托咪定+瑞芬太尼+切口痛+佛波醇酯+二甲基亚砜组（D+R+I+P+DMSO 组）、右美托咪定+瑞芬太尼+切口痛+二甲基亚砜组（D+R+I+DMSO 组）。采用足底切口的方法制备切口痛模型。瑞芬太尼以 1.2 μg·kg-1·min-1的速度经尾静脉输注 90 min；右美托咪定以 50 μg/kg 的剂量于术前 30 min 皮下注射；佛波醇酯及二甲基亚砜均为鞘内注射 10μL。分别于输注前 24 h（T0）、输注后 2、 6、 24 和 48 h（T1~4）时测定热刺激缩足潜伏期（PWL）和机械刺激缩足阈值（PWT）。最后 1 次行为学测试后处死大鼠，取脊髓 L4~6节段。采用 Western blot 法测定脊髓背角 PKCγ、 CaMKⅡα及pCaMKⅡα的表达。结果除 T0外，与 C 组比较，其余各组 PWL 缩短、 PWT 降低， PKCγ、 CaMKⅡα及 pCaMKⅡα表达上调。与 R+I 组比较， D+R+I 组、 D+R+I+DMSO 组 PWL 延长、 PWT 升高， PKCγ、 CaMKⅡα及 pCaMKⅡα表达下调。与 D+R+I 组比较， D+R+I+P+DMSO 组 PWL 缩短、 PWT 降低， PKCγ、 CaMKⅡα及 pCaMKⅡα表达上调。与 D+R+I+P+DMSO 组比较， D+R+I+DMSO 组 PWL 延长、 PWT 升高， PKCγ、 CaMKⅡα及 pCaMKⅡα表达下调。结论右美托咪定可以减少切口痛-瑞芬太尼痛觉过敏大鼠脊髓 PKCγ、 CaMKⅡα及 pCaMKⅡα的表达。

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受体相互作用蛋白 1 在异烟肼致小鼠肝细胞坏死中的作用研究

赵宏宇，胡晓，沈海涛，郑强

2016, 44 (6): 704-707. doi: 10.11958/20150188

摘要 ( 756 )

PDF(921KB) ( 3973 )

摘要：目的研究异烟肼（INH）致小鼠肝细胞坏死是否与受体相互作用蛋白 1（RIP1）的表达和程序性坏死有关。方法成年雄性昆明鼠 18 只按随机数字表法均分为 3 组，对照（C）组腹腔注射 0.3 mL 生理盐水每天 1 次； INH组以 INH 溶于生理盐水中，按 100 mg/kg 每天 1 次腹腔注射； Nec-1+INH 组以 Nec-1 溶于 0.1%二甲基亚砜（DMSO）， 1 mg/kg 腹腔每 12 h 注射 1 次，同时 INH 腹腔注射，剂量同 INH 组。所有动物均被干预 7 d。HE 染色观察细胞形态学变化。免疫组化、免疫印迹法和实时荧光定量 PCR 法检测各组 RIP1 的表达。比色法检测各组丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）的含量。结果 C 组的肝细胞排列整齐， Nec-1+INH 组肝细胞存在变性和坏死，但程度较 INH 组明显减轻。与 C 组比较， INH 组肝细胞 RIP1、 ROS 和 MDA 表达均增强， GSH 和 SOD 表达下降（P＜0.05）。与 INH 组比较， Nec-1+INH 组肝细胞坏死明显减轻，肝细胞 RIP1、 MDA 和ROS 的表达明显下降， GSH 和 SOD 的表达增加（P＜0.05）。结论 INH 致小鼠肝细胞坏死与程序性细胞坏死有关，与 RIP1 表达增强有关。阻断 RIP1 的表达，可能是一个预防 INH 致肝细胞坏死的策略。

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钛表面人工肽抑制格登链球菌生长的实验研究

马勍，张溪，张旭，孙迎春，高平

2016, 44 (6): 708-711. doi: 10.11958/20150285

摘要 ( 904 )

PDF(1046KB) ( 3743 )

摘要：目的检测自主设计合成的人工肽在钛表面的吸附情况及吸附后的抗菌效果，为种植体抗菌的实验研究提供新的思路。方法使用 ExPASy ProtParam、 ProtScale 软件、圆二色光谱和 Zeta 电位仪等，分析或测定人工肽与抗菌肽的各项理化性质及结构特征。利用常温孵育的方法将人工肽锚定于钛表面。使用 X 射线光电子能谱与原子力显微镜检测人工肽在钛表面的吸附。通过共聚焦激光显微镜观察锚定于钛表面的人工肽对格登链球菌的抑菌作用。使用透射电镜检测游离人工肽与抗菌肽对格登链球菌结构的破坏作用。结果自主设计合成的人工肽仍具有抗菌肽发挥抗菌作用所需的各项理化性质及结构特征。在孵育于 5 g/L 人工肽的 PBS 溶液中的钛片表面即可检测到人工肽的吸附，且该试件对格登链球菌的存活及黏附均有一定的抑制效果。结论自主设计合成的人工肽实现了在钛表面吸附并抑制格登链球菌生长的设想。

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Foxp3+Tregs 在慢性间歇低氧所致肝损伤中的作用

白晓纯王琳赵忺田建立

2016, 44 (6): 712-715. doi: 10.11958/20150217

摘要 ( 932 )

PDF(342KB) ( 3832 )

摘要:目的探讨叉头样转录因子 P3（Foxp3）阳性调节性 T 细胞（Tregs）在慢性间歇低氧诱导的肝损伤中的作用。方法 32 只雄性 Wistar 大鼠随机均分为空白对照组（A 组）、高脂饮食组（B 组）、间歇低氧组（C 组）和高脂饮食+间歇低氧组（D 组）。实验暴露 4 周后留取血标本并分离出肝组织，采用全自动分析仪检测各组大鼠血总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）的水平，比色法测定肝组织丙二醛（MDA）含量，放射免疫法检测促炎症细胞因子肿瘤坏死因子（TNF） -α和白细胞介素（IL） -1β水平， Western blot 法检测肝组织 Foxp3 蛋白表达。结果各组 TC、 LDL-C 比较均是 B 组高于 A、 C、 D 组， D 组高于 A、 C 组（均 P＜0.05），而 A 组与 C 组差异无统计学意义。ALT、 AST、 MDA、 TNF-α、 IL-1β水平比较均是 C 组高于 A 组， D 组高于 A、 B、 C 组（均 P＜0.05），而 A 组与 B 组、 B 组与 C 组间差异均无统计学意义。D 组肝组织 Foxp3 蛋白表达水平明显低于其他各组（P＜0.05）。结论 Foxp3+Tregs 参与在高脂饮食基础上慢性间歇低氧所致的肝损伤的调节，在此过程中可能起重要的保护性免疫作用。

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塞来昔布对大鼠重型颅脑创伤后运动功能及Apaf-1 蛋白表达的影响

张涛 1，国建飞 1，邢琳琳 1，张金玲 2，张宇新 3

2016, 44 (6): 716-719. doi: 10.11958/20150231

摘要 ( 960 )

PDF(1205KB) ( 4158 )

摘要：目的探讨在大鼠重型颅脑创伤模型中，塞来昔布对环氧合酶（COX） -2 和凋亡蛋白酶活化因子-1 （Apaf- 1）蛋白表达及运动功能的影响。方法 48 只成年雄性 Wistar 大鼠按随机数字表法随机等量分为 4 组。正常对照组不做任何处理，假手术组给予头皮切开并缝合，损伤组采用 Foda 法建立大鼠重型闭合性颅脑创伤模型，治疗组在损伤组基础上立即腹腔注入塞来昔布（250 mg/kg，给药间隔 6 h/次），其余 3 组在同等条件下给予等量生理盐水， 72 h 后统一取材。应用免疫组化法和 Western blot 法分别检测 COX-2 及 Apaf-1 蛋白表达变化。同上述分组方法每组另取 6 只，经 10 d 恢复后应用神经功能损害评分（NSS）对大鼠运动功能进行检测。结果损伤组 COX-2 和 Apaf-1 蛋白表达水平明显高于其他组，治疗组与损伤组比较能有效降低蛋白表达，但仍高于假手术组和正常组（P < 0.05）； NSS 评分显示治疗组与损伤组比较能有效改善大鼠的运动功能障碍（P < 0.05），但与假手术组和正常对照组比较仍有差距（P < 0.05）。结论塞来昔布可通过对 COX-2 蛋白的特异性抑制，减少由其引发的炎症反应，进一步降低 Apaf-1 蛋白的表达，从而减少神经细胞的凋亡，并改善大鼠脑创伤后的运动功能障碍。

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OPCAB 患者合并颈动脉狭窄临床危险因素与预后的相关性研究

王成蒙，王赞鑫，魏民新

2016, 44 (6): 720-723. doi: 10.11958/20160024

摘要 ( 955 )

PDF(372KB) ( 4456 )

摘要：目的研究行非体外循环冠状动脉旁路移植术（OPCAB）患者合并颈动脉狭窄（CAS）的危险因素及对预后的影响。方法回顾性分析 2013 年 6 月—2015 年 6 月择期行 OPCAB 治疗的 342 例患者的临床资料，依据术前颈动脉超声结果分为 CAS 组 71 例（单侧或双侧狭窄≥50%）及对照组 271 例（狭窄＜50%或无狭窄），比较 2 组基本资料，行多因素 Logistic 回归分析 CAS 的危险因素。比较 2 组术中及术后情况，对术后死亡患者进行危险因素分析。结果 2 组患者年龄、吸烟史、高血压病、慢性阻塞性肺疾病（COPD）差异有统计学意义（P＜0.05）。Logistic 回归显示，高龄（OR=1.050， 95%CI 1.014~1.086， P＜0.01）、高血压病（OR=2.566， 95%CI 1.299~5.071， P＜0.01）、 COPD（OR= 7.573， 95%CI 1.106~51.834， P＜0.05）是 OPCAB 合并 CAS 的危险因素。有 CAS （OR=4.530， 95%CI 1.361~15.078， P＜ 0.05）及经皮冠状动脉介入治疗史（OR=7.685， 95%CI 2.289~25.800， P＜0.01）是 OPCAB 术后患者死亡的危险因素。结论高龄、高血压病、 COPD 是 OPCAB 术患者合并 CAS 的危险因素， CAS 患者行 OPCAB 术后死亡风险较高。

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hrHPV 在宫颈癌中的感染状况及对 Caspase-1 和 IL-1β 表达的影响及意义

罗远材 1，王宝晨 2，郭路 1，李静 1

2016, 44 (6): 724-728. doi: 10.11958/20150224

摘要 ( 1129 )

PDF(572KB) ( 4715 )

摘要：目的探讨宫颈癌中高危人乳头瘤病毒（hrHPV）感染状况及对半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase） -1 和白细胞介素（IL） -1β表达的影响及临床意义。方法以 102 例宫颈癌患者（宫颈癌组）、 60 例宫颈上皮内瘤样病变（CIN 组）及宫颈正常的患者 30 例（对照组）为研究对象， PCR-反向点杂交法结合 DNA 芯片技术对各组 hrHPV DNA 进行感染和分型检测。免疫组化 SP 法检测各组 Caspase-1 和 IL-1β的表达。分析宫颈癌患者 hrHPV 感染者（阳性组）和阴性组、单一类型感染与多重感染中 2 指标的表达差异。考察 Caspase-1 和 IL-1β表达与宫颈癌患者临床病理参数的关系。结果宫颈癌组 hrHPV 感染（阳性组） 75 例（73.5％），检出 hrHPV 11 种，其中单一类型和多重 hrHPV 感染分别为 61 例（81.3％）和 14 例（18.7％）。宫颈癌组 hrHPV 感染率高于 CIN 组及对照组（36.7％和 6.7％）； Cas⁃ pase-1 和 IL-1β阳性表达率（61.8%和 51.0%）高于对照组（26.7%和 23.3%）， Caspase-1 阳性表达率高于 CIN 组（40.0%，均 P＜0.01）。宫颈癌患者 hrHPV DNA 表达阴性组的 Caspase-1 和 IL-1β阳性表达率（77.8%和 74.1%）均高于相应阳性组（56.0%和 42.7%）。Caspase-1 和 IL-1β在 hrHPV 单一感染组与多重感染组中阳性表达率差异均无统计学意义（P＞0.05）。宫颈癌组的 Caspase-1 和 IL-1β蛋白的表达与癌细胞分级、肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期有关（P＜0.05 或 P＜0.01）。结论宫颈癌中存在 hrHPV 单一和多重感染，且感染率高； hrHPV 可抑制 Caspase-1 和 IL-1β的表达，促进宫颈癌进展。

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血清 HE4、 CA125 联合检测对Ⅰ期高危子宫内膜癌患者的预测价值

陈安霞，滕飞，王颖梅，田文艳，高金萍，薛凤霞

2016, 44 (6): 729-732. doi: 10.11958/20160374

摘要 ( 962 )

PDF(320KB) ( 3932 )

摘要：目的探讨术前血清人附睾蛋白 4 （HE4）、 CA125 对Ⅰ期高危子宫内膜癌（EC）患者的预测价值并确立最佳诊断临界值。方法收集 231 例Ⅰ期 EC 患者的临床病理资料，检测术前血清 HE4、 CA125 水平，分析两者与临床病理特征的关系。根据相关依据将 231 例 EC 患者分为高危组 96 例，低危组 135 例，绘制受试者工作特征曲线（ROC），计算曲线下面积（AUC），以约登指数最大时确立 HE4、 CA125 诊断Ⅰ期高危 EC 的最佳临界值。结果肌层浸润深度、脉管浸润情况、子宫下段受累情况、病灶直径及危险分组不同的Ⅰ期 EC 患者 HE4 和 CA125 水平差异均有统计学意义（均 P < 0.05），绝经状态、合并高血压情况、病理类型、组织学分级及宫颈内膜腺体受累情况不同的Ⅰ 期 EC 患者仅 HE4 水平差异有统计学意义（均 P < 0.05），术前血清 HE4 与 CA125 水平呈正相关（r=0.262， P < 0.05）。HE4 诊断Ⅰ期高危 EC 患者的 AUC 为 0.794（95%CI： 0.734~0.854），临界值为 74 pmol/L，敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率为 75.0%、 83.0%、 75.8%、 82.4%、 79.7%； CA125 相应值为 0.696 （95%CI： 0.624~0.767）、 17 kU/L、 56.3%、 85.9%、 74.0%、 73.4%、 73.6%；两者联合诊断的 AUC 为 0.847（95%CI： 0.796~0.899），相应预测值为 95.8%、 77.0%、 74.8%、 96.3%、 84.8%。结论 HE4、 CA125 诊断Ⅰ期高危 EC 的最佳临界值分别为 74 pmol/L、 17 kU/L，联合检测预测Ⅰ期高危 EC 的敏感度、阴性预测值及准确率优于单项检测。

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肺泡样肺腺癌中端锚聚合酶的表达及其与WNT 信号通路的关系

李翀 1,2，郑旭 2，韩燕燕 2，吕艳 2，兰福 2，赵杰 2

2016, 44 (6): 733-735. doi: 10.11958/20150339

摘要 ( 1317 )

PDF(1171KB) ( 4014 )

摘要：目的探讨肺泡样肺腺癌中端锚聚合酶（TNKS）的表达情况及其与 WNT 信号通路的关系。方法收集 72 例单一亚型肺泡样肺腺癌组织（肺腺癌组）和 67 例癌旁正常肺组织（癌旁组）标本，应用免疫组化法检测 2 组 TNKS、 β-连环蛋白（β-catenin）和 c-myc 蛋白的表达情况，并分析 3 种蛋白在肺腺癌组织中表达的相关性。Western blot 检测 TNKS 在肺腺癌组和癌旁组中表达的差异性。结果 TNKS 蛋白主要于细胞质表达； β-catenin 蛋白在肺腺癌组主要于细胞质和细胞核表达， β-catenin 在癌旁组主要于细胞质表达，少量于细胞核表达； c-myc 蛋白主要于细胞核表达。TNKS、 β-catenin 和 c-myc 蛋白在肺腺癌组中的阳性表达率均高于癌旁组（P＜0.05）。β-catenin 蛋白细胞质和细胞核中的表达与 TNKS 及 c-myc 的表达水平均呈正相关（均 P＜0.05）。Western blot 检测示 TNKS 在肺腺癌组中的相对表达水平高于癌旁组（0.497±0.021 vs. 0.237±0.015，t=13.00， P < 0.01）。结论 TNKS 在肺腺癌中异常高表达，可能是通过调控 WNT 信号通路，从而促进肺腺癌的发生，抑制 TNKS 表达或可成为治疗肺腺癌的新靶点。

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充血性心力衰竭患者血浆生长分化因子-15 水平变化及临床意义

马萍 1，徐环 2，徐烨华 2，徐清斌 1，熊爱琴 2

2016, 44 (6): 736-739. doi: 10.11958/58776

摘要 ( 1066 )

PDF(316KB) ( 4075 )

摘要：目的观察充血性心力衰竭（CHF）患者血浆生长分化因子（GDF） -15 水平的变化，并探讨其临床意义。方法选取 CHF 患者 100 例（心衰组）和健康体检者 30 例（对照组）；心衰组按美国纽约心脏病协会（NYHA）心脏功能分级分为 NYHAⅡ级组 35 例、 Ⅲ级组 32 例、 Ⅳ级组 33 例，按左室射血分数（LVEF）水平分为 LVEF<0.4 组 52 例和 LVEF≥0.4 组 48 例。采用 ELISA 法检测血浆 GDF-15、 B 型利钠肽（BNP）水平，常规超声心动图测定 LVEF、左室舒张末期内径（LVDd）、收缩末期内径（LVDs）及左室短轴缩短率（LVFS），分析 GDF-15 与 NYHA 分级、 BNP 及超声心动图各指标的相关性。结果与对照组相比， NYHAⅡ~Ⅳ级组 BNP、 GDF-15、 LVDd、 LVDs 基本呈升高趋势， LVEF、 LVFS 基本呈下降趋势（P＜0.05）。对照组、 LVEF≥0.4 组和 LVEF<0.4 组 BNP、 GDF-15、 LVDd、 LVDs 依次升高， LVFS 依次降低，组间多重比较差异均有统计学意义（均 P＜0.05）。血浆 GDF-15 水平与 BNP、 NYHA 分级、 LVDd、 LVDs 呈正相关（r=0.524、 0.286、 0.453、 0.531，均 P < 0.05），与 LVEF、 LVFS 呈负相关（r= -0.592、 -0.587，均 P < 0.05）。结论血浆 GDF-15 可作为 CHF 诊断、治疗、判断预后的又一新指标。

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前列腺癌根治术前 MRI 结果对术后生化复发的预测价值研究

闫旭新 1，张志宏 2，刘学军 1，韩洞民 1，李欢 1，马莉 1，李小东 1

2016, 44 (6): 740-743. doi: 10.11958/20150398

摘要 ( 1156 )

PDF(381KB) ( 5764 )

摘要：目的研究前列腺癌根治术（RP）前行磁共振成像（MRI）预测术后生化复发的价值。方法选取 2006— 2013 年 115 例行 RP 且未接受辅助放化疗的前列腺癌患者，根据其影像资料将其分为 MRI 阳性组 87 例， MRI 阴性组 28 例，比较 2 组的术前临床资料。以术后前列腺特异性抗原（PSA）数值连续 2 次上升超过 0.2 μg/L 定义为生化复发（38 例），应用 Cox 比例风险回归筛选与生化复发相关的危险因素。结果 MRI 阳性组生存时间短于 MRI 阴性组，术前 PSA 水平高于阴性组（P < 0.05）， 2 组年龄差异无统计学意义。MRI 阳性组术前 PSA＞20 μg/L 者的比例、临床分期为 T3 期的比例、病理 Gleason 评分≥8 的比例、存在精囊侵犯（SVI）者的比例及内分泌治疗的比例均高于 MRI 阴性组（P < 0.05）。经单因素分析发现术前 MRI 阳性、术前 PSA 水平、活检 Gleason 评分、临床分期、病理 Gleason 评分、 SVI 和淋巴结侵犯（LNM）与患者术后生化复发有关（P < 0.05）。进一步多因素 Cox 分析认为术前 MRI 阳性、活检 Gleason 评分高和临床分期高是 RP 后生化复发的危险因素（P < 0.05）。结论术前 MRI 影像诊断有助于更好地预测 RP 后生化复发，改善前列腺癌患者的预后。

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慢性阻塞性肺疾病多重耐药菌感染的危险因素分析

谢朝云 1,2，熊芸 1，孙静 1，胡阳 2，李耀福 1

2016, 44 (6): 744-747. doi: 10.11958/20150111

摘要 ( 1040 )

PDF(301KB) ( 3849 )

摘要：目的分析慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者多重耐药菌感染的危险因素，为临床防控提供指导。方法回顾 2011 年 6 月—2015 年 5 月 814 例 COPD 患者的临床资料，包括年龄、性别、吸烟史、发病年限、严重程度分级、加重频率、每次加重持续时间、糖尿病、并发症、糖皮质激素使用频率、每次使用持续时间、抗菌药物使用频率、每次平均持续时间、使用抗菌药物种数、联用抗菌药物、血浆白蛋白浓度、血糖等，监测患者多重耐药菌感染情况，并对其危险因素进行 Logistic 回归分析。结果 814 例 COPD 肺部感染患者共分离出病原菌 857 株，多重耐药菌感染者 170 例，检出多重耐药菌菌株 175 株（20.42%），其中多重耐药/泛耐药铜绿假单胞菌（MDR/PDR-PA）的检出率最高，为 55.38%（36/65）。不同临床病理特征患者多重耐药菌感染情况差异均有统计学意义。Logistic 回归分析结果显示，急性加重和抗菌药物持续时间长、糖皮质激素和抗菌药物使用频率高是 COPD 肺部多重耐药菌感染的独立危险因素。结论 COPD 患者肺部多重耐药菌感染的防治应重视社区与医院结合，针对其相关危险因素采取有效防控措施。

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高危小肾癌的临床诊治分析

吴育栋 1，李刚 1，王江 1， 2，王勇 1，牛远杰1

2016, 44 (6): 748-751. doi: 10.11958/20160127

摘要 ( 971 )

PDF(1530KB) ( 4325 )

摘要:目的探讨影响小肾癌不良预后的高危因素，为个体化治疗提供依据。方法回顾性分析 2004 年 1 月— 2015 年 7 月天津医科大学第二医院泌尿外科收治的 18 例特殊小肾癌患者的临床病理资料。患者术前均行 B 超、 CT 平扫及增强检查，并进行手术治疗。分析肿瘤直径、病理类型、病理分期、 Fuhrman 分级等因素与患者预后的关系。结果术前 CT 检查示 18 例患者肿瘤直径 2.0～4.0 cm，平均（3.1±0.6） cm。术前诊断 T1aN0M0 分期患者 5 例、 T1aN0M1 患者 4 例（肺转移 3 例、脑转移 1 例）、 T1aN1M0 患者 3 例（CT 检查均伴有局部淋巴结转移）、 T3aN0M0 患者 6 例（均有肾静脉侵犯或肾静脉瘤栓）。术后病理示 FuhrmanⅡ级 12 例、 Ⅲ级 5 例、 Ⅳ级 1 例；透明细胞癌 15 例、乳头状癌 1 例、混合细胞型 1 例（肾恶性横纹肌样瘤伴肉瘤样变）、肾肉瘤样癌 1 例（Fuhrman Ⅳ级）。4 例（T3a， FuhrmanⅡ级）行后腹腔镜下肾部分切除术，其余行后腹腔镜下根治性肾切除术。术后随访 6~48 个月，中位随访时间 22.5 个月，死亡 4 例（2 例初诊肿瘤直径分别为 3.8 cm 及 4.0 cm、 1 例肾肉瘤样癌、 1 例脑转移），失访 1 例，其余患者未见肿瘤复发及转移。结论小肾癌伴肿瘤直径≥ 3.0 cm、 Fuhrman Ⅲ/Ⅳ级、肉瘤样癌、转移等高危因素者为高危小肾癌。高危小肾癌具有异质性，可表现为侵袭性生长、早期侵犯肾周组织甚至转移。应根据术前影像学检查结果及术后病理制定个体化治疗方案。

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HIF-1α、 VEGF 在预测早期糖尿病肾脏病中的价值

宋秋艳，余玲，董瑞鸿

2016, 44 (6): 752-754. doi: 10.11958/20150092

摘要 ( 883 )

PDF(325KB) ( 4159 )

摘要：目的通过分析缺氧诱导因子（HIF） -1α和血管内皮生长因子（VEGF）水平与肾小球滤过率（eGFR）的关系，探讨 HIF-1α、 VEGF 在预测早期糖尿病肾脏病（DKD）中的价值。方法 76 例糖尿病肾脏病患者根据 eGFR 水平分为 DKD1 组［eGFR＞90 mL （min·1.73 m2）， 48 例］和 DKD2 组［60 mL/ （min·1.73 m2）＜eGFR≤90 mL/ （min·1.73 m2）， 28 例］，另择同期健康体检者 23 例为对照组。采用液相免疫沉淀透射比浊法检测 24 h 尿微量白蛋白，计算尿白蛋白排泄率（UAE）；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测 HIF-1α、 VEGF。结果 DKD1 组、 DKD2 组 UAE、 HIF-1α、 VEGF 水平均明显高于对照组（均 P＜0.05）； DKD2 组 UAE 水平与 DKD1 组差异无统计学意义， HIF-1α、 VEGF 水平高于 DKD1 组（均 P＜0.05）。HIF-1α、 VEGF 与 eGFR 均呈负相关（r 分别为-0.551、 -0.593， P < 0.05）。ROC 曲线显示，血清 HIF-1α和 VEGF 的 ROC 曲线均位于机会对角线以上； HIF-1α对 DKD1 和 DKD2 诊断的敏感度分别为 92.1%、 87.4%，特异度分别为 91.7%、 85.4%； VEGF 的敏感性分别为 96.1%、 86.2%，特异度分别为 93.3%、 89.1%。结论血清 HIF-1α和 VEGF 水平随糖尿病肾脏病进展的严重程度而发生变化，有可能作为糖尿病肾脏病的早期预测指标。

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前列腺癌和前列腺增生中α辅肌动蛋白-1 的表达及其临床意义

李亚朋 1，刘健 1，曹凤宏 1，李晓强 1，陈宁 1， 2，陈晨 1， 2

2016, 44 (6): 755-758. doi: 10.11958/20150262

摘要 ( 1081 )

PDF(423KB) ( 5466 )

摘要：目的探讨α辅肌动蛋白-1 （α-actinin-1， ACTN1）在前列腺癌（PCa）和前列腺增生（BPH）中的表达及临床意义。方法收集 2007 年 1 月—2014 年 10 月我校附属医院收治的 PCa 和 BPH 患者资料，按一定的入组标准筛选，采用免疫组织化学法检测 30 例 PCa 组织和 30 例 BPH 组织中 ACTN1 的表达情况，采用蛋白免疫印迹（Western blot）方法检测其中的 18 例 PCa 组织和 20 例 BPH 组织中 ACTN1 的相对表达量。结果免疫组织化学结果显示， ACTN1 在 PCa 和 BPH 两组中的阳性表达率分别为 76.7%和 20.0%，差异有统计学意义（P < 0.01）； Western blot 结果显示， ACTN1 在 PCa 组中的相对表达量（0.591±0.182）明显高于 BPH 组（0.037±0.052），差异有统计学意义（P < 0.05）；免疫组织化学结果中， ACTN1 在 PCa 中的表达在不同年龄、血清前列腺特异抗原（PSA）水平、是否有骨转移、是否有淋巴结转移患者之间差异无统计学意义（P > 0.05），而在不同 Gleason 分级、 T 分期患者之间差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 ACTN1 在 PCa 组织中的表达明显高于 BPH 组织，且在 PCa 组织中的表达与 Gleason 分级、 T 分期之间可能存在关联。

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孕前肥胖的早发型子痫前期患者临床特点与围产结局分析

吴璠，华绍芳，李月琴

2016, 44 (6): 759-762. doi: 10.11958/20150320

摘要 ( 791 )

PDF(355KB) ( 3849 )

摘要：目的探讨孕前肥胖的早发型子痫前期患者临床特点及对围产儿多系统的影响。方法回顾分析我院产科住院的早发型子痫前期产妇 111 例，按孕前体质指数（BMI）分为正常组（BMI＜28 kg/m2） 56 例和肥胖组（BMI≥ 28 kg/m2） 55 例，比较 2 组产妇基础体质量、基础 BMI、孕期增重、高危因素、临床特征、血脂指标及新生儿临床特点，并分析产妇血糖、血脂指标与新生儿各指标的相关性。结果肥胖组产妇更易发生血液浓缩和血脂代谢紊乱，血脂水平、糖化血红蛋白（HbA1c）、血细胞比容、血小板及纤维蛋白原均显著高于正常组；引发新生儿酸中毒及心脏等脏器损害，肥胖组新生儿出生 Apgar 评分、 pH、血糖显著低于正常组，而剩余碱（BE）、乳酸（LAC）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CKMB）高于孕前正常组（均 P＜0.05）；相关分析示产妇低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）及 HbA1c 与新生儿 Apgar 评分、 pH 呈负相关，与新生儿 LAC、 CKMB 呈正相关（P＜0.05 或 P＜ 0.01）。结论孕前肥胖的早发型子痫前期产妇所发生的脂代谢紊乱与母婴围产结局密切相关。

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过度换气综合征患者手足搐搦危险因素分析

游道锋 1,乔秋阁 2,谢冰 1,姜相明 1,陈莹 1

2016, 44 (6): 763-765. doi: 10.11958/20150230

摘要 ( 1064 )

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摘要：目的探讨引起过度换气综合征患者出现手足搐搦的危险因素。方法分析就诊于我院的过度换气综合征患者 103 例，根据其是否出现手足搐搦，分为手足搐搦组和非手足搐搦组。分析 2 组之间性别、年龄、电解质、 pH 值和二氧化碳分压[p(CO2)]的差异；将 P < 0.1 的因素纳入二分类 Logistic 回归，并采用 Logistic 回归（Forward Wald 法）分析患者出现手足搐搦的危险因素。结果 103 例患者中出现手足搐搦者 70 例（68%），未出现 33 例（32%），手足搐搦组血清 K+、血清磷和 p(CO2) 均明显低于非手足搐搦组（P < 0.01），而手足搐搦组 pH 值高于非手足搐搦组（P < 0.01）。2 组性别、年龄、血清 Na+、血清 Cl-、血清钙（结合钙和离子 Ca2+）、离子 Ca2+和血清 Mg2+水平差异无统计学意义（P > 0.05）。二分类 Logistic 回归分析显示年龄小、血清 K+降低、血清磷降低和 p(CO2) 降低是手足搐搦的危险因素。结论年龄小、血清 K+水平降低、血清磷降低和 p(CO2)降低是过度换气综合征患者出现手足搐搦的危险因素。

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玻璃体视盘牵拉：前部缺血性视神经病变的病因之一

孟斌，陈序，吉昂

2016, 44 (6): 766-768. doi: 10.11958/20160008

摘要 ( 984 )

PDF(519KB) ( 3996 )

摘要：目的探讨玻璃体视盘牵拉（VPT）与前部缺血性视神经病变（AION）的相关性。方法对 2 例 AION 患者进行眼科常规检查，同时行视野、眼底血管造影、视盘光相干断层成像检查，分析检查结果。结果 2 例 AION 患者光相干断层扫描检查可发现典型 VPT 表现，且 VPT 发生的位置与 AION 发生的位置相一致。结论 VPT 是 AION 的可能病因之一。

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血清 TPOAb 水平对 Graves 病患者抗甲状腺药物治疗的影响

卢泽芬 1，于佳 2，任丽萍 3，郝杰 1，何庆 4

2016, 44 (6): 769-771. doi: 10.11958/20150409

摘要 ( 1002 )

PDF(259KB) ( 4036 )

摘要：目的分析血清甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）水平对初发 Graves 病（GD）患者抗甲状腺药物（ATD）治疗的影响。方法选择应用 ATD 治疗满 12 个月的初发 GD 患者 121 例，将其分为 TPOAb 阴性组 49 例（TPOAb≤ 35 IU/mL）和阳性组 72 例（TPOAb＞35 IU/mL），根据 TPOAb 滴度水平将阳性组分为阳性低组（35 IU/mL＜TPOAb≤ 200 IU/mL， 19 例）、中组（200 IU/mL＜TPOAb≤500 IU/mL， 20 例）、高组（500 IU/mL＜TPOAb≤1 000 IU/mL， 13 例）、极高组（TPOAb＞1 000 IU/mL， 20 例），比较治疗 12 个月各组 ATD 总用量以及治疗 3、 6、 12 个月时阴性组和阳性组促甲状腺激素（TSH）恢复正常的比例。结果 TPOAb 阳性组 ATD 的总用药量为（1 743.82±265.38） mg，低于阴性组（1 889.18±125.51） mg； TPOAb 阳性低、中、高、极高组总用药量分别为（1 759.71±230.29） mg、（1 793.75±299.02） mg、（1 731.54±236.44） mg 和（1 710.00±290.73） mg。TPOAb 阳性组在治疗 3 个月时 TSH 恢复正常的比例明显高于阴性组（P＜0.05）。结论 GD 患者血清 TPOAb 阳性会导致 ATD 治疗的疗程缩短、总用药量减少。

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腹腔镜和开腹修补术对老年上消化道溃疡穿孔患者PCT 及细胞免疫影响的比较

王庚壮 1，赵志荣 2，潘立峰 1

2016, 44 (6): 772-775. doi: 10.11958/20150273

摘要 ( 1029 )

PDF(314KB) ( 3753 )

摘要：目的探讨老年上消化道溃疡穿孔腹腔镜修补手术的效果，及手术前后降钙素原（PCT）及细胞免疫功能的变化特点。方法选取 44 例老年上消化道溃疡穿孔行修补手术患者，其中腹腔镜组 20 例，开腹组 24 例，分别于术前 0.5 h 和术后 24 h、 48 h、第 7 天抽取患者空腹静脉血，采用胶体免疫结合法测定 PCT，流式细胞仪测定 T 淋巴细胞亚群（CD3+、 CD4+、 CD8+）及自然杀伤（NK）细胞水平。观察 2 组手术并发症、术后住院时间。结果术前腹腔镜组与开腹组血清 PCT 差异无统计学意义； 2 组患者术前 0.5 h CD3+、 CD4+、 CD8+水平和 NK 细胞活性差异均无统计学意义；术后 24 h、 48 h 腹腔镜组 PCT 水平均低于开腹组（P＜0.05）；腹腔镜组与开腹组 CD3+、 CD4+、 CD8+、 NK 细胞随时间变化差异有统计学意义（P＜0.05）；术后 24 h 2 组 CD3+、 CD4+、 CD8+较术前均明显降低，且除 CD8+外，开腹组均低于腹腔镜组，差异均有统计学意义；术后 48 h 腹腔镜组 CD3+、 CD4+、 CD8+恢复至术前水平，而开腹组患者 CD3+术后第 7 天仍未恢复至术前水平；术后 24 h 2 组 NK 细胞较术前降低， 2 组间比较差异无统计学意义；术后 48 h 腹腔镜组 NK 细胞恢复至术前水平，开腹组 NK 细胞与术前相比差异亦无统计学意义；与开腹组相比，腹腔镜组术后并发症少，术后住院时间短。结论腹腔镜上消化道溃疡穿孔修补手术对老年患者机体应激反应及免疫功能影响较小，在免疫功能保护上具有优势。

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Perimount 牛心包瓣在二尖瓣置换术后的短期疗效研究

田彦超 1，陈庆良 2，陈彤云 2，姜楠 2，王联群 2

2016, 44 (6): 776-779. doi: 10.11958/20150341

摘要 ( 1067 )

PDF(324KB) ( 4043 )

摘要：目的评价 Perimount 牛心包瓣在患者二尖瓣置换术后的短期疗效情况。方法选取 88 例行 Perimount 牛心包瓣置换术患者，记录患者 1 年病死率、脑出血等一般情况。分别于术前、术后 1 周、 3 个月、 1 年行超声心动图检查，比较不同时间点患者纽约心脏病学会（NYHA）心功能分级、左心房直径（LA）、左室舒张末期直径（LVDD）、左室收缩末期直径（LVSD）、左心室射血分数（LVEF）及肺动脉压力（PAP）情况；术后 1 周、 3 个月及 1 年的最大跨瓣压差（PG）、平均跨瓣压差（MG）、最大跨瓣流速（PV）及有效瓣口面积（EOA）等血流动力学指标。结果 1 年内有 2 例（2.3%）死亡， 1 例死于脑出血， 1 例死于血栓栓塞；瓣周漏 1 例（1.2%），无感染性心内膜炎和结构性瓣膜衰败发生。术后 3 个月及 1 年 NYHA 心功能分级改善（P < 0.05）。与术前比较，术后 1 周、 3 个月及 1 年 LA、 LVDD、 PAP 均降低（P < 0.05）；术后 1 周 LVSD 、 LVEF 均降低（P < 0.05）；术后 3 个月及 1 年 LVEF 均升高（P < 0.05）。与术后 1 周比较，术后 3 个月及 1 年 LA、 LVEF 均升高（P < 0.05）。患者术后 1 周、 3 个月与 1 年的 PG、 MG、 PV 及 EOA 比较差异均无统计学意义。结论 Perimount 牛心包瓣应用于二尖瓣膜置换术后 3 个月和 1 年患者心功能恢复较好。

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Akin 截骨术联合 Scarf 截骨术治疗中重度外翻

李晓东，江汉，江毅，肖联平，郑金鑫

2016, 44 (6): 780-782. doi: 10.11958/20150332

摘要 ( 1403 )

PDF(402KB) ( 4074 )

摘要：目的评价 Akin 截骨术联合 Scarf 截骨术治疗中重度外翻的效果。方法选取中重度外翻患者 39 例（58 足），其中 12 例（16 足）中度外翻患者采用单独 Scarf 截骨术， 27 例（42 足）中重度外翻患者采用 Scarf 联合 Akin 截骨术。手术前、后均行患足 X 线片检查，测量外翻角（HVA）、第一二跖骨间角（IMA）和胫侧籽骨位置，记录患者术前术后美国足踝外科学会足功能评分系统（AOFAS）评分。结果手术均顺利完成。每足手术时间 45~78 min，平均（55.0±6.8） min，术中出血 3~20 mL，平均（11.0±5.4） mL。除 1 例（1 足）重度外翻患者 Akin 截骨处愈合较慢以外，其余患者 Scarf 及 Akin 截骨处均愈合良好。手术切口 2 例（2 足）出现红肿，后自行消退。2 例（2 足）出现趾背内侧麻木，考虑为神经损伤，经 3~5 个月好转。本组患者均获得随访，未见外翻复发病例。术后 HVA （14.1°± 5.3°）、 IMA （7.7°±3.8°）和胫侧籽骨位置［（2.58±0.61）级］均低于术前［分别是（39.6°±6.8°）、（18.7°±5.4°）和（4.87±0.59）级］， AOFAS 评分高于术前（分： 84.4±8.7 vs. 37.3±9.5， P＜0.05）。结论 Akin 截骨术联合 Scarf 截骨术治疗中重度外翻疗效肯定，矫形效果满意，并发症少，外翻复发率低，值得临床推广应用。

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文拉法辛治疗抑郁症住院和门诊模式效果比较

任丽平，刘佩佩

2016, 44 (6): 783-785. doi: 10.11958/20150198

摘要 ( 1354 )

PDF(341KB) ( 3809 )

摘要：目的评价采用住院和门诊模式使用文拉法辛治疗抑郁症的效果。方法 72 例抑郁症患者中住院治疗 36 例（住院组），同期门诊治疗 36 例（门诊组），分别使用文拉法辛（商品名：怡诺思）对其治疗，于治疗前及治疗 1、 2、 4 及 8 周后，采用汉密顿抑郁量表（HAMD24）评分对 2 组患者的抑郁症状进行评定并比较 2 组疗效。结果观察结束时，住院组无脱落，门诊组脱落 2 例；住院组从第 2 周开始直到第 8 周末 HAMD24评分明显下降，显著低于门诊组，差异有统计学意义；临床疗效比较，住院组总有效率 80.6％，门诊组 64.7％，差异无统计学意义。结论文拉法辛治疗抑郁症住院模式比门诊模式具有更高的治疗价值并可获得更好的临床结局。

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老年患者术后谵妄的相关因素分析

邵义泽 1，张艳秋 1，卢向丽 2

2016, 44 (6): 786-788. doi: 10.11958/20150208

摘要 ( 902 )

PDF(296KB) ( 3909 )

摘要：目的探讨老年患者术后谵妄的相关影响因素，为其预防和治疗提供参考。方法手术后发生谵妄者 54 例为观察组，同期外科手术资料完整无谵妄者 150 例为对照组。比较分析 2 组年龄、性别、营养不良、水电解质紊乱、术后机械通气、术后低氧血症、重症感染以及术后疼痛程度和合并基础疾病的差异，二分类 Logistic 分析患者术后谵妄的影响因素。记录并分析观察组患者的疾病转归及预后情况。结果观察组平均年龄高于对照组，术后低氧血症、重症感染构成比例高于对照组（P＜0.05）。高龄、术后有低氧血症、重症感染是患者术后发生谵妄的危险因素。观察组 1 例死于肺感染， 1 例死于多脏器功能衰竭，余 52 例患者出院 3 个月后均好转。结论高龄、术后有低氧血症、重症感染为患者术后谵妄发生的危险因素，临床术前与术后需要多加注意。

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左西孟旦与重组人脑利钠肽治疗急性失代偿性心力衰竭效果对比研究

吴淑彬，丁力平，靳志涛，张丽娟，张铮，康凤池，张连，胡桃红

2016, 44 (6): 789-792. doi: 10.11958/20150272

摘要 ( 1332 )

PDF(351KB) ( 3947 )

摘要：目的对比左西孟旦（Levo）和重组人脑利钠肽（rhBNP）治疗急性失代偿性心力衰竭（ADHF）的效果。方法选取 75 例 ADHF 患者，随机均分入实验组（Levo 组、 rhBNP 组）及对照组（多巴酚丁胺组）。观察并比较 3 组患者用药 72 h 后心率、呼吸频率、 24 h 尿量、 6 分钟步行距离改善情况及用药 1 周后血浆脑利钠肽（NT-proBNP）、左室舒张末期内径（LVEDD）以及左室射血分数（LVEF）变化情况。结果用药 72 h 后各组心率及呼吸频率均降低、 24 h 尿量及 6 分钟步行距离均增加（P < 0.05）；用药 1 周后各组 NT-proBNP 均下降、 LVEF 均上升（P < 0.05），但治疗前后 LVEDD 无明显改变（P > 0.05）；治疗后， Levo 组与 rhBNP 组上述指标改善程度较多巴酚丁胺组更明显（P < 0.05），但 Levo 组与 rhBNP 组比较差异无统计学意义。常见不良反应为低血压、室性早搏，各组不良事件发生率差异无统计学意义。结论与多巴酚丁胺相比， Levo 与 rhBNP 治疗 ADHF 效果确切，不良反应少，安全性良好，值得推广应用。

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白斑颗粒剂Ⅰ号方治疗白癜风的临床效果观察

詹庆霞，古昕平，顾安康，张峻岭

2016, 44 (6): 793-795. doi: 10.11958/20150362

摘要 ( 1374 )

PDF(680KB) ( 3867 )

摘要：目的通过应用皮肤共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）动态观察中药白斑颗粒剂Ⅰ号方治疗气滞血瘀型白癜风的皮损色素恢复情况及效果。方法气滞血瘀型白癜风患者 92 例随机分为 2 组，试验组 49 例予口服白斑颗粒剂Ⅰ号方 3 g，每日 2 次；转移因子胶囊每次 6 mg，每日 3 次；外用 0.1%糠酸莫米松乳膏每日 1 次，或 0.1%他克莫司软膏（面部），每日 2 次。对照组 43 例仅单纯口服转移因子胶囊每次 6 mg，每日 3 次；外用 0.1%糠酸莫米松乳膏（面部除外），每日 1 次，或 0.1%他克莫司软膏（面部），每日 2 次，治疗 3 个月，观察 2 组疗效。应用 CLSM 监测皮损处复色情况和色素恢复等级，以及树枝状黑素细胞数目和炎症细胞浸润的变化。结果试验组和对照组治疗后较治疗前的复色情况均有明显改善，试验组总有效率优于对照组（81.63% vs. 69.77%， χ2=3.947， P＜0.05）。CLSM 示试验组白癜风皮损色素恢复等级情况与对照组差异有统计学意义、树枝状黑素细胞比例高于对照组，炎症细胞比例低于对照组（P＜0.05）。结论白斑颗粒Ⅰ号方治疗气滞血瘀型白癜风效果较为明显。

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动物线粒体基因组测序方法的研究进展

李天杰 1，曹延祥 2，赵红翠 1,3,4，于洋 1,3,4，乔杰 1,3,4

2016, 44 (6): 796-800. doi: 10.11958/20150437

摘要 ( 1272 )

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摘要：线粒体是具有独特 DNA 分子和完整遗传信息传递与表达系统的一类细胞器，参与能量代谢、信号转导、细胞凋亡等许多生命活动。线粒体 DNA 突变与线粒体疾病的发生密切相关，广泛应用于分子生物学、遗传学、法医学鉴定等各个方面。因此，线粒体基因组测序对于其结构功能的研究有重要价值。本文综述了线粒体基因组测序方法的研究进展，重点是第一代基因测序技术、聚合酶链反应（PCR）技术、第二代基因测序技术，以及滚环扩增技术和线粒体间接测序，并对每种方法的优缺点进行了总结，归纳了线粒体假基因对线粒体基因组分析过程中的干扰和处理策略。

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