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    述评
    血脂管理进展及思考
    孙根义
    2016, 44 (2):  129-132.  doi: 10.11958/20150125
    摘要 ( 1246 )   PDF(361KB) ( 4063 )  
     动脉粥样硬化 (AS) 是冠心病、 缺血性脑卒中和外周血管疾病 (动脉粥样硬化性心血管疾病, ASCVD) 的病理基础, 血胆固醇水平与 ASCVD 发病风险密切相关。中国心血管病患病率和死亡率呈上升趋势。ASCVD 防治任务艰巨。血脂管理的目标是降低 ASCVD 风险。非高密度脂蛋白胆固醇 (非 HDL-C) 包括所有致 AS 脂蛋白胆固醇,非 HDL-C 与低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C) 并列为血脂管理干预靶标可能更为适合。依据风险评估, 设定血脂达标值适用于中国临床。生活方式干预是血脂管理的基础, 综合干预各项危险因素方可有效防治 ASCVD。
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    细胞与分子生物学
    Roscovitine在衣霉素诱导足细胞损伤中的保护作用
    高翔 1,2, 张悦 3, 张爱金 1, 付芃 1, 李佳琳 1, 吴建 1, 刘巍 1△
    2016, 44 (2):  133-137.  doi: 10.11958/59025
    摘要 ( 1019 )   PDF(543KB) ( 4049 )  
    目的 应用衣霉素诱导内质网应激(ERS), 观察 Roscovtine 对 ERS 导致足细胞损伤的保护作用。方法体外培养永生化小鼠足细胞, 取 37 ℃分化成熟细胞随机分组:(1)正常对照组、 DMSO 组及衣霉素 Tunicamycin(1.0 μmol/L, TM) 组, 各实验组分别刺激 3、 6、 12 h。(2) 正常对照组、 Tunicamycin (1.0 μmol/L, TM) 组及 Tunicamycin+Rosco⁃ vitine(20、 40 μmol/L, TM+ROS)组, 各实验组分别刺激 12 h。应用流式细胞术及 TUNEL 法检测足细胞凋亡情况; 应用 Western blot 检测细胞周期素依赖性蛋白激酶 5(Cdk5)及 ERS 标志蛋白 GRP78、 Caspase-12、 CHOP 的表达变化。结果 (1)与正常对照组和 DMSO 组相比, Tunicamycin 刺激 3、 6 及 12 h 后, TM 组足细胞凋亡率及 Cdk5、 GRP78、 Caspase-12 和 CHOP 蛋白的表达水平均呈明显的时间依赖性增高 (P < 0.05);(2) 加入 Roscovitine 干预后, 与 TM 组相比, TM+ROS(20、 40 μmol/L)组足细胞凋亡率及 GRP78、 Caspase-12 和 CHOP 蛋白的表达水平均显著降低(P < 0.05), 其干预作用呈现明显的剂量依赖性。结论 Cdk5 抑制剂 Roscovitine 能显著抑制衣霉素诱导的足细胞凋亡,从而发挥细胞保护作用。Roscovitine 的足细胞保护作用可能有助于糖尿病肾病的治疗。
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    人牙龈成纤维细胞和牙周膜韧带细胞多向分化潜能的比较
    苏瑞, 宋立婷, 董允允, 邓嘉胤, 蒋少云△
    2016, 44 (2):  137-141.  doi: 10.11958/20150183
    摘要 ( 1180 )   PDF(688KB) ( 4109 )  
    目的 体外培养人牙周膜韧带细胞 (HPDLCs) 和人牙龈成纤维细胞 (HGFs), 对比两者成骨、 成软骨以及成脂的多向分化潜能的差异。方法 运用酶消化结合组织块法体外培养 HPDLCs 和 HGFs, 选择生长状态良好的 3~4 代 HPDLCs 和 HGFs, 进行成骨、 成软骨、 成脂诱导, 未分化诱导的细胞作为对照组。分别用茜素红染色、 油红 O 染色以及阿利新蓝染色分别检测两种细胞的成骨、 成软骨及成脂分化能力。半定量逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR) 检测 HPDLCs 和 HGFs 中相关标志基因骨钙素(OCN)、 Ⅰ型胶原蛋白 (Col 1)、 runt 相关转录因子 2 (RUNX2)、 过氧化物酶体增殖物激活受体γ2 (PPARγ2)、 X 型胶原蛋白 (Col 10) mRNA 的表达。结果 成骨诱导两种细胞培养至 28 d 时, 细胞周围均有红染钙结节形成, HPDLCs 形成的钙结节明显多于 HGFs; 成软骨诱导两种细胞 14 d 时均可见胞质蓝染的细胞, HGFs 较 HPDLCs 明显; 成脂诱导两种细胞 21 d 时, 可见红色脂肪滴形成, HPDLCs 形成的脂肪颗粒明显少于 HGFs。HGFs 和 HPDLCs 分化培养 7 d 和 14 d 后, 均有 OCN、 Col 1、 RUNX2、 PPARγ2 和 Col 10 的表达, 在 14 d 时的表达均高于 7 d; HPDLCs 中 OCN、 Col 1、 RUNX2 的表达高于 HGFs, PPARγ2、 Col 10 的表达低于 HGFs(均 P< 0.05)。结论 HPDLCs 的成骨能力较 HGFs 强, 成软骨和成脂能力较 HGFs 弱。
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    紫杉醇/NLS-KALA-SA核定位纳米粒对肺腺癌A549细胞株的抑制作用
    吴媛 1, 谷继伟 2, 荆红英 2, 国玉芝 2, 王晶 2, 颜承云 1,2△
    2016, 44 (2):  142-145.  doi: 10.11958/59151
    摘要 ( 1152 )   PDF(627KB) ( 3949 )  
    目的 观察多肽自组装载体载紫杉醇纳米粒 (NKSP) 及紫杉醇单药对肺腺癌 A549 细胞株的体外抑制作用及可能机制。方法 用噻唑蓝(MTT)法分别检测不同浓度组 NKSP(20、 40、 80、 100 μg/L)、 紫杉醇单药(20、 40、 80、 100 μg/L)作用 24、 48 及 72 h 对 A549 细胞增殖的影响。流式细胞仪检测不加任何药物处理(A)组、 加入 80 μg/L 的多肽自组装纳米粒(NKS)培养液(B)组、 加入 80 μg/L 紫杉醇单药(C)组、 加入含 80 μg/L NKSP(D)组作用 A549 细胞 48 h 及 72 h 时的细胞凋亡率。Western blot 检测 A、 B、 C、 D 组作用 48 h 及 72 h 细胞凋亡相关蛋白 bax、 caspase-3 的表达。结果 紫杉醇单药、 NKSP 均能抑制 A549 的增殖, 紫杉醇单药各组 48 和 72 h 时、 NKSP 单药各组在 72 h 时随浓度递增抑制率也呈递增趋势 (均 P < 0.05)。48 h 时 D 组促 A549 凋亡作用低于 C 组(P < 0.05), 72 h 强于 C 组(P < 0.05), 且药物作用 48 h 时 D 组的 bax、 caspase-3 的表达低于 C 组, 而 72 h 时高于 C 组(P < 0.05)。结论 NKS 包裹紫杉醇后可促使载体内的紫杉醇缓慢释放, 与紫杉醇单药相比, 可降低细胞毒性, 延长抗肿瘤作用时间。
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    血清淀粉样蛋白A诱导中性粒细胞胞外诱捕网形成
    苏慧慧 1, 万春友 2, 魏蔚 3, 孟海妹 1, 焦亚冲 1, 邢冬红 1, 郑芳 1△
    2016, 44 (2):  146-148.  doi: 10.11958/20150240
    摘要 ( 1234 )   PDF(364KB) ( 4114 )  
    目的 探究血清淀粉样蛋白 A(SAA)能否在体外诱导中性粒细胞形成中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)。方法 建立稳定的体外诱导 NETs 形成方法, 包括外周血中性粒细胞的分离、 细胞体外培养、 NETs 的诱导和形态学观察。提取健康志愿者的外周血中性粒细胞, 分为阴性对照 (NC) 组、 SAA 组和脂多糖 (LPS) 组, 给予相应的刺激后,观察 NETs 的形成并计算百分率, 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中人组蛋白 3(h3)的含量。结果 提取的外周血中性粒细胞纯度与细胞活力均在 95%以上。显微镜下观察到部分细胞的细胞核失去原有核型, 向外扩散形成网状, 即 NETs。与 NC 组相比, 接受 SAA 刺激的中性粒细胞有更多的 NETs 形成(P < 0.05)。培养液上清中的 h3 含量显著高于 NC 组 (P < 0.05)。结论 SAA 可在体外诱导中性粒细胞形成 NETs。
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    辛二酰苯胺异羟肟酸对人卵巢癌细胞恶性表型的抑制作用
    常兴胜 1, 郑华川 2, 赵爽 2, 勾文峰 2, 杨雪峰 2, 刘晓娟 1△
    2016, 44 (2):  149-154.  doi: 10.11958/58778
    摘要 ( 841 )   PDF(1357KB) ( 3930 )  
    目的 探讨辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对人卵巢癌细胞恶性表型的作用及其可能的分子作用机制。方法 (1)选取 2 组人卵巢癌细胞(SKOV3 和 SKOV3/DDP; HO8910 和 HO8910-PM)后, 设置对照组和终浓度为 1、 3、 5 及 7 μmol/L SAHA 组(SAHA 1~4 组), 采用 CCK-8 法分别检测 SAHA 对细胞增殖的影响。(2) 设置对照组和 SAHA 1、 2 组(2 和 5 μmol/L), Annexin V-FITC/PI 双标记流式细胞术分别检测 SAHA 对细胞凋亡及周期的影响。(3) RT-PCR 和 Western blot 检测 SAHA 1~4 组表型相关蛋白的表达水平。结果 (1)随着 SAHA 浓度的增加, SKOV3 细胞株 SKOV3/DDP 及 HO8910 细胞株 48 h 光密度 (OD) 值均呈逐渐降低趋势(均 P<0.05)。(2) 48 h SAHA 1、 SAHA 2 组凋亡率高于对照组(均 P<0.05); SAHA 作用 48 h, 细胞周期发生阻滞, 与对照组比较, SAHA 1 组和 SAHA 2 组 SKOV3 和 SKOV3/DDP 细胞 S 期和 G2/M 期比例增高, HO8910 和 HO8910-PM 细胞 G0/G1期比例增高(P<0.05)。(3) SAHA 1、 2 组 CyclinB1 和 Cdc2(p34)的 mRNA 表达水平均低于对照组, Caspase-3、 p21 和 p53 的 mRNA 表达水平明显高于对照组(P < 0.05); SAHA 1~4 组 Ac-Histone H3 和 Ac-Histone H4 和 p53 蛋白的表达较对照组明显增强, CyclinB1、 Cdc2 (p34)蛋白的表达减弱。结论 SAHA 通过调节恶性表型相关蛋白 Caspase-3、 p53、 CyclinB1 和 Cdc2(p34)的表达水平, 促进组蛋白乙酰化, 抑制卵巢癌细胞增殖, 阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡。
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    miRNA-7 对食管癌细胞 TE-1 化疗耐药的影响
    温爽 1, 杨晓煜 2, 张敏 1, 褚秀峰 1, 钟根深 3, 姬颖华 1△, 路平 1△
    2016, 44 (2):  155-158.  doi: 10.11958/58919
    摘要 ( 1049 )   PDF(810KB) ( 3998 )  
    目的 探讨微小 RNA-7(miRNA-7)过表达对食管癌细胞 TE-1 顺铂敏感性的影响及其可能机制。方法 用 Lipofectmin 2000 法向食管癌细胞株 TE-1 转染组瞬时转染 miRNA-7 mimic , 向转染对照组瞬时转染 mimic Negative Control, 通过 RT-PCR 检测以上 2 组及空白对照组的 miRNA-7 以及表皮生长因子受体(EGFR)mRNA 表达情况。Western blot 法分别检测转染组与转染对照组总 EGFR 及细胞浆、 细胞核内的 EGFR 蛋白表达。CCK-8 检测转染组与转染对照组 TE-1 的顺铂半数抑制浓度 (IC50)。免疫荧光共聚焦显微镜观察转染组与转染对照组 EGFR 的表达。结果 转染组较转染对照组及空白对照组的 miRNA-7 表达显著增高, EGFR mRNA 表达下降(均 P< 0.001); 转染组较转染对照组总 EGFR 降低, 核内 EGFR 增高(均 P<0.01), 胞浆 EGFR 表达降低(P<0.05); CCK-8 结果显示, TE-1 中 miRNA-7 过表达后顺铂(48 h) IC50较转染对照组增高(P<0.01); 免疫荧光示转染组较转染对照组核内 EGFR 增高且胞膜与胞浆 EGFR 表达减少。结论 食管癌细胞 TE-1 中 miRNA-7 过表达可通过 EGFR 核转位增多使顺铂产生耐药性。
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    不同浓度七氟醚对人前列腺癌细胞增殖与侵袭能力的影响
    王国武, 李超, 胡啸玲
    2016, 44 (2):  159-161.  doi: 10.11958/58038
    摘要 ( 1060 )   PDF(333KB) ( 5879 )  
    目的 观察不同浓度七氟醚对人前列腺癌 PC3 细胞增殖与侵袭的影响。方法 将 PC3 细胞随机分为 4 组: 对照组、 Treat1 组、 Treat2 组和 Treat3 组。对照组仅通入 O2及 CO2, Treat1~3 组在此基础上经 1.7%、 3.4%、 5.1% 七氟醚分别作用 2、 4、 6 h。MTT 检测各组细胞的增殖能力; Transwell 法检测各组细胞的侵袭能力; Western blot 检测各组细胞中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达水平。结果 与处理前相比, 处理 2、 4 和 6 h 后, 人前列腺癌 PC3 细胞的增殖和侵袭能力均明显增强 (均 P<0.05), 细胞中 HIF-1α的蛋白表达水平明显上调 (P<0.05), 且 Treat3 组> Treat2 组>Treat1 组(P<0.05)。结论 七氟醚可增强人前列腺癌 PC3 细胞的增殖与侵袭能力, 且随着时间和浓度变化细胞的增殖与侵袭能力逐渐增强, 其机制可能与上调 HIF-1α的表达有关。
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    miR-200a靶向调控AP-2γ表达抑制神经母细胞瘤SK-N-AS细胞增殖
    高顺利, 王立忠, 刘海英, 刘丹莉
    2016, 44 (2):  162-165.  doi: 10.11958/56744
    摘要 ( 1259 )   PDF(462KB) ( 3898 )  
    目的 明确 miR-200a 具有靶向调控转录因子活化蛋白 (AP) -2γ表达而抑制神经母细胞瘤细胞增殖的能力, 进一步揭示 miR-200a 抗瘤的分子机制。方法 通过双荧光素酶报告基因分析检测 miR-200a 对 AP-2γ 3′UTR- 荧光素酶活性的影响; 将 miR-200a 模拟物转染神经母细胞瘤细胞, 利用逆转录多聚酶链反应 (RT-PCR) 和蛋白印迹(Western blot) 方法检测 AP-2γ表达水平的改变; 将 AP-2γ shRNA 转染 SK-N-AS 细胞, MTS 细胞增殖活性检测分析干扰 AP-2γ表达对神经母细胞瘤细胞增殖能力的影响; 将 AP-2γ重组质粒与 miR-200a 模拟物共转染神经母细胞瘤细胞, 通过 MTS 检测细胞增殖能力。结果 miR-200a 处理组细胞活性(66.33±5.13)与对照组的(100±0)相比, 细胞增殖受到明显抑制(F=114, P<0.05)。与未转入的相对荧光素酶活性(0.982±0.119)相比, miR-200a 转染明显抑制 AP-2γ的 3′UTR 驱动的荧光素酶活性 (0.624±0.051)。且 miR-200a 模拟物明显降低神经母细胞瘤细胞中 AP-2γ的 mRNA 和蛋白表达水平; 此外, 与对照组相比, shRNA 干扰 AP-2γ表达能明显抑制 SK-N-AS 细胞的增殖(62.5±2.4),它能部分模拟 miR-200a 的抑制增殖能力。最后, 发现过表达 AP-2γ能部分逆转 miR-200a 对 SK-N-AS 细胞的增殖抑制作用 (92.4±1.4)。结论 miR-200a 通过靶向下调 AP-2γ表达而抑制神经母细胞瘤细胞的增殖。
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    实验研究
    慢性铅暴露对大鼠脑组织 XRCC1 mRNA 表达的影响及其与氧化应激的关系
    李炜娟 1,2, 任清风 1,3, 徐群英 1, 张中伟 1, 李伟 1, 冯建高 1, 任晓慧 1, 肖元梅 1?
    2016, 44 (2):  166-169.  doi: 10.11958/20150151
    摘要 ( 939 )   PDF(339KB) ( 3835 )  
    目的 观察饮水铅暴露对大鼠大脑皮质、 小脑、 海马组织中 X 线交错互补修复基因 1(XRCC1)mRNA 表达的影响及其与氧化应激的关系。方法 40 只 SD 大鼠根据体质量按随机区组法分对照组和 4 个铅暴露组: 最低剂量组、 低剂量组、 中剂量组、 高剂量组, 对照组自由饮用去离子水, 4 个铅暴露组分别饮用 100、 200、 400、 800 mg/L 的醋酸铅溶液, 连续染毒 60 d 后取大脑皮质、 小脑和海马。RT-PCR 技术检测脑组织 XRCC1 mRNA 的表达量, 并测定脑组织铅、 过氧化氢酶 (CAT)、 谷胱甘肽 (GSH) 和过氧化氢 (H2O2) 的含量。结果 与对照组比较, 铅暴露组大鼠大脑皮质、 小脑和海马中 XRCC1 mRNA 表达量、 脑铅的含量和 H2O2水平均升高(P<0.05); 而 CAT、 GSH 含量基本低于对照组 (P < 0.05); 相关性分析显示铅暴露组大鼠大脑皮质、 小脑和海马中 XRCC1 mRNA 表达量与脑组织铅含量呈正相关(r 分别为 0.608、 0.438、 0.470, P<0.01), 与 CAT、 GSH 呈负相关 (r 分别为-0.343、 -0.465、 -0.423, -0.383、 -0.489、 -0.366, P<0.05), 与 H2O2 呈正相关(r 分别为 0.455、 0.517、 0.342, P<0.05)。结论 铅可通过诱导细胞氧化应激而影响 XRCC1 mRNA 的表达。
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    饮水铅暴露对大鼠脑组织 APE1 表达的影响及与氧化应激的关系研究
    任清风 1,2, 李炜娟 1,3, 徐群英 1, 张中伟 1, 李伟 1, 冯建高 1, 任晓慧 1, 肖元梅 1?
    2016, 44 (2):  170-173.  doi: 10.11958/20150148
    摘要 ( 697 )   PDF(310KB) ( 3760 )  
    目的 探讨饮水铅暴露对大鼠大脑皮质、 小脑、 海马组织中脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶 1(APE1)表达的影响及其与氧化应激的关系。方法 40 只刚断乳雄性 SD 大鼠按体质量随机区组法均分为 5 组, 对照组自由饮用去离子水, 4 个铅暴露组分别饮用 100、 200、 400 和 800 mg/L 醋酸铅溶液, 连续染毒 60 d 后, 取大脑皮质、 小脑和海马组织, 测定各组的超氧化物歧化酶 (SOD) 活力、 过氧化氢 (H2O2) 水平和丙二醛 (MDA) 含量, 蛋白印迹法检测 APE1 蛋白在各组织中的表达。结果 铅暴露后, 大脑皮质、 小脑、 海马中 APE1 蛋白表达水平均低于对照组, 且随染铅剂量的升高呈逐渐下降趋势(P<0.05); 随着染铅剂量的升高, 大脑皮质、 小脑和海马中的 SOD 活力基本呈下降趋势; 而 H2O2及 MDA 含量随染铅剂量的升高基本呈逐渐升高趋势, 大脑皮质、 小脑和海马组织的 APE1 蛋白表达水平与其 SOD 活力呈正相关(r 分别为 0.619、 0.380、 0.375, P < 0.05) ,而与 H2O2水平和 MDA 含量呈负相关(r 分别为-0.472、 -0.535、 -0.436, -0.514、 -0.486、 -0.316, P < 0.05)。结论 饮水铅暴露可导致大鼠脑组织 APE1 蛋白表达水平改变,且此种改变与铅所致的氧化应激有关。
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    5-Azac 诱导急性移植物抗宿主病免疫低反应的甲基化研究
    张晓宁, 赵玉霞, 王建海, 苗绪红, 李克秋, 李光△
    2016, 44 (2):  173-177.  doi: 10.11958/20150153
    摘要 ( 954 )   PDF(630KB) ( 4197 )  
    目的 建立小鼠急性移植物抗宿主病 (aGVHD) 模型, 检测 DNA 甲基化转移酶抑制剂 5-氮杂胞苷 (5-aza⁃ cytidine, 5-Azac)诱导 aGVHD 免疫低反应后的甲基化变化, 探讨 5-Azac 对小鼠 aGVHD 的免疫调节作用。方法选择雄性 C57BL/6(H-2b)与雌性 BALB/c(H-2d)小鼠分别作为异基因移植供、 受体建立移植物抗宿主病小鼠模型。 BABL/c 受体按照体质量相近进行配对, 分为移植对照组和 5-Azac 实验组。5-Azac 实验组于移植后 1~7、 14、 21、 28 d 尾静脉注射 5-Azac 0.25 mg/kg(0.3 mL/只); 移植对照组尾静脉注射生理盐水 0.3 mL/只。提取 3 只移植对照组和 3 只 5-Azac 实验组小鼠的外周血 DNA, 分别等量混匀, 采用甲基化 DNA 免疫共沉淀测序 (MeDIP-seq) 的方法检测甲基化变化, 筛选差异甲基化基因, 并对其功能及生物学通路进行分析。结果 5-Azac 实验组小鼠的生存时间延长,排斥反应减弱, 成功诱导移植物抗宿主病免疫低反应状态。2 组小鼠 DNA MeDIP-seq 结果对比显示: 5-Azac 实验组启动子区存在 369 个差异甲基化基因, 其中上调 239 个、 下调 130 个; 外显子区存在 184 个差异甲基化基因, 其中上调 113 个、 下调 71 个。利用 KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes) 数据库对差异甲基化基因分析, 结果显示其主要参与 10 个免疫学信号通路, 其中 TGF-β、 GSK-3β、 SYK、 PI3K、 NFAT、 CD28、 α4β7 与 aGVHD 的发生发展密切相关。结论 5-Azac 可以通过改变基因的甲基化状态有效诱导 aGVHD 的免疫低反应。
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    不同灌注方式对大鼠小体积肝移植生存率的影响
    杨超 1, 张雅敏 2△, 崔子林 2, 刘子荣 1, 史源 2, 沈中阳 2
    2016, 44 (2):  178-181.  doi: 10.11958/20150129
    摘要 ( 683 )   PDF(702KB) ( 3822 )  
    目的 探讨不同的灌注方式对大鼠小体积肝移植生存率的影响。方法 将 156 只 SD 大鼠随机分为经门静脉灌注组(GroupⅠ)和经腹主动脉灌注组(GroupⅡ), 每组 78 只, 供、 受体各 39 只。GroupⅠ与 GroupⅡ在获取供肝后, 切除肝脏的左叶和中叶, 剩余约 30%体积进行移植, 术中记录供体和受体的体质量、 移植肝质量、 温缺血时间、供体手术时间、 冷缺血时间、 无肝期、 肝下下腔静脉阻断时间及受体手术时间相关指标, 比较 2 组大鼠术后 6 h、 1 d、 3 d 和 7 d 的血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平、 病理 HE 染色及 7 d 生存率。结果 2 组术中血清 ALT、 AST 均逐渐下降, 但是 GroupⅠ下降缓慢, 术后 24 h 高于 GroupⅡ(P<0.05)。HE 染色提示 GroupⅠ术后早期肝组织显微结构损伤大, GroupⅠ的 7 d 中位生存期低于 GroupⅡ (Log-rank χ2=4.050, P=0.044)。结论 使用经腹主动脉灌注的方法建立大鼠小体积肝移植模型具有肝脏损伤小、 生存率高的优势。
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    亚低温联合载神经干细胞的纤维蛋白支架对颅脑创伤的修复作用
    廖余平 1,2, 陈翀 1, 李晓红 1, 王景景 1, 陈以胜 1, 张赛 1, 孙洪涛 1△
    2016, 44 (2):  181-184.  doi: 10.11958/58859
    摘要 ( 834 )   PDF(862KB) ( 4080 )  
    目的 研究大鼠颅脑创伤 (TBI) 后原位移植神经干细胞 (NSCs) 治疗的可能性, 探讨载有 NSCs 的纤维蛋白支架及与亚低温(MHT)联合对 TBI 的治疗作用。方法 从孕 14 d SD 大鼠皮质组织中分离 NSCs, 与纤维蛋白支架共培养, 应用扫描电镜观察支架及 NSCs 的形态, 并通过免疫荧光检测细胞类型。将 48 只雄性 SD 大鼠随机分成 TBI 组 (A 组)、 TBI+NSC 组 (B 组)、 TBI+MHT 组 (C 组)、 TBI+NSC+MHT 组 (D 组), 每组 12 只。A 组通过液压损伤仪行 TBI 造模; B 组 TBI 后接受 NSCs 移植治疗; C 组 TBI 后接受 MHT 治疗; D 组 TBI 后接受 NSCs 与 MHT 联合治疗。分别在第 14、 28 天通过神经功能缺陷评分 (mNSS) 和水迷宫实验对大鼠进行神经功能评价; 28 d 后取脑组织切片, 行细胞免疫荧光检测, 观察移植后的 NSCs 在体内分化情况。结果 电镜扫描显示, NSCs 与纤维蛋白支架共培养 3 d 后形态无明显改变; 免疫荧光提示 NSCs 特异性标志物 Nestin 阳性表达, 表明神经干细胞在纤维蛋白支架上存活; D 组大鼠的 mNSS 在第 14 天和第 28 天均低于 A、 B、 C 各组; 水迷宫结果显示, D 组大鼠逃避潜伏期短于 A、 B、 C 各组; D 组 28 d 后脑组织取材可追踪到 BrdU 标记的神经干细胞分化为了神经元。结论 纤维蛋白支架与 NSCs 生物相容性良好, 具有可降解性。亚低温与载 NSCs 的纤维蛋白支架对大鼠 TBI 后的神经功能修复具有协同作用。
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    补肾和脉方治疗动脉粥样硬化炎症的效果及机制探讨
    Abdulai Fallah Tengbeh1, 郝青青 1,2, 陈旭 1, 曹新冉 1, 王莹 1, 徐飞飞 1, 董波 1,2△, 杨传华 3
    2016, 44 (2):  185-187.  doi: 10.11958/59129
    摘要 ( 1491 )   PDF(484KB) ( 3975 )  
    目的 研究补肾和脉方(HMF)对载脂蛋白 E 基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)的治疗效果及可能机制。方法 将 24 只 ApoE-/-小鼠随机分为高脂组、 HMF 组和阿托伐他汀组, 每组 8 只。高脂组给予高脂饲料(0.25%胆固醇和 15%可可脂) 喂养, HMF 组给予高脂饲料+HMF[1.37 g/(kg·d)]喂养, 阿托伐他汀组给予高脂饲料+阿托伐他汀[5 mg/(kg·d)]喂养。8 周后, 戊巴比妥钠(0.8%, 0.05 mL/10 g)腹腔注射麻醉, 取小鼠胸主动脉切片, 行常规 HE 染色观察胸主动脉斑块大小; 行免疫组化染色检测巨噬细胞 CD68、 肿瘤坏死因子 (TNF) -α、 白细胞介素 (IL) -1β 和 IL-8 的表达水平。并采用日本全自动生化分析仪测量小鼠总胆固醇 (TC) 和总三酰甘油 (TG) 水平。结果 HMF 组胸主动脉斑块大小, 胸主动脉斑块内 CD68、 TNF-α、 IL-1β和 IL-8 的表达水平, TC、 TG 水平均明显低于高脂组, 高于阿托伐他汀组 (均 P<0.05)。结论 HMF 具有抗动脉硬化作用, 可抑制 AS 进展, 其机制可能与降低血脂, 减轻斑块炎症细胞浸润, 减少炎症因子分泌有关。
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    槲皮素对痛风性关节炎大鼠的治疗作用及肾功能的影响
    黄敬群 1, 张军勇 2, 李伟中 3, 张亮 1, 高颖 1, 李光 1
    2016, 44 (2):  188-192.  doi: 10.11958/58360
    摘要 ( 1802 )   PDF(1278KB) ( 4574 )  
    目的 探讨槲皮素对急性痛风性关节炎大鼠的治疗作用及其对肾功能的影响。方法 70 只雄性 SD 大鼠随机均分为空白对照组, 模型组, 秋水仙碱组(0.5 mg/kg), 别嘌醇组(20 mg/kg), 槲皮素低、 中、 高剂量组(100、 200、 400 mg/kg)。连续灌胃给药 7 d, 第 5 天采用微晶尿酸钠和次黄嘌呤法制备大鼠急性痛风性关节炎模型。造模前和造模后 2、 6、 12、 24 和 48 h 用缚线法测取右后肢小腿踝关节同一部位周径, 计算肿胀率; 采用比色法、 酶联免疫吸附法等测定大鼠血清中尿酸(UA), β2-微球蛋白(β2-MG), 胱素 C (Cys-C), 尿素(Urea), 肌酐(Cr)含量。脱颈处死大鼠, 取肾脏称质量, 计算肾脏指数。结果 槲皮素、 秋水仙碱、 别嘌醇能够显著抑制痛风性关节炎大鼠踝关节肿胀率; 造模后 8 h, 秋水仙碱、 槲皮素组血清 UA 水平均高于空白对照组和别嘌醇组, 别嘌醇组低于空白对照组; 48 h 后, 除别嘌醇组血清 UA 水平明显低于其余组外, 其余组间差异均无统计学意义。各组比较, 空白对照组β2-MG、 Cys-C 水平最低, 别嘌醇组 Urea、 Cr 水平及肾脏指数均最高 (均 P<0.05)。结论 槲皮素对急性痛风性关节炎大鼠有显著的抗炎作用, 但造模可能导致肾功能不同程度的损害。槲皮素对轻度肾损伤未见明显的保护作用, 别嘌醇给药后加重肾功能损伤。
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    孕期脂多糖刺激对子代大鼠胰岛素抵抗的影响
    黄丛富, 郝雪琴, 邓雯△
    2016, 44 (2):  193-196.  doi: 10.11958/59112
    摘要 ( 1098 )   PDF(321KB) ( 4102 )  
    目的 探讨孕期脂多糖(LPS)对子代成年大鼠胰岛素抵抗的影响。方法 SD 孕鼠 20 只随机分为 2 组,每组 10 只。LPS 组孕期第 8、 10、 12 天腹腔注射 LPS 0.40 mg/kg, 对照组腹腔注射无菌生理盐水 0.5 mL。子鼠 3 月龄时测血糖、 血胰岛素的浓度和瘦素(Leptin)水平, 计算稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(QUICKI)。结果 与对照组相比, 3 月龄 LPS 组子鼠血糖 (mmol/L:7.72±0.42 vs 7.02±0.42)、 血胰岛素 (mIU/L: 8.78± 4.10 vs 1.51±0.27)、 血 Leptin 水平 (μg/L: 3.88±1.40 vs 1.00±0.33)、 HOMA-IR 值 (3.01±1.41 vs 0.47±0.09) 明显高于对照组; LPS 组 QUICKI 值明显低于对照组 (0.57±0.07 vs 0.99±0.08)。结论 孕期 LPS 刺激会引起子代大鼠胰岛素抵抗。
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    心功能不全合并糖尿病大鼠模型的建立与评价
    李田乐 1, 李彤 2△, 胡晓旻 2, 杨帆 2, 汪丽红 3, 杨玲 2
    2016, 44 (2):  196-199.  doi: 10.11958/59135
    摘要 ( 901 )   PDF(676KB) ( 3830 )  
    目的 制备一种高稳定性心功能不全合并糖尿病大鼠模型, 以期方便于临床和实验室研究。方法 取清洁级雄级 Wistar 大鼠 45 只, 随机分为 3 组, A 组 (正常组) 10 只, B 组 (腹主动脉缩窄组) 10 只, C 组 (腹主动脉缩窄合并糖尿病组) 25 只。首先对 B、 C 组大鼠采用腹主动脉缩窄的方法构建心功能不全模型, 缩窄 2 个月后, 将 C 组大鼠随机分为 5 个亚组, C1~5, 分别采用单次腹腔注射 40、 45、 50、 55、 60 mg/kg 链脲佐菌素 (STZ) 的方法诱导心功能不全合并糖尿病大鼠模型。实验过程中动态观察大鼠一般状况及体质量改变, 监测 STZ 注射后 72 h、 4 周大鼠血糖水平,并于 STZ 注射后 1 个月对各组大鼠进行心脏超声及心肌病理改变评价。结果 对比不同剂量, STZ 为 45 mg/kg 时,构建模型稳定性高且成模大鼠一般状况、 血糖水平、 心脏超声、 心肌组织镜下形态学较正常组发生明显变化, 符合心功能不全合并糖尿病改变。结论 采用腹主动脉缩窄 2 个月后腹腔单次注射 45 mg/kg STZ 的方法诱导心功能不全合并糖尿病动物模型, 方法简便可靠, 稳定性高。
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    临床研究
    Ⅳ期维吾尔族 NSCLC 患者 EML4-ALK、 EGFR 基因突变状态及生存分析
    王强 1, 张峤 1, 曹燕珍 2, 陶洁 1, 单莉 1△
    2016, 44 (2):  200-204.  doi: 10.11958/58911
    摘要 ( 1253 )   PDF(532KB) ( 4287 )  
    目的 探讨棘皮动物微管样蛋白 4-间变淋巴瘤激酶 (EML4-ALK) 和表皮生长因子受体 (EGFR) 基因突变状态与未经系统酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)治疗的Ⅳ期维吾尔族非小细胞肺癌(NSCLC)患者长期生存的关系。方法 收集 97 例未经 TKIs 治疗的Ⅳ期维吾尔族 NSCLC 患者的组织标本, 分别运用 FISH 及 ARMS 方法检测 EML4- ALK 基因融合及 EGFR 基因突变状态并进行生存分析。结果 97 例Ⅳ期维吾尔族 NSCLC 组织中, 6 例 (6.2%) 存在 EML4-ALK 基因融合, 26 例(26.8%)存在 EGFR 基因突变。生存分析显示,EML4-ALK 基因融合患者与 EML4- ALK 基因未融合患者总生存期(OS)差异无统计学意义(P=0.941), EGFR 基因突变患者与 EGFR 野生型患者 OS 比较差异无统计学意义 (P=0.607)。EGFR/EML4-ALK 综合突变对Ⅳ期维吾尔族 NSCLC 患者长期生存发现, EGFR 突变型组、 EML4-ALK 阳性组、 EML4-ALK 阴性+EGFR 野生型组患者中位 OS 分别为 17.7、 17.3、 16.2 个月, 差异无统计学意义(P=0.915)。结论 在排除 TKIs 治疗影响的情况下, EML4-ALK 融合基因与 EGFR 基因突变状态尚不能作为评估Ⅳ期维吾尔族 NSCLC 患者预后的独立因素。
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    不同年龄保乳治疗的乳腺癌患者临床病理特征及 预后分析
    穆兰, 肖盟, 刘伟色, 刘苗, 王欣△
    2016, 44 (2):  205-209.  doi: 10.11958/20150088
    摘要 ( 1092 )   PDF(433KB) ( 4213 )  
    目的 分析不同年龄保乳治疗的乳腺癌患者临床病理特征及预后。方法 回顾性分析 1997 年 10 月— 2010 年 5 月天津医科大学肿瘤医院收治的 827 例行保乳治疗的乳腺癌患者的临床资料, 根据诊断乳腺癌时年龄不同分 3 组, 比较 3 组患者临床病理特征及生存情况。结果 827 例患者中, ≤35 岁组 129 例、 36~54 岁组 530 例、 ≥55 岁组 168 例。≤35 岁组患者中淋巴结转移数≥4 的患者比例较大, 且激素受体阴性率也较高。≤35 岁组、 36~54 岁组、 ≥55 岁组 5 年无局部复发生存率分别为 86.0%、 93.6%、 94.0%(P < 0.01), 5 年无远处转移生存率分别为 88.4%、 91.3%、 94.6% (P > 0.05), 5 年总生存率分别为 91.5%、 94.3%、 95.2% (P > 0.05)。多因素分析显示, 年龄≤35 岁组的患者 5 年局部复发风险较 36~54 岁组及≥55 岁组患者显著增高, 5 年远处转移风险高于≥55 岁组的患者 (P < 0.05), 但 5 年死亡风险并未增加 (P > 0.05)。结论 ≤35 岁乳腺癌患者保乳术后 5 年局部复发及远处转移风险较高, 5 年死亡风险并未增加, 仍可接受保乳治疗。
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    Wnt2 与 Dvl 蛋白在食管鳞癌组织中的表达及临床意义
    王勇涛, 王洪江△, 王兴名, 冯雪
    2016, 44 (2):  210-212.  doi: 10.11958/20150007
    摘要 ( 1239 )   PDF(295KB) ( 3924 )  
    目的 检测 Wnt2 与散乱(Dvl)蛋白在食管鳞癌组织中的表达情况, 探讨其与食管鳞癌发生发展的关系。方法 采用 Western blot 法分别检测 Wnt2、 Dvl 蛋白在 60 例食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中的表达, 并分析其与临床病理特征之间的关系。结果 Wnt2 和 Dvl 蛋白在食管鳞癌组织中的相对表达量 (0.512±0.406 和 1.218±1.082)高于癌旁食管组织 (0.153±0.189 和 0.505±0.358), 且 Wnt2 及 Dvl 蛋白表达在不同浸润深度、 TNM 分期及淋巴结转移情况中存在差异(P<0.01); Wnt2 与 Dvl 蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈正相关(r=0.718, P<0.01)。结论 Wnt2、 Dvl 蛋白的高表达通过 Wnt2 信号转导通路协同促进食管鳞癌的发生、 发展及浸润转移。
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    NB09 方案治疗 4 期神经母细胞瘤患儿效果分析
    钟本富, 赵强△, 闫杰, 王景福, 李璋琳, 曹嫣娜, 李杰, 李忠元, 王会娟
    2016, 44 (2):  213-217.  doi: 10.11958/59060
    摘要 ( 1236 )   PDF(366KB) ( 4535 )  
    目的 探讨 4 期神经母细胞瘤(NB)患儿的综合治疗效果及预后。方法 回顾性分析 95 例 4 期 NB 患儿, 根据患儿接受的治疗方案, 比较 NB09 方案及非 NB09 方案的疗效差别, 并分析影响 4 期患儿预后的相关因素。全组患儿中位年龄 48 个月(4~136 个月), 中位随访时间 21 个月(4~179 个月), NB09 方案治疗患儿 40 例, 非 NB09 方案治疗 55 例。结果 NB09 组患儿 3 年总生存率 (OS) 及无疾病进展生存率 (PFS) 情况均明显好于非 NB09 组(χ2分别为 6.916 和 10.025, P<0.05)。对全组患儿预后行单因素分析, 治疗方案、 病理类型、 骨髓受累>20%、 NMYC 扩增、 手术范围、 是否维甲酸诱导、 乳酸脱氢酶 (LDH) >1 000 U/L 及短期疗效达非常好的部分缓解 (VGPR) 为影响全组患儿预后的因素。多因素分析显示, 影响整组患儿预后的独立因素为骨髓受累>20% (P<0.05)。结论 接受了 NB09 方案治疗的 4 期患儿预后较其他患儿好, 骨髓受累>20%的 4 期患儿预后差, 需加强治疗强度。
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    VEGF 和β-HCG 与输卵管妊娠滋养细胞侵入管壁深度的 关联性研究
    王东杰, 吴香, 吴晓梅
    2016, 44 (2):  217-220.  doi: 10.11958/59134
    摘要 ( 960 )   PDF(388KB) ( 3987 )  
    目的 评估输卵管壶腹部妊娠患者滋养细胞浸润输卵管壁深度与血管内皮生长因子 (VEGF) 及β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)血清浓度之间的关联性。方法 选择输卵管壶腹部妊娠且已行患侧输卵管切除术患者 80 例。手术当天检测血清 VEGF 和β-HCG 浓度。血清 VEGF 含量的测定采用 ELISA 法。留取切除的患侧输卵管及妊娠组织, 输卵管肌纤维用 Masson 染色, 滋养细胞用人胎盘催乳素 (HPL) 免疫组织化学染色。依据术后病理结果中滋养细胞浸入输卵管壁的深度, 将 80 例患者分为Ⅰ~Ⅲ期。血清β-HCG 采用双抗体夹心光化学测定法。结果 Ⅰ 期血清 VEGF 和β-HCG 浓度的平均值明显低于Ⅱ期, 而Ⅱ期明显低于Ⅲ期 (P<0.05)。Ⅰ期和Ⅱ期临界值 VEGF 浓度为 308.6 ng/L, 敏感度 100.0%, 特异度 92.6%, Ⅱ期和Ⅲ期临界值 VEGF 浓度为 431.9 ng/L, 敏感度 79.3%, 特异度 79.2%; Ⅰ期和Ⅱ期临界值β-HCG 浓度为 2 509.6 IU/L, 敏感度 91.7%, 特异度 81.5%, Ⅱ期和Ⅲ期临界值β-HCG 浓度为 13 142.6 IU/L, 敏感度 72.4%, 特异度 95.8%。结论 输卵管妊娠患者血清中的 VEGF 和β-HCG 浓度与滋养细胞浸润输卵管壁深度有关, 可作为妊娠滋养细胞浸润输卵管管壁深度组织学分期的评估指标。
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    P-JAK2/P-STAT3 与突变型 p53 蛋白在宫颈病变中的表达及临床意义
    马慧 1, 尹利荣 1△, 王芳 2, 李洪林 2, 单舒 2
    2016, 44 (2):  221-225.  doi: 10.11958/20150047
    摘要 ( 1342 )   PDF(642KB) ( 4079 )  
    目的 探讨宫颈病变中磷酸化 JAK 激酶 2(P-JAK2)、 磷酸化信号转导与转录因子 3(P-STAT3)及突变型 p53 蛋白的表达及其临床意义。方法 选取我科收治的宫颈鳞癌 (SCC 组) 57 例、 低级别上皮内瘤变 (LSIL 组) 36 例、高级别上皮内瘤变 (HSIL 组) 30 例和正常宫颈 (NC 组) 30 例为研究对象, 检测各组高危型人乳头瘤病毒 (HR-HPV)感染情况, 行 HE 染色、 免疫组化检测 P-JAK2、 P-STAT3 及突变型 p53 蛋白表达情况。结果 (1) SCC 组的 HRHPV 感染率、 P-JAK2 阳性表达率高于 HSIL 组、 LSIL 组及 NC 组(P<0.05 )。(2) SCC 组的 P-STAT3、 突变型 p53 阳性表达率高于 LSIL 组、 NC 组(P<0.05 ), 与 HSIL 组比较差异无统计学意义。(3) SCC 组的 P-JAK2 和 P-STAT3 的阳性表达率在不同的 FIGO 分期、 组织分化、 淋巴结转移、 HR-HPV 感染亚组中有明显差异(均 P<0.05); 突变型 p53 的阳性表达率在不同的 FIGO 分期、 HR-HPV 感染亚组中具有显著差异 (P<0.05)。(4) SCC 组中 P-JAK2 与 P-STAT3、突变型 p53 的阳性表达率、 HR-HPV 感染率均呈正相关(P<0.05), P-STAT3 与突变型 p53 的表达率、 HR-HPV 感染率呈正相关(P<0.05); 突变型 p53 表达与 HR-HPV 感染呈正相关(P<0.05)。结论 P-JAK2、 P-STAT3 与突变型 p53 蛋白在 SCC 组中的表达水平高于正常组及上皮内瘤变组, 三者可能与 HR-HPV 感染、 宫颈鳞癌发生、 进展有关。
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    冠状动脉旁路移植术后桥血管病变的 介入治疗及预后分析
    张厚高 1, 高静 2, 刘寅 2△, 孙根义 2
    2016, 44 (2):  226-229.  doi: 10.11958/59155
    摘要 ( 987 )   PDF(348KB) ( 4214 )  
    目的 随访冠状动脉旁路移植术 (CABG) 术后桥血管病变成功行介入治疗患者临床主要不良心血管事件(MACE) 的发生情况, 探讨原位血管介入治疗 (NV-PCI) 和桥血管介入治疗 (graft-PCI) 策略对患者临床预后的影响。方法 选择 312 例 CABG 术后胸痛症状再发并成功行介入治疗的患者, 其中 NV-PCI 组 215 例, graft-PCI 组 97 例,平均随访 34 个月。观察患者院外心源性死亡、 非致死性急性心肌梗死(AMI)及靶血管再次血运重建(TVR)的发生情况。采用多因素 Logistic 回归分析桥血管病变介入治疗后 MACE 发生的危险因素。结果 NV-PCI 组无 MACE 生存率、 无 AMI 生存率及无 TVR 生存率均高于 graft-PCI 组, 差异有统计学意义(P<0.05), 2 组无死亡生存率差异无统计学意义(P>0.05)。多因素 Logistic 回归分析显示, 长桥龄 [OR(95%CI): 1.011(1.002~1.020), P=0.017]、 糖尿病[OR(95%CI): 2.375 (1.414~3.989), P=0.001]及 graft-PCI[OR (95%CI): 1.873 (1.090~3.219), P=0.023]是影响桥血管介入治疗预后的独立危险因素。结论 CABG 术后桥血管病变原位血管介入治疗组临床预后明显优于桥血管介入治疗组; 桥龄、 糖尿病及 graft-PCI 是影响桥血管介入治疗临床预后的独立危险因素。
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    诊断技术
    超声造影在肾脏囊性病变良恶性鉴别中的应用价值
    忻晓洁, 毛怡然, 张晟
    2016, 44 (2):  230-233.  doi: 10.11958/58950
    摘要 ( 1515 )   PDF(503KB) ( 4327 )  
    目的 探讨超声造影在囊性肾癌诊断中的应用价值。方法 选取我院肾脏囊性病变患者 73 例, 分析二维超声及超声造影检查的图像特征, 73 例均行手术治疗并取得病理结果, 对比病理结果评价 2 种方法的诊断价值。结果 囊性肾癌 64 例, 肾囊肿 9 例。二维灰阶及彩色多普勒超声显示囊性肾癌多表现为形状不规则, 壁厚, 内有实性成分或分隔, 并多伴有血流信号; 肾囊肿多表现为形状规则, 内有少许实性成分或纤薄分隔, 无明显血流信号。超声造影显示囊性肾癌造影剂起始时间 (15.13±4.21) s, 达峰时间 (23.42±5.68) s, 消退时间 (28.42±4.27) s; 增强方式表现为快进快退 22 例(34.3%)、 快进慢退 30 例(46.8%)、 慢进快退 2 例(3.2%)、 慢进慢退 4 例(6.3%)、 等进等退 6 例(9.3%); 增强强度呈现高增强 42 例(65.6%)、 等及低增强 22 例(34.4%)。肾囊肿中 3 例未见造影剂充盈, 余 6 例造影剂起始时间(16.67±2.73)s, 达峰时间(25.83±3.06)s, 消退时间(34.17±4.26)s; 增强方式表现为快进快退 1 例(16.7%)、 快进慢退 1 例(16.7%)、 等进等退 4 例(66.6%); 增强强度呈高增强 2 例(33.3%)、 等或低增强 4 例(66.7%)。二维灰阶超声在肾脏囊性病变诊断中的敏感度、 特异度、 阳性预测值、 阴性预测值、 准确度分别为 85.9%、 66.7%、 94.8%、 40.0%、 83.6%, 超声造影为 92.2%、 77.8%、 96.7%、 58.3%、 90.4%。结论 超声造影技术可以作为囊性肾癌诊断及鉴别诊断的一种有效方法。
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    应用研究
    经导管去肾交感神经术治疗高血压性心脏病合并心衰 患者的效果分析
    夏大胜, 卢成志, 王丽
    2016, 44 (2):  234-236.  doi: 10.11958/20150136
    摘要 ( 893 )   PDF(427KB) ( 3821 )  
    目的 评估经导管去肾交感神经术(RDN)治疗高血压性心脏病合并收缩性心衰患者的有效性。方法对 2 例高血压性心脏病合并心衰患者进行 RDN, 于术前及术后 1 年行心脏彩超、 6 分钟步行试验和肾功能、 糖化血红蛋白、 N-末端脑钠肽前体(NT-ProBNP)等检查, 评估治疗效果。结果 2 例患者行 RDN 后, 肾动脉造影显示肾动脉无狭窄及夹层等并发症。1 年后随访, 2 例患者的 6 分钟步行试验结果、 左室射血分数、 NT-proBNP 等心功能指标明显改善, 左心室明显减小。结论 RDN 对高血压性心脏病合并收缩性心衰患者的治疗有效、 可行。
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    双重实时荧光定量 PCR 检测人维生素 D 受体的方法学构建
    喻妙梅, 于洋, 张俊, 姚霜, 潘丽莉, 罗光华△
    2016, 44 (2):  237-240.  doi: 10.11958/59072
    摘要 ( 1006 )   PDF(583KB) ( 4518 )  
    目的 建立单管检测人维生素 D 受体(VDR)及甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因的双重实时荧光定量聚合酶链反应 (dual real-time PCR) 的方法。方法 以 GAPDH 基因为内参, 采用 Primer Premier 5.0 软件设计特异性引物及 TaqMan 探针, 进行 PCR 扩增检测 VDR 基因。将 VDR 及 GAPDH 扩增产物片段纯化后克隆构建成重组质粒, 作为定量检测基因表达的标准品, 并用于分析该方法的灵敏度和重复性。结果 PCR 扩增产物经测序分析证实为 VDR 及 GAPDH 特异性片段; 该方法检测 VDR 与 GAPDH 灵敏度达 40 拷贝/μL; 线性范围为 4.00×101~4.00×105 拷贝/μL; 决定系数 R2分别为 0.998、 0.999; 扩增效率 E 分别为 96.10%、 85.15%; 批内变异系数(CV)分别为 0.09%~ 1.21%、 0.35%~0.88%; 批间 CV 分别为 0.17%~0.51%、 0.51%~2.46%。结论 成功建立了单管检测人 VDR 及 GAPDH 的双重实时荧光定量 PCR 方法, 且该方法特异性好、 灵敏度高、 可快速高通量检测 VDR 的相对表达量, 有效缩短时间, 减小实验误差。
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    药物临床观察
    大蒜素治疗白塞病的效果和安全性评价
    钟建桥 1, 先德海 2
    2016, 44 (2):  241-243.  doi: 10.11958/59156
    摘要 ( 900 )   PDF(315KB) ( 4008 )  
    目的 评价大蒜素对白塞病 (BD) 的治疗效果和安全性的影响。方法 将 38 例主要累及皮肤黏膜和关节的 BD 患者用随机数字表法分为治疗组 (20 例) 和对照组 (18 例), 分别予以大蒜素和安慰剂连续口服 12 周, 随访至 16 周。观察 2 组 BD 患者治疗前后临床症状和实验室检测值的变化, 比较 2 组的治疗效果和不良反应。结果 共有 31 例患者完成试验, 治疗组有效率为 88.89%, 明显高于对照组 (7.69%), 差异有统计学意义; 治疗后治疗组血中白细胞计数(WBC)与治疗前及对照组比较均无明显差异(P > 0.05), 而红细胞沉降率(ESR)和 C 反应蛋白(CRP)水平则较治疗前及对照组显著降低(P < 0.01); 尽管大蒜素有一些不良反应, 但大部分患者能耐受且停药后可消退。结论 大蒜素是治疗 BD 的一种安全有效的药物, 疗效明显优于安慰剂, 值得进一步研究和推广。
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    疏血通治疗慢性肺心病并发阵发性房颤的效果和 安全性观察
    顾剑玲△, 陈思, 徐克雷
    2016, 44 (2):  244-246.  doi: 10.11958/58658
    摘要 ( 964 )   PDF(287KB) ( 4023 )  
    目的 探讨疏血通注射液治疗慢性肺源性心脏病(肺心病)并发阵发性房颤的临床疗效及安全性。方法 将 91 例慢性肺心病并发阵发性房颤患者随机分为治疗组 45 例和对照组 46 例, 对照组在常规治疗(吸氧、 祛痰、 平喘) 的基础上给予氯吡格雷 75 mg 口服, 治疗组在对照组基础上加用生理盐水 250 mL+疏血通 6 mL 静脉滴注,均 1 次/d, 应用 14 d。检测 48 h 内阵发性房颤转复为窦性心律的时间; 用药 48 h 及 14 d 时阵发性房颤转复窦性心律维持例数; 于治疗前及治疗 14 d 时采用胶体金法检测 D-二聚体(D-Dimer), 并监测肝、 肾功能及药物不良反应。结果 治疗组在 48 h 内阵发性房颤转复为窦性心律的时间与对照组差异无统计学意义(h: 12.62±2.32 vs 13.32± 2.25, t=1.461); 治疗组用药 48 h 及 14 d 时阵发性房颤转复窦性心律维持率分别是 86.67%(39/45)、 82.22%(37/45),均高于对照组的 69.56%(32/46)、 60.87%(28/46)。治疗 14 d 时, 治疗组 D-Dimer[(2.05±0.34)mg/L]较治疗前[(2.61± 0.27)mg/L]降低, 且低于对照组[(2.53±0.31)mg/L] (均 P<0.05)。2 组治疗期间均未出现肝、 肾功能异常, 且均未发生不良反应。结论 疏血通注射液联合氯吡格雷口服可防治慢性肺心病患者阵发性房颤的复发, 降低血栓栓塞的风险, 安全有效。
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    综述
    miRNAs 以非细胞自主机制参与肿瘤微环境调节的研究进展
    郭金满, 谭超△, 胡火军, 谭园
    2016, 44 (2):  247-250.  doi: 10.11958/59124
    摘要 ( 1193 )   PDF(333KB) ( 3970 )  
    肿瘤微环境是肿瘤发生发展过程中所处的内环境 , 由多种细胞及细胞外基质组成, 是肿瘤形成、 转移以及耐药的关键因素。对肿瘤微环境的调控将成为治疗肿瘤的靶点之一。MicroRNAs(miRNAs) 是一类 21~25 个核苷酸的非编码单链 RNA, 主要参与基因的表达调控。近年来, 随着非细胞自主抑癌机制的提出, 使 miRNAs 对肿瘤微环境的调控受到了极大关注。本文主要阐述 miRNAs 通过非细胞自主机制对肿瘤微环境的影响, 为对肿瘤微环境的深入研究以及肿瘤治疗提供参考。
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    富氢生理盐水治疗相关疾病机制研究进展
    李波 1,吕国义 1, 于泳浩 2△, 谢克亮 2, 王国林 2
    2016, 44 (2):  250-252.  doi: 10.11958/58912
    摘要 ( 1015 )   PDF(378KB) ( 3724 )  
    氧化应激、 炎症因子、 细胞的凋亡参与多种疾病的发生、 发展。近年来研究发现, 富氢盐水可通过抗氧化 应激反应、 抗炎反应、 抗凋亡作用治疗多种疾病, 如缺血/再灌注引发的重要脏器的损伤、 神经退行性疾病、 脓毒血症、 神经病理性痛、 多器官衰竭等疾病。本文对富氢盐水治疗疾病的相关机制进行综述。
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    嵌合抗原受体 T 细胞治疗原发性肿瘤的优势与研究进展
    张巍 1, 闫丹丹 2, 高莉 2, 邵明亮 1, 闫会敏 1△
    2016, 44 (2):  253-256.  doi: 10.11958/58917
    摘要 ( 837 )   PDF(378KB) ( 4061 )  
    嵌合抗原受体 (Car) T 细胞因不仅具有较强特异性识别肿瘤抗原的特性, 还具有杀伤性、 亲和力高等优点, 因而受到较多的关注。尽管其在抗肿瘤方面发挥了很多优势, 但是仍存在不足之处, 需要进一步优化来提高其临床 应用的安全性。本研究对 Car T 细胞结构及其生物功能、 治疗流程、 应用进展以及应用风险进行综述, 为进一步在临 床开展 Car T 免疫治疗提供参考。
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