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缺氧诱导因子-1α对结直肠癌细胞上皮间质转化及
侵袭迁移的影响
吴丽丽 1, 孙慧誌 1, 孙冉 2, 赵楠 1,3, 王勇 1, 古强 1,3, 董学易 1,3, 刘芳 1,3, 孙保存 1,3,4△
2016, 44 (5):
535-539.
doi: 10.11958/20150385
摘要
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摘要: 目的 探讨缺氧是否能促进不同分化程度结直肠癌细胞上皮间质转化 (EMT), 并分析缺氧对结直肠癌细
胞侵袭、 迁移的影响。方法 分别选取 HCT116(低度分化)和 HT-29(高度分化)结直肠腺癌细胞。观察 0、 10、 25、
50、 100 及 150 mg/L 氯化钴 (CoCl2) 诱导 2 种细胞 48 h 后的形态变化。分析 0、 10、 25、 50 及 100 mg/L CoCl2 处理 48 h
后缺氧诱导因子 (HIF) -1α蛋白表达变化, 筛选出 CoCl2诱导细胞缺氧的最适合浓度。MTT 实验检测不同时间点 (0 、
24 、 48 、 72 及 96 h) CoCl2诱导 2 种结直肠癌细胞的增殖情况, 筛选出 CoCl2诱导缺氧的最佳时间。最佳浓度和时间
条件下, 对 HCT116 和 HT-29 细胞分别进行缺氧 (缺氧组) 和常氧 (常氧组) 处理, Transwell 侵袭和划痕实验检测 2 组
2 种细胞的侵袭、 迁移情况; Western blot 实验和 RT-PCR 实验检测 2 组 HIF-1α、 E-cadherin 及 Vimentin 的蛋白及
mRNA 表达水平。结果 50 mg/L CoCl2作用 48 h 时 2 种细胞均出现明显的形态改变。2 组 HCT116、 HT-29 细胞的
HIF-1α蛋白表达水平随 CoCl2浓度增加均呈先增后减趋势, 50 mg/L 为最适宜浓度 (P < 0.05)。0~96 h 时 2 种细胞不
论有无缺氧, 细胞增殖能力均呈先增后减趋势 (P<0.05), 48 h 为最佳作用时间。HCT116 和 HT-29 细胞系中缺氧组
穿膜细胞数和细胞迁移率均明显高于常氧组 (P<0.05)。HCT116、 HT-29 细胞系中缺氧组 HIF-1α、 Vimentin 的蛋白
和 mRNA 表达水平均高于常氧组, 而 E-cadherin 的蛋白和 mRNA 表达水平低于常氧组(均 P<0.05)。结论 缺氧
能诱导不同分化程度结直肠癌细胞均发生 EMT, 并能增强 2 种结直肠癌细胞的侵袭、 迁移能力。
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