天津医药 ›› 2015, Vol. 43 ›› Issue (1): 30-33.doi: 10.3969/j.issn.0253-9896.2015.01.008
刘建明, 周友浪△, 马利林, 徐骏飞, 章建国#br#
LIU Jianming, ZHOU Youlang△, MA Lilin, XU Junfei, ZHANG Jianguo#br# #br#
摘要: 摘要: 目的 检测与干细胞相关的 2 种因子胚胎干细胞相关转录因子 4(Nanog)和分化抗原簇 44(CD44)在胃癌细胞株 MKN45 悬浮球体细胞中的表达。 方法 选择人胃癌细胞株 MKN45, 在含有表皮生长因子(EGF)及成纤维生长因子(bFGF)无血清培养液中培养, 观察球体形成情况; 采用免疫印迹(Western blot)、免疫荧光与实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测干细胞相关基因 Nanog 和 CD44 在球体细胞及原代贴壁细胞中的表达差异。 结果 胃癌细胞株 MKN45 在无血清培养条件下能形成悬浮球体, 球体细胞中的 Nanog 和 CD44 的 mRNA 相对表达量分别为 2.34±0.22 和 1.18±0.04, 明显高于贴壁细胞中的 Nanog 和 CD44 的 mRNA 相对表达量 1.00±0.00 和 1.00±0.05;球体细胞中的 Nanog 和 CD44 的蛋白质相对表达量分别为 0.18±0.02 和 0.24±0.04, 明显高于贴壁细胞中的相对表达量 0.07±0.02 和 0.18±0.01(P< 0.05)。 球体细胞中 Nanog 主要分布在细胞核周围及细胞质中, 而 CD44 主要在细胞膜上表达, 且同一个球体细胞中的 Nanog 与 CD44 大多同时表达。 结论 胃癌细胞株 MKN45 在无血清培养条件下形成的球体细胞具有肿瘤干细胞的特性。 Nanog/CD44 共表达细胞可能是胃癌干细胞的一种表型。