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    论著
    小干扰RNA沉默p65基因对人脐静脉内皮细胞再灌注后促炎因子表达的影响
    曾敏,吴智勇,郑茵,何扬利,费毅,刘肖君
    2014, 42 (2):  97-100 . 
    摘要 ( 551 )   PDF(334KB) ( 2671 )  
    目的 通过小干扰RNA (siRNA) 研究沉默p65对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)再灌注损伤后促炎因子表达水平的影响。方法 分为4组对HUVECs进行培养,即正常培养+siRNA阴性对照转染组、缺血再灌注+siRNA阴性对照转染组、正常培养+p65 siRNA转染组和缺血再灌注+p65 siRNA转染组。模拟缺血再灌注通过在模拟缺血培养液中培养HUVECs 30分钟后换正常培养液再培养4小时而实现,siRNA转染则在模拟缺血再灌注培养前48小时对HUVECs转染p65 siRNA或阴性对照siRNA。实时定量PCR和酶联免疫吸附法分别检测p65 siRNA对TNF-α、ICAM-1 mRNA和蛋白表达水平的影响。 结果 模拟缺血再灌注刺激TNF-α、ICAM-1的mRNA和蛋白表达水平显著升高( P < 0.05) 。p65 siRNA转染显著抑制模拟缺血再灌注所诱导的HUVECs的TNF-α、ICAM-1 的mRNA和蛋白表达水平( P < 0.05)。结论 p65 siRNA通过沉默p65,抑制模拟缺血再灌注诱导的TNF-α和ICAM-1表达水平。
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    细胞分裂周期蛋白2启动子报告基因载体的构建与鉴定
    周辉1 ,吴炜2 ,赵明1
    2014, 42 (2):  101-104 . 
    摘要 ( 658 )   PDF(414KB) ( 3144 )  
    摘要 目的:构建细胞分裂周期蛋白2Cdc2 基因启动子荧光素酶报告基因载体 pGL3-Cdc2-promoter,并检测其转录活性。方法:根据 UCSC 软件查找的人基因组 DNA 的 Cdc2 启动子序列并设计两端引物,扩增人基因组 DNA 中的 Cdc2 启动子。用限制性内切酶 ScaⅠ和 XhoⅠ双酶切质粒 pGL3-Basic 和 Cdc2 启动子后,将 Cdc2 基因启动子插入到 pGL3-Basic 报告基因载体上。重组质粒命名为 pGL3-Cdc2-promoter。将其与内参质粒 pRL-SV40 瞬时共转染骨肉瘤细胞 U2OS,检测双荧光素酶活性。结果:成功构建 Cdc2 基因启动子荧光素酶报告基因载体 pGL3-Cdc2-promoter,质粒酶切及测序结果完全正确。瞬时转染实验显示,Cdc2 启动子具有转录活性,pGL3-Cdc2-promoter 的荧光素酶水平约是 pGL3-Basic 的 32 倍。结论:pGL3-Cdc2-promoter 在骨髓瘤细胞 U2OS 细胞中能被转录激活,为进一步将其用于抗肿瘤药物的筛选与评价奠定了基础。
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    天津汉族胎儿D18S53、D18S59和D18S488 3个STR基因座遗传多态性研究
    李晓洲1 ,刘静1 ,史云芳1 ,琚端1 ,李岩,2 ,岳天孚1 ,张颖1
    2014, 42 (2):  105-108 . 
    摘要 ( 707 )   PDF(518KB) ( 3110 )  
    目的:研究天津汉族胎儿18号染色体上D18S53、D18S58和D18S488 3个短串联重复序列(STR)基因座遗传多态性,探讨定量荧光PCR(QF-PCR)结果判定标准,为18-三体综合征(ES)基因诊断和产前基因诊断提供实验依据。方法:收集天津地区64例绒毛和374例羊水样本, QF-PCR扩增STR基因座,4%聚丙烯酰胺凝胶电泳,ABI PRISM 377自动测序仪扫描电泳图,GeneScan软件分析荧光信号定量。根据3个STR基因座的基因型分布进行Hardy-Weinberg(H-W)平衡检验。计算3个STR基因座基因型频率、观察杂合度(Ho)、多态信息量(PIC)、个体识别率(DP)、非父排除率(PE)等群体遗传学数据。结果:D18S53、D18S58和D18S488 3个STR基因座分别检出15、13、15个等位基因,基因型分布均符合H-W平衡定律。3个基因座的Ho分别为0.797、0.847和0.792;PIC分别为0.81、0.75和0.73;PD分别为0.944、0.901和0.881;PE分别为0.593、0.689和0.585。结论:D18S53、D18S58和D18S488 3个STR基因座是18号染色体良好的遗传标记,对ES的产前基因诊断有指导意义。
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    RIP3基因重组质粒构建及其表达对MCF7细胞死亡方式的影响
    路灿,徐惠君,贾勇圣,佟仲生
    2014, 42 (2):  109-112 . 
    摘要 ( 842 )   PDF(605KB) ( 2862 )  
    【摘要】 目的 构建RIP3基因过表达重组质粒,建立稳定过表达RIP3基因的乳腺癌细胞株,并证实融合蛋白在细胞内的表达、定位及对MCF7细胞死亡方式的影响。方法 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测4种乳腺癌细胞及正常乳腺上皮细胞中RIP3 mRNA的表达。以正常乳腺上皮细胞MCF10A cDNA为模板,PCR扩增RIP3基因cDNA全长,将合成的RIP3编码区序列,克隆入mCherry载体的N末端,构建重组质粒mCherry-RIP3,对重组质粒进行酶切鉴定及DNA测序。钙法转染293T细胞,收集病毒感染MCF7细胞,basticidin (4 mg/L)维持筛选,构建稳定表达细胞株。Western blot、荧光显微镜等检测目的基因表达效率及蛋白定位。显微镜下观察TNF-α及zVAD处理下mCherry-RIP3-MCF7细胞的死亡形态及比例。结果 RIP3 mRNA 在乳腺癌细胞中普遍低表达。RIP3基因成功克隆入载体。过表达mCherry-RIP3基因的MCF7细胞可见红色荧光蛋白表达,定位于胞质。Western检测到目的基因RIP3在转染细胞中为过表达。mCherry-RIP3转染后增强MCF7细胞对TNF-α联合z-VAD 诱导的细胞坏死的敏感性。结论 成功构建RIP3基因过表达重组质粒,获得外源性RIP3稳定过表达的乳腺癌MCF7细胞株,mCherry-RIP3定位于胞质,并在TNF-α介导的程序性坏死中起作用。
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    靶向血管平滑肌细胞TLR4基因小干扰RNA载体构建及效果评价
    崔丽1 ,李广平2 ,富华颖2 ,王兴华1 ,焦占全3
    2014, 42 (2):  113-115 . 
    摘要 ( 617 )   PDF(1230KB) ( 2924 )  
    目的:设计合成有效的靶向Toll样受体4(TLR4)基因的小发夹RNA(siRNA)表达载体,并筛选出TLR4沉默的SMC稳定细胞系。方法:通过RNAi序列设计原则,以TLR4基因为靶基因合成3对siRNA寡核苷酸链,经退火、与线性化pSilence 2.1-U6 neo质粒连接,用双酶切及测序进行鉴定。脂质体法转染血管平滑肌细胞,G418加压筛选并收集稳定表达质粒的SMC细胞,RT-PCR及Weston blot法检测TLR4 mRNA和蛋白表达。结果:测序鉴定插入的发夹样序列正确,成功构建TLR4基因RNA干扰表达载体;并获得稳定沉默TLR4的SMC细胞株。RT-PCR及Weston blot证实干扰TLR4后,SMC细胞株中TLR4 mRNA和蛋白表达均明显减低,其中pSilence2.1-siTLR4-1的抑制效果最好。结论:成功构建了能有效抑制TLR4基因的siRNA表达载体及TLR4稳定沉默的SMC细胞系。
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    血清人附睾蛋白4检测对肺癌的诊断意义
    于飞1 ,王倩2 ,钟殿胜2 ,宁超2
    2014, 42 (2):  116-118 . 
    摘要 ( 740 )   PDF(317KB) ( 3040 )  
    目的:探讨血清HE4对肺癌的诊断价值,分析HE4在不同病理类型及TNM分期肺癌患者血清中的表达情况水平。方法:选取47例肺癌患者和31例健康体检者为研究对象,根据病理类型及TNM分期分组,各组血清HE4差异比较采用非参数检验;以病理诊断为金标准,绘制血清HE4、血清CEA诊断肺癌的ROC曲线。结果:肺癌组与健康组血清HE4检测值差异有统计学意义;不同病理分型及不同TNM分期的肺癌患者血清HE4检测值差异无统计学意义;血清HE4诊断肺癌的ROC曲线下面积(AUC)接近1,并且大于血清CEA诊断肺癌的ROC曲线下面积。结论:不同病理类型及TNM分期肺癌患者血清HE4水平无明显差异;血清HE4较CEA诊断肺癌的敏感度及特异度更高;检测患者血清HE4有助于肺癌诊断。
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    联合应用超声弹性成像及彩色多普勒在诊断乳腺癌及评价TNM分期中的价值
    王旭1 ,黄淑华2 ,刘新红1 ,张璋3
    2014, 42 (2):  119-122 . 
    摘要 ( 673 )   PDF(333KB) ( 3108 )  
    目的 拟联合应用超声弹性成像及多普勒技术,对乳腺肿块进行良、恶性鉴别诊断,并评价乳腺癌TNM分期。方法 对58例乳腺肿块进行超声弹性成像和彩色多普勒成像检查,以术后病理结果作为金标准,使用ROC曲线比较直径变化率、最大截面积比、弹性系数评分及彩色多普勒血流评分等超声成像指标诊断乳腺癌的能力。结果 与长、短径变化率相比,最大截面积比对鉴别诊断良、恶性乳腺肿块方面的诊断效能较高(曲线下面积为0.914),联合使用“最大截面积比+弹性系数评分+多普勒血流评分”行鉴别诊断时诊断效能最高(曲线下面积为0.981)。进展期(Ⅱ~Ⅳ期)各种弹性成像指标高于早期(0~Ⅰ期)。随TNM分期增高,弹性系数评分和多普勒血流评分分值增高。结论 超声弹性成像的最大截面积比对鉴别诊断良、恶性乳腺肿块方的诊断效能较高,其与彩色多普勒二者联合能够有助于提高乳腺癌确诊率,对评价乳腺癌的TNM分期有一定提示作用。
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    459例女性健康体检者HPV基因型及高危因素分析
    陈秀杰1 ,李艳玲2 ,曲芃芃2
    2014, 42 (2):  123-126 . 
    摘要 ( 832 )   PDF(310KB) ( 2848 )  
    目的 研究459例女性健康体检者宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染情况、基因型别分布及其高危因素。方法 采用巢式PCR和焦磷酸测序技术检测459例受检者宫颈脱落细胞中HPV分型情况,同时收集受检者一般资料、月经婚育史、生殖道疾病既往史,分析HPV感染的相关危险因素。结果 HPV阳性检出率为17.9%,共检测出7种高危型别,其中HPV16检出率最高(9.8%),其次是HPV58(7.0%),HPV18(5.2%)。单纯感染、双重感染、多重感染的检出率分别是9.6%、4.8%、1.5%。饮酒、经济收入﹤3000元/月、性伴侣﹥1个、性生活频率﹥4次/月、伴有宫颈糜烂是HPV 感染的危险因素(P<0.05)。结论 HPV DNA基因型别检测可为宫颈癌的早期筛查和HPV疫苗的研发使用提供重要信息,为高危人群的早预防、早诊断、早治疗提供重要依据。
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    宫颈病变中hTERT基因扩增与高危型HPV感染的关系
    李洪林1 ,尹利荣2 ,孙俊杰2
    2014, 42 (2):  127-130 . 
    摘要 ( 1009 )   PDF(308KB) ( 2978 )  
    【摘要】 目的 探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因扩增和高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染在宫颈病变中关系。方法 连续入选2012年9月—2013年4月天津医科大学第二医院妇科就诊患者的宫颈脱落细胞标本,应用荧光原位杂交技术(FISH)检测34例正常人,31例宫颈上皮内瘤变(CIN) I 级,33例CIN II 级,34例CIN III 级,20例宫颈癌患者的hTERT基因扩增情况并对上述研究对象进行HPV DNA检测。结果 5组样本中随宫颈病变级别的升高,HR-HPV DNA的阳性率分别为20.59%、54.84%、72.73%、85.29%、90.00%,差异具有统计学意义(?2=41.448,P<0.05),正常组分别与CIN II级、CIN III级、宫颈癌组比较,各组间差异有统计学意义(P<0.005)。5组样本中随着宫颈病变的加重,hTERT基因扩增的阳性率分别为0.00%、3.22%、18.18%、41.18%、80.00%,差异具有统计学意义(?2=57.998,P<0.05),宫颈癌组分别与正常组、CINⅠ级、CIN II级比较,各组间差异有统计学意义(P<0.005)。总样本中所有HR-HPV阳性患者中hTERT基因扩增阳性率为33.68%;而HR-HPV阴性患者中,hTERT基因扩增阳性率为8.77%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05) 。hTERT基因扩增与HR-HPV感染呈正相关( P<0.05,r= 0.2381)。结论 (1)HR-HPV阳性率随着宫颈病变级别升高而增高。(2)hTERT基因扩增阳性率随着宫颈病变级别的加重而增高,故hTERT基因检测可能作为宫颈癌前病变监测的辅助指标,应用于临床早期宫颈病变的诊断中。(3)宫颈病变中hTERT基因扩增与高危型HR-HPV感染呈正相关,提示HR-HPV的感染可能是hTERT基因异常扩增的早期事件。
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    ING4和CDX2在结直肠癌中的表达及其与预后的关系
    刘俊远1 ,黄桂林1 ,李志刚2 ,丛竹军3 ,孙旭凌3 ,祝磊3
    2014, 42 (2):  131-134 . 
    摘要 ( 704 )   PDF(389KB) ( 2762 )  
    【摘要】目的 探讨生长抑制因子4(ING4)和尾型同源盒转录因子2(CDX2)在结直肠癌中的表达及与预后的关系。方法 应用免疫组织化学法检测99例结直肠癌组织和30例癌旁正常组织中ING4、CDX2的表达,结合术后随访资料,分析其表达与临床病理特征及预后的关系。结果 ING4、CDX2在癌组织中表达的阳性率分别是67.7%和72.7%,显著低于癌旁正常组织(p<0.05)。且二者的表达与组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及肿瘤分期密切相关(p<0.05)。ING4阴性者5年生存率(35.5%)明显低于ING4阳性者(77.9%); CDX2阴性者5年生存率(48.1%)明显低于CDX2阳性者(70.8%)。结直肠癌组织中ING4、CDX2表达呈正相关。结论 ING4和CDX2的表达与结直肠癌发生、发展及患者生存率密切相关,联合检测两者的表达对于结直肠癌的临床诊断及预后判断有重要意义。
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    短篇论著
    冠心病患者网膜素-1与高敏C反应蛋白的相关性分析
    刘海亮1 ,张慧霞1 ,张浩2 ,张瑞波1 ,杨丽娟2 ,刘淑婧1
    2014, 42 (2):  135-137 . 
    摘要 ( 608 )   PDF(283KB) ( 2713 )  
    目的 观察冠心病患者网膜素-1(Omentin-1)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平,分析网膜素-1、高敏C反应蛋白与冠心病的相关性。方法 采集68例冠心病患者分为不稳定型心绞痛(UAP)组36例,稳定型心绞痛(SAP)组32例,另选择30例冠状动脉造影结果正常者为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清 Omentin-1水平,采用增强免疫透射比浊法测定血清hs-CRP水平。结果 血清 Omentin-1 在UAP和SAP组中低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血清 hs-CRP在UAP组和SAP组中高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血清 hs-CRP在UAP组与SAP组之间差异有统计学意义(P<0.05),而血清 Omentin-1在UAP组与SAP组之间差异无统计学意义(P>0.05);血清 Omentin-1在单支、双支、三支病变组中均低于对照组(F=22.02,P<0.05),血清 hs-CRP在单支、双支、三支病变组中均高于对照组(F=19.78,P<0.05),但在单支、双支与三支病变组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。经Pearson’s相关分析,血清Omentin-1与hs-CRP的浓度呈显著负相关(r=-0.543,P<0.01)。结论Omentin-1、hs-CRP,与冠心病存在一定的相关性,但并不能反映冠状动脉狭窄程度及范围。
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    子宫内膜异位症盆腔痛患者血清雌二醇与TNF-α变化的研究
    齐之迎1 ,尹利荣2
    2014, 42 (2):  138-140 . 
    摘要 ( 544 )   PDF(329KB) ( 2718 )  
    摘要 目的:探讨子宫内膜异位症盆腔痛患者血清雌二醇及TNF-α的变化及其相关性。方法:应用酶联免疫吸附法(ELISA) 测定113例 Ems盆腔痛患者(轻度疼痛组37例;中度疼痛组41例;重度疼痛组35例) 及30例非内异症患者(对照组)血清雌二醇及TNF-α水平。结果:轻度疼痛患者雌二醇及TNF-α水平与正常组比较差别无统计学意义(P>0.05);而中度及重度疼痛患者雌二醇及TNF-α水平均明显高于轻度疼痛者,且重度疼痛者高于中度疼痛者,差别均具有统计学意义(均P<0.05);在轻度疼痛者中雌二醇与TNF-α水平无相关性(P>0.05);而在中度及重度疼痛者中雌二醇与TNF-α表达水平均呈正相关(均P<0.05)。结论:中度及重度Ems疼痛患者的雌二醇及TNF-α均明显高于正常者及轻度疼痛者,且表达呈正相关,提示较高浓度雌二醇可通过诱导巨噬细胞、释放TNF-α而在慢性盆腔痛中起作用。
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    亚低温联合IABP治疗心脏外科术后低心排的效果研究
    赵晓琪1 ,谷天祥2 ,钱程1
    2014, 42 (2):  141-142 . 
    摘要 ( 771 )   PDF(256KB) ( 2712 )  
    【摘要】 目的 探讨亚低温及IABP联合应用治疗心脏外科术后低心排的治疗价值及其疗效的评价。方法 选择2009年5月~2011年2月期间,于我院心脏外科术后应用大剂量血管活性药物低心排无改善,而采取IABP及亚低温联合治疗的患者12例。监测患者在联合治疗前后CI值、混合血氧饱和度、尿量及肌酐(Cr)的变化。结果 在亚低温及IABP联合应用治疗后,患者的CI值得到明显改善(1.6±0.2 升至 2.4±0.5L/min.m2 ),混合静脉血氧饱和度升高(SvO2:52±5升至65±7%)。尿量明显增加(1.2±0.9升至2.9±1.9ml/kg.h),肌酐明显下降(282±25降至95±10 mmol/L)(P<0.05)。结论 亚低温与IABP联合治疗心脏外科术后低心排,能有效改善循环功能,且操作简单易行。
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    实验研究
    氨基酸构型对多肽纳米纤维体内分布的影响
    徐宏艳1 ,张玉民1 ,杨翠红1 ,刘金剑2 ,褚丽萍2 ,刘鉴峰2 ,宋娜玲1
    2014, 42 (2):  143-147 . 
    摘要 ( 582 )   PDF(829KB) ( 2848 )  
    【摘要】 目的 比较由L构型和D构型氨基酸自组装形成的纳米纤维在体内分布的差异,为不同构型氨基酸自组装纳米多肽的体内应用提供指导。方法 固相合成法合成多肽Nap-GFFYGRGD(L-肽)和Nap-GDFDFDYGRGD(D-肽),利用核磁和质谱对多肽分子进行结构表征。多肽溶液通过煮沸、冷却、自组装形成纳米纤维(L-纤维和D-纤维),透射电镜观察纳米纤维的微观形貌。125I标记多肽分子后,由其自组装形成的纳米纤维通过尾静脉注射入小鼠体内,分别在1、3、6和12 h采血并处死小鼠,取心、肝、脾、肺、肾、胃、大肠、小肠、肌肉、脑等主要器官,用γ计数仪测量其放射性强度。结果 L-肽和D-肽均可自组装形成纳米纤维,纤维直径约为10~20 nm,且两者微观形貌差异无统计学意义。两种纳米纤维在体内的分布差异有统计学意义。D-纤维在注射后1 h的血液浓度为(8.17±0.32)%ID/g,但较迅速地从血液中清除;L-纤维浓度为(5.96±0.30)%ID/g,在注射后6 h基本保持不变。D-纤维主要分布于肝中而L纤维主要分布在胃中。结论 氨基酸构型(D/L)对多肽纳米纤维在体内的分布影响显著,在未来的医学应用中考虑氨基酸构型对体内分布的影响有可能更好地指导多肽纳米纤维的应用。
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    肺气肿合并间歇低氧大鼠模型肝脏的氧化应激及炎症损伤
    刘亚萌1 ,高梦丽1 ,曹洁2 ,冯靖2 ,陈宝元2
    2014, 42 (2):  148-151 . 
    摘要 ( 627 )   PDF(349KB) ( 2753 )  
    目的 建立肺气肿合并睡眠间歇低氧的大鼠模型,并在此基础上探讨该大鼠模型肝脏的氧化应激和炎症损伤。 方法 将60只雄性Wistar 大鼠均分成4组按以下条件连续暴露8周:A组(正常组):正常饲养,不予处理;B组(肺气肿组):常氧状态,每天熏烟2次,30min/次;C组(间歇低氧组):每天于9:00~17:00以5%O2/平衡N230秒和空气90秒交替通气约8h/d;D组(肺气肿合并间歇低氧组):每天熏烟2次,30min/次,于9:00~17:00以5%O2/平衡N230秒和空气90秒交替通气约8h/d。暴露结束后从各组中均随机抽取5只大鼠股动脉取血,测其血气值;采集各组剩余大鼠的肺脏染色后光镜下观察计算平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN);肝脏染色后光镜观察计算肝脏炎症损伤的病理评分,测定肝脏IL-6和TNF-α的水平及SOD、CAT和MDA的水平。 结果 B和D组大鼠肺病理均呈明显肺气肿样改变;B、D组MLI均大于A、C组,B、D组MAN均低A、C组(P <0.05);B、C和D组大鼠的肝脏总的SOD及CAT的活力值均低于A组,且D组明显低于B、C组(P <0.05),B、C和D组大鼠的肝脏的MDA的水平均高于A组,且D组明显高于B、C组( P <0.05)。B、C、D组肝脏IL-6、TNF-α的含量及肝脏炎症损伤病理评分均高于A组,且D组肝脏IL-6、TNF-α的含量及肝脏炎症损伤病理评分明显高于B、C组(P <0.05)。 结论 肺气肿和睡眠间歇低氧在引起肝脏的氧化应激和炎症损伤的进展过程中有协同作用。
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    地塞米松对大鼠骨密度及体成分的影响
    刘思瑶,张劼,黄松,冼晶,罗佐杰,梁敏
    2014, 42 (2):  152-155 . 
    摘要 ( 876 )   PDF(266KB) ( 2881 )  
    目的 探讨不同剂量地塞米松对SD大鼠骨密度(BMD)和体成分的影响。方法 3月龄SD雌性大鼠40只,按地塞米松的剂量分为对照组(生理盐水),低剂量组(1 mg/kg),中剂量组(2.5 mg/kg),高剂量组(5 mg/kg),每组10只,每周2次肌内注射。给药前、给药4周后应用DEXA骨密度仪测定大鼠全身BMD和体成分。结果 对照组体质量随时间逐渐增加,干预1~4周后不同剂量地塞米松干预组体质量均较对照组下降(P<0.01)。干预4周后,对照组总BMD、股骨BMD、总BMC及全身、躯干、腿部脂肪含量均较干预前增加(P<0.01),全身、躯干肌肉含量均较干预前下降(P<0.01);低剂量组、中剂量组大鼠总骨矿含量(BMC)、股骨BMD、腿部肌肉含量、腿部脂肪含量均低于对照组(P<0.05);低剂量组、中剂量组股骨BMD、腿部脂肪含量均低于高剂量组(P<0.05)。结论 每周2次连续4周肌内注射地塞米松,1mg/kg和2.5 mg/kg较5 mg/kg的剂量对SD大鼠股骨BMD及腿部成分的影响更大,可降低SD大鼠股骨BMD、腿部脂肪含量。
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    HIF-1α在间歇低氧合并肺气肿大鼠肝细胞凋亡中的机制研究
    战京燕1 ,陈怀永2 ,吴琦2 ,孙昕2 ,冯靖3 ,李雪2 ,徐龙2 ,包翠萍2
    2014, 42 (2):  156-159 . 
    摘要 ( 599 )   PDF(369KB) ( 2710 )  
    【摘要】 目的 探讨间歇低氧(IH)合并肺气肿对大鼠肝脏低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Bax、Bcl-2表达的影响,以及HIF-1α与Bax、Bcl-2的相关性,进一步探究HIF-1α在肝细胞凋亡中的作用机制。方法 将60只大鼠随机分为4组:正常对照组,正常饲养;IH组,每天9:00-17:00于低氧舱内交替通入30s氮气和90s空气,8h/d;肺气肿组,每天8:00和18:00于熏箱内熏烟,各30min;IH合并肺气肿组,每天8:00和18:00于熏箱内熏烟,各30min,并于9:00-17:00向低氧舱内交替通入30s氮气和90s空气,8h/d,暴露14周后,处死大鼠。采用荧光实时定量(qRT )-PCR法测定肝组织中HIF-1α、Bax、Bcl-2表达水平。结果 IH合并肺气肿组HIF-1α mRNA、Bax mRNA、Bax/Bcl-2水平较正常对照组、IH组、肺气肿组升高(均P<0.05),IH合并肺气肿组Bcl-2 mRNA水平较正常对照组、肺气肿组降低(均P<0.05),较IH组无显著差(P>0.05);HIF-1α与Bax、Bax/Bcl-2呈正相关(r分别为0.732、0.699),与Bcl-2呈负相关(r=-0.705)。结论 IH合并肺气肿可诱导肝细胞HIF-1α mRNA、Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达上调,其上调程度较单纯IH和肺气肿大,HIF-1α与Bax、Bcl-2相关,表明HIF-1α可能通过调控凋亡基因Bax、Bcl-2的表达来参与肝细胞的凋亡。
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    预注射供体凋亡细胞对移植胰岛存活及外周血T淋巴细胞功能的影响
    李双喜1 ,2 ,柳媛1 ,3 ,李宝雷1 ,3 ,杨树1 ,3 ,陈宏2 ,蔡德鸿1 ,2 ,张振2
    2014, 42 (2):  160-163 . 
    摘要 ( 524 )   PDF(391KB) ( 2664 )  
    目的: 研究凋亡细胞对胰岛移植大鼠外周血不同T细胞亚群细胞因子的影响,初步探寻凋亡细胞参与移植免疫耐受的途径和机制。方法: 利用课题组前期实验方法直线加速器照射来获取凋亡细胞。将接受移植的糖尿病大鼠随机分为四组,分别接受:生理盐水注射(A组)、正常细胞注射(B组)、凋亡细胞注射(C组)及坏死细胞注射(D组),各组在注射后1周给予同种异体胰岛移植。在胰岛移植前(即注射干预后1周)、胰岛移植后1周、2周以及排斥后,利用Luminex 100 Integrated System检测各组受体大鼠外周血不同T细胞亚群主要细胞因子IFN-γ、IL-10 的水平,酶联免疫方法测定TGF-β1水平。结果:C组大鼠外周血IFN-γ水平在移植前与其他各组无显著性差异,但在移植后7天、14天则明显低于其他各组 (P<0.050); 而IL-10 、TGF-β1水平在移植前、移植后7天及移植后14天均显著高于其他各组(P<0.050),排斥后这种差异消失。结论: 供体凋亡细胞预输注可使胰岛移植糖尿病大鼠血清IFN-γ明显降低,而显著升高IL-10 、TGF-β1水平,提示凋亡细胞可能通过调节不同T细胞亚群(Th1/Th2、Th3)之间的动态平衡来参与胰岛移植免疫耐受的诱导。
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    大鼠缺血性急性肾损伤对海马CA1区的形态学影响
    朱立志1 ,李郭锦1 ,田鹤2 ,郭敏2
    2014, 42 (2):  164-166 . 
    摘要 ( 627 )   PDF(460KB) ( 2840 )  
    目的 观察大鼠急性缺血性肾损伤对海马CA1区神经元的形态学影响。 方法 成功制造缺血性急性肾损伤大鼠模型后应用光镜电镜技术、免疫组织化学及免疫印迹技术对大鼠缺血性急性肾损伤的海马CA1区进行了观察和分析。结果 肾缺血60 min再灌注24 h后光镜下海马CA1区锥体细胞层出现了固缩性神经元,经电子显微镜观察发现细胞萎缩,基质电子密度增高,细胞核萎缩但无染色质固缩表现,内质网扩张、线粒体肿胀变性。免疫组化染色及免疫印迹结果揭示急性肾损伤的海马caspase-3阴性表达而 PARP-1表达明显增强。结论 大鼠缺血性急性肾损伤可引起海马CA1区锥体细胞层神经元固缩性损伤,既细胞质性死亡,推测这种损伤可能属于PARP-1介导的细胞死亡。
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    双联抗血小板聚集药物致小肠损伤的动物实验研究*
    刘霞1 ,张志广2 ,李熳3 ,张雪莲1
    2014, 42 (2):  167-169 . 
    摘要 ( 590 )   PDF(301KB) ( 2782 )  
       【摘要】 目的 探讨双联抗血小板药物对大鼠小肠损伤的情况及其可能发生的机制。方法 SD大鼠80只,随机分为阴性对照组、阿司匹林组、氯吡格雷组、阿司匹林联合氯吡格雷组(以下简称双抗组),每组20只,分别予生理盐水、阿司匹林(10.41mg/kg.d)、氯吡格雷(7.81mg/kg.d)、阿司匹林联合氯吡格雷灌胃每天一次,共14天。所有大鼠于末次给药后手术,观察小肠损伤情况,取空肠液行细菌培养,EB行小肠通透性检测,按照Chiu CJ方法进行小肠黏膜病理损伤评分(HE染色法)。结果 1.各实验组大鼠小肠黏膜均出现不同程度损伤,病理损伤评分均高于阴性对照组(P<0.05),且以双抗组最高;2.与对照组相比,各实验组大鼠小肠通透性均明显增高(P<0.05),双抗组高于阿司匹林组及氯吡格雷组(130.533±29.631vs90.965±3.765vs66.800±4.853,P=0.000);3.双抗组大鼠空肠液细菌总量较对照组明显增多(61924.805±1751.159vs18154.280±1153.376,P=0.000),肠杆菌与肠球菌比例较对照组明显下降(0.220±0.089vs1.007±0.148,P=0.000)。结论 常规剂量双联抗血小板药物的使用较单一用药造成大鼠小肠损伤程度加重,肠道细菌数量增多,菌群失调、小肠通透性的增高可能参与了小肠黏膜损伤的过程。
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    联合抗氧化剂对间歇低氧诱导小鼠胰腺损伤保护作用的研究
    李光1 ,李昶1 ,侯刚2 ,康健2
    2014, 42 (2):  170-172 . 
    摘要 ( 674 )   PDF(282KB) ( 2639 )  
    【摘要】 目的 探讨抗氧化剂氮氧化物4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶 (tempol)和还原型谷胱甘肽(GSH)对间歇低氧(IH)小鼠胰腺损伤的保护作用。方法 雄性C57BL/6J小鼠50只按随机数字表法随机分成正常对照组(CON)、IH 2周组(IH2w)、IH+tempol 2周组(IH+Tempol)、IH+GSH 2周组(IH+GSH)、IH+tempol+GSH 2周组(IH+Tempol+GSH),每组各10只。成功制备动物模型后,测定各组小鼠胰岛素抵抗水平,胰腺组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH)的含量,及胰腺β细胞的凋亡。结果 IH组较CON组胰岛素抵抗水平显著增加(P<0.01), IH+Tempol+GSH组较IH组显著降低 (P<0.01);IH组较CON组胰腺组织中MDA水平显著增加,SOD和GSH水平显著降低(P<0.01),IH+Tempol+GSH组较IH组MDA水平显著降低、SOD及GSH水平明显增加(P<0.01);IH组较CON组胰腺β细胞凋亡率显著增加 (P<0.01),IH+Tempol+GSH组较IH组显著降低(P<0.01);上述各种指标在IH+Tempol、IH+GSH组与IH组之间无显著差异(P>0.05)。结论 联合抗氧化剂tempol+GSH对IH所致小鼠胰腺损伤具有明显的保护作用,而单独应用抗氧化剂tempol或GSH对IH所致胰腺损伤无明显的保护作用。
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    短篇论著
    浦东新区妊娠期高血压疾病的相关高危因素分析
    吴建发1 ,吴素勤2
    2014, 42 (2):  173-175 . 
    摘要 ( 678 )   PDF(301KB) ( 2911 )  
    目的:分析研究本地区妊娠期高血压疾病的发病状况及相关危险因素,做好一级预防。方法:通过对2009-2012年度与本院诊治的4056例病例资料的回顾性分析研究,探讨本地区妊娠期高血压疾病的患病情况,并通过多因素Logisic非条件归因分析探讨影响本地区妊娠期高血压疾病发病的高危因素。结果:妊娠期高血压疾病的发病率5.18%,其中妊娠期高血压的发病率2.49%,子痫前期-轻度的发病率0.64%,子痫前期-重度的发病率1.85%,子痫发病率0.05%,妊娠合并慢性高血压的发病率0.15%。经多因素Logisic非条件归因分析发现年龄(OR=7.610,95%CI:2.322-24.936)、孕前体重指数(OR=120.715,95%CI:61.867-235.540)、孕期体重增加数(OR=16.219,95%CI6.219-42.316)均为妊娠期高血压疾病的高危因素。结论.本地区妊娠期高血压的发病率5.17%,较我国平均的9.4%低。高龄、孕前体重指数、孕期体重增加数、初产、无产前检查为妊娠期高血压疾病的高危因素,而怀孕次数与妊娠期高血压疾病无关。
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    抗凝专栏
    利伐沙班预防骨科大手术术后深静脉血栓形成的有效性及安全性评价
    陈德强,贾世孔,王泓
    2014, 42 (2):  176-178 . 
    摘要 ( 536 )   PDF(269KB) ( 2804 )  
    【摘要】目的 评估骨科大手术,术后使用利伐沙班(rivaroxaban)或依诺肝素预防预防深静脉血栓形成(deep vein thrombosis DVT)和肺栓塞(pulmonary embolism PE)的有效性安全性。方法 自2009年9月至2012年5月共278例接受骨科大手术患者,其中140例(平均年龄72.7岁,42.8%为男性)患者,口服利伐沙班,每日10毫克,138例(平均年龄69.9岁,39.1%为男性)患者,皮下注射依诺肝素,每日40毫克,将两组对比研究,终点事件包括VTE(深静脉血栓形成和肺栓塞),出现伤口并发症,再度入院,需要输血,大的和次要的出血事件和死亡。结果 VTE的发病率,输血和再入院率,两组间无显著差异,次要出血的发生率分别为(2.1%和5.8%),伤口并发症发生率分别为(2.9%和5.7%),利伐沙班治疗组较低,两组均无肺动脉栓塞、严重出血或死亡患者。结论 利伐沙班和依诺肝素在VTE或严重出血的发生率方面没有显著差异。利伐沙班组在次要出血和伤口并发症方面,略有降低,更为安全。
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    临床论丛
    微骨瓣额中回入路治疗重型脑室出血
    崔永华,夏咏本,张立勇,韩清
    2014, 42 (2):  179-181 . 
    摘要 ( 553 )   PDF(318KB) ( 2757 )  
    【摘要】 目的 探讨微骨瓣额中回入路在重型脑室出血中的应用价值。方法 回顾性分析21例微骨瓣额中回入路治疗重型脑室出血的临床资料。结果 术后脑室内外血肿清除满意,改善了GCS评分、脑室积血Graeb评分。主要并发症:弥漫性脑肿胀1例,脑血管痉挛3例,颅内感染1例,肺部感染7例。随访1-6月,按ADL分级 恢复良好5例,中度残疾9例,重度残疾3例,植物生存1例,死亡3例。结论 微骨瓣经额中回入路可有效清除脑室内外血肿,及时解除梗阻性脑积水,减轻继发性脑损害,改善患者的预后。
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    后路减压联合椎间融合治疗腰椎退变性侧凸的临床疗效
    韩生寿1 ,刘海龙2 ,徐卫松2 ,刘斌2
    2014, 42 (2):  181-183 . 
    摘要 ( 519 )   PDF(501KB) ( 2680 )  
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    男性肝硬化代偿期患者拉米夫定治疗后性激素的变化
    潘永平,邱梦标,毛红霞,樊晓慧
    2014, 42 (2):  184-185 . 
    摘要 ( 525 )   PDF(254KB) ( 2811 )  
    目的:探讨拉米夫定治疗男性代偿期乙肝肝硬化患者过程中性激素的变化及其意义。方法:选择代偿期乙肝肝硬化男性患者46例为病例组,同时选择20例健康男性为对照组。比较两组人群的性激素水平差异。之后病例组给以拉米夫定抗病毒治疗24周,比较治疗前后的性激素水平差异。根据24周的应答情况,分为两组(完全应答组和非完全应答组),比较两组患者治疗后的性激素水平差异。结果:1.男性代偿期乙肝肝硬化患者与健康男性比较,泌乳素(PRL)水平明显升高,睾酮(T)、雌二醇(E2)水平明显降低。2.拉米夫定抗病毒治疗后男性代偿期乙肝肝硬化泌乳素较治疗前明显下降,睾酮、雌二醇水平明显升高。3. 治疗后完全应答组和非完全应答组泌乳素、睾酮、雌二醇水平有显著性差异。结论:1.男性代偿期乙肝肝硬化患者存在性激素功能紊乱.2. 拉米夫定抗病毒治疗可以改善男性代偿期乙肝肝硬化的性激素功能紊乱。3. 性激素功能紊乱的改善与否与24周时的应答情况有一定关系。
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    儿童卵巢扭转64例诊治体会
    杨宏1 ,董亮2 ,董迎2 ,崔华雷2
    2014, 42 (2):  186-187 . 
    摘要 ( 613 )   PDF(280KB) ( 2968 )  
    【摘要】目的:总结儿童卵巢扭转的早期正确诊断和治疗方法。方法:回顾性分析我院2005年1月至2012年10月间收治的64例卵巢扭转病例,总结其临床表现,并结合B-超检查分析其早期诊断的主要征象。结果:本组中64例病人,7-12岁年龄段为高发年龄,患儿均表现有下腹部绞痛,彩色多普勒超声检查发现在盆腔有不均质肿块,提示早期有卵巢扭转可能。指肛检查检出率达到(45/64)70.3%。所有患者均行腹腔镜手术探查,5例切除卵巢,其余均保守治疗,分别在术后1、3、6月随访病人复查彩色多普勒超声患侧卵巢均与对侧大小一致。结论:儿童卵巢扭转较少见,无特殊临床表现,易致误诊。彩色多普勒超声和指肛检查对卵巢扭转的早期诊断有重要意义,同时积极进行腹腔镜手术探查也是诊断兼治疗的有效措施。
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    综述与讲座
    代谢综合征与精神性疾病共病的研究进展
    雒瑢1 ,刘新轶2 ,田凤石3
    2014, 42 (2):  188-191 . 
    摘要 ( 553 )   PDF(401KB) ( 2730 )  
    代谢综合征是一组以肥胖、糖调节异常、血脂异常和原发性高血压等聚集发病的临床征候群。代谢综合征和精神性疾病相继或伴随发生的现象已日益普遍,临床上称之为共病。流行病学调查显示,精神分裂症和心境障碍是最常见与代谢综合征共同存在的精神性疾病。在代谢综合征的各个组分之中,肥胖尤其是内脏型肥胖与精神性疾病的关系最为密切。精神性疾病与代谢综合征共病的发病机制与下丘脑-垂体轴功能紊乱、不良生活方式和抗精神病药物的应用有关,精神分裂症与代谢综合征伴发的一个重要原因是遗传,而心境障碍和代谢综合征联系的关键因素之一则是炎症。在精神性疾病与代谢综合征共病的诊疗方案中,生活方式干预、心理疏导和合理的药物选择缺一不可。对精神性疾病患者代谢指标的监测和代谢综合征患者心理状况的关注应贯穿在这两大类疾病诊治的全过程之中。
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    短篇与病例报告
    侵袭性双肺多发炎性假瘤一例
    董明1 ,王欣2 ,李昕1 ,韦森1 ,陈军3
    2014, 42 (2):  192-192 . 
    摘要 ( 531 )   PDF(230KB) ( 2806 )  
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