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    细胞与分子生物学
    ZEB2基因 3′UTR区转染对人胃黏膜上皮细胞GES-1 增殖、侵袭、迁移的影响*
    李素丽1 ,周芳1 ,张庆瑜2 ,贾文亮1 ,张安玲1
    2014, 42 (5):  401-405 . 
    摘要 ( 691 )   PDF(550KB) ( 2910 )  

    【摘要】目的探讨E盒结合锌指蛋白(ZEB)2基因3′非翻译区(3′UTR)转染人胃黏膜上皮细胞GES-1后对其增殖、侵袭、迁移的影响。方法将人工合成的ZEB23′UTR质粒及miR-200b micmics采用脂质体Lipofectamine2000转染GES-1细胞。分别设对照组、突变组和ZEB23′UTR组,qRT-PCR检测转染后miR-200a/b/c及ZEB1/ZEB2mRNA的表达。再设对照组、ZEB23′UTR组、ZEB23′UTR+无义序列组和ZEB23′UTR+miR-200b micmics组。Western blot检测转染后ZEB1/ZEB2、基质金属蛋白酶(MMP)-2/9、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达;Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;MTT法检测细胞增殖活性。结果与对照组及突变组相比,转染ZEB23′UTR组miR-200a/b/c的表达均下调,以miR-200b最为明显,ZEB1/ZEB2mRNA及蛋白水平表达上调,其细胞迁移、侵袭、增殖活性均增强(P<0.05)。ZEB23′UTR+miR-200b micmics组较ZEB23′UTR组迁移、侵袭、增殖活性降低。结论 ZEB23′UTR可能通过调控miR-200a/b/c的表达进而影响其对靶基因的转录后调控,增加细胞的侵袭、迁移能力,导致GES-1细胞的恶性转化倾向。

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    TrkB不同亚型对癫痫海马神经元BDNF/TrkB信号通路调控的研究
    吴秋静,潘立平,常伟,宋毅军
    2014, 42 (5):  406-409 . 
    摘要 ( 791 )   PDF(455KB) ( 3018 )  
    目的 脑源性神经营养因子(BDNF)及其酪氨酸激酶B受体(TrkB)与癫痫关系密切,该研究探讨了癫痫神经元中TrkB不同亚型对BDNF/TrkB信号通路的调控。 方法 将14组海马神经元细胞分为钙调蛋白抑制剂(N-Acetyl-L-leucyl-L-leucyl-L-norleucinal,ALLN)组和翻译抑制剂(Anisomycin)组。免疫荧光鉴定海马神经元,无镁液处理制备癫痫模型,电生理鉴定细胞痫样放电,免疫印迹技术检测癫痫模型中TrkB和磷酸化TrkB(p-TrkB)蛋白的表达变化。 结果 细胞培养至第7天时,神经元形态特征明显,形成明显的神经网络,纯度60%-70%。经无镁细胞外液处理3小时后再恢复到正常细胞外液,电生理检测到神经元持续强直高频爆发的“癫痫样”自发性放电。免疫印迹结果显示:1. 正常+BDNF组高于正常组;2. 癫痫+BDNF组高于癫痫组,低于正常+BDNF组;3. 癫痫+ALLN+BDNF组低于癫痫+BDNF组;4. 癫痫+ALLN+BDNF组和癫痫+ALLN组差异无统计学意义;5. 癫痫+Anisomycin+BDNF组高于癫痫+BDNF组和癫痫+Anisomycin组。 结论 BDNF可激活BDNF/TrkB信号通路。癫痫状态下BDNF/TrkB通路处于抑制状态,TrkB.T的上调引起BDNF/TrkB通路的抑制,TrkB.FL表达变化不能活化BDNF/TrkB通路。
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    人结肠癌细胞中CacyBP/SIP核转位差异表达基因的验证
    王安萍1 ,赵盈盈2 ,刘欣2 ,翟惠虹3
    2014, 42 (5):  410-413 . 
    摘要 ( 634 )   PDF(341KB) ( 2740 )  
    [摘要]目的 验证细胞周期PCR芯片筛选出来的差异表达基因;方法 胃泌素刺激的SW480细胞作为实验组,无胃泌素刺激的SW480细胞作为对照组。用Western blot对胃泌素刺激前后的CacyBP/SIP的表达定位进行检测;用实时荧光定量PCR技术对细胞周期PCR芯片筛选出的差异表达基因CDK8和CKS2进行验证。结果 胃泌素刺激前CacyBP/SIP主要表达于细胞质,刺激后可同时表达在细胞质和细胞核;同细胞周期PCR芯片结果一致,基因CDK8和CKS2在实验组的表达量较对照组明显上调(p≤0.05)。结论 胃泌素刺激可使CacyBP/SIP发生核转位;基因芯片筛选出的差异基因大体是可靠的,对筛选出的差异基因可以进行进一步研究。
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    通过乳腺上皮差异表达基因对乳腺癌的早期诊断分析
    魏熙胤,臧凤林
    2014, 42 (5):  414-416 . 
    摘要 ( 588 )   PDF(247KB) ( 2717 )  
    目的 组织学上正常的乳腺上皮组织中存在着一些隐蔽性的异常。对这些异常基因的研究对于乳腺癌的发生和早期诊断有着非常重要的作用。方法 基因芯片技术可以在同一时间 点上检测大量基因的表达水平,从而发现异常表达的基因。本文应用生物信息学的手段以差异表达基因建立乳腺癌早期诊断模型,使用信号通路富集的方法筛选差异 表达基因。结果 其中将KEGG和BIOCARTA通路中富集的基因结合在一起的预测性能最好,随机建立的三个预测模型的差异表达基因个数分别从22缩减到7 个,14个缩减到3个,18个缩减到4个,但是预测精度与使用全部差异表达基因的预测精度保持一致,准确度的平均值均为96.3%。结论 通过这种方法可 以在预测精度不变的情况下简化预测模型,使得该模型更易于应用到临床诊断上,为乳腺癌早期诊断和预防提供了方向。
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    干扰LOX基因对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭及放疗敏感性的影响
    董凯峰
    2014, 42 (5):  417-420 . 
    摘要 ( 848 )   PDF(782KB) ( 3007 )  
    目的 探讨抑制赖氨酰氧化酶(LOX)基因表达对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭及放疗敏感性的影响。方法 转染LOX干扰质粒的 Hep-2细胞株,RT-PCR 检测 LOX mRNA,Western blot检测喉癌Hep-2细胞中LOX蛋白及细胞增殖侵袭相关蛋白Ki-67、PCNA、MMP-2/9的表达情况;MTT法检测不同剂量射线对Hep-2细胞生存率的影响,流式细胞术(FCM)检测 Hep-2 细胞凋亡。结果 转染 LOX干扰质粒后 Hep-2细胞中,LOX蛋白和 mRNA 的表达水平下调;Western blot结果显示转染组细胞LOX、Ki-67、PCNA、MMP-2/9蛋白表达明显低于阴性对照组和空白对照组;同时不同剂量射线对Hep-2细胞生存率影响呈剂量依赖性,转染组细胞转染后联合放疗细胞凋亡率明显高于空白及阴性对照组。结论 LOX干扰可特异下调LOX表达,抑制细胞增殖侵袭,作用机制可能与Ki-67、PCNA、MMP-2/9蛋白表达下调有关,并且可增强放疗敏感性,为临床提供一个新的靶点,提高喉鳞癌治疗效果。
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    1,25(OH)2D3在牙乳头干细胞成骨分化期的作用研究
    孙莲莲
    2014, 42 (5):  421-423 . 
    摘要 ( 580 )   PDF(585KB) ( 2945 )  
    摘要 目的:研究1,25(OH)2D3在牙乳头干细胞向成骨细胞分化过程中的作用角色。方法:分离培养牙乳头干细胞,培养基中添加不同浓度1,25(OH)2D3,MTT法检测细胞生长速度,流式细胞术检测细胞增殖周期变化,western blot方法检测核因子-k B受体活化剂配体(RANKL)、骨保护素(OPG)和维生素D受体(VDR)的蛋白质表达水平;siRNA技术沉默VDR表达后,检测其对RANKL和OPG蛋白质表达的影响。结果:MTT和流式细胞术检测结果显示1,25(OH)2D3对牙乳头干细胞的增殖没有明显作用;western blot结果显示RANKL、OPG和VDR的蛋白质表达与1,25(OH)2D3浓度具有剂量相关性;siRNA沉默VDR表达后,RANKL和OPG的蛋白质表达水平均有不同程度下降。结论:1,25(OH)2D3通过调节VDR水平影响牙乳头干细胞向成骨细胞方向的分化过程。
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    舒尼替尼对人高转移肝癌细胞株MHCC97-H中局部粘着斑激酶表达水平的影响
    张尘玉
    2014, 42 (5):  424-426 . 
    摘要 ( 765 )   PDF(294KB) ( 3017 )  
    目的:探讨舒尼替尼对人高转移肝癌细胞株MHCC97-H的体外杀伤作用,以及对局部粘着斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)表达水平的影响。方法:采用瑞氏吉姆萨法染色观察用药前后肝癌细胞的形态学变化,MTT法检测高转移肝癌细胞株MHCC97-H的增殖抑制,用Western-Blot检测用药前后FAK的蛋白表达。结果:舒尼替尼对肝癌细胞株MHCC97-H有抑制作用,瑞氏吉姆萨法染色200倍光镜下可观察到染色质固缩、胞核碎裂及凋亡小体等典型的凋亡形态。药物作用48h时抑制率最明显,2.5、5、10和20umol/L浓度下抑制率分别为(32.9±1.5)%、(49.2±2.3)%、(63.8±2.8)%和(58.9±3.4)%,各组比较差异均有统计学意义。Western-Blot结果显示经不同浓度舒尼替尼作用48h后,FAK蛋白的表达水平分别降至对照组的85.51%、72.09%,57.61%、62.02%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:舒尼替尼对肝癌细胞株MHCC97-H有抑制及促凋亡作用,并能降低FAK蛋白的表达。
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    实验研究
    间歇低氧合并肺气肿大鼠系统与内皮炎症状态及外周血内皮祖细胞水平研究
    王彦1 ,曹洁1 ,杨庆婵2 ,冯靖1 ,陈宝元1
    2014, 42 (5):  427-430 . 
    摘要 ( 769 )   PDF(621KB) ( 2838 )  
    目的 建立间歇低氧(IH)合并肺气肿重叠综合症(OS)大鼠模型,探讨OS大鼠系统及血管内皮炎症状态并观察外周血内皮祖细胞(EPC)水平的变化。 方法 自制熏箱对大鼠进行16周的熏烟暴露造成大鼠肺气肿,从13周开始,在熏烟暴露同时,通过程控产生预制的间歇低氧/再氧合(IH/ROX)环境对大鼠进行IH暴露4周。60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(A组)、IH组(B组)、肺气肿组(C组)和OS组(D组),暴露结束后分别以ELISA法测定血浆及右颈总动脉内皮细胞中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6水平,Real-time-PCR法检测血管内皮细胞中RhoA mRNA含量,病理标本中测定颈动脉内中膜厚度(IMT)在全层所占比例(C-IMT%),流式细胞仪测定循环血中EPC数量。 结果 D组血浆和血管内皮细胞中TNF-α、IL-6水平以及血管内皮细胞中RhoA mRNA水平、C-IMT%均高于A、B、C组,而EPC数量均低于其它三组(均P < 0.05)。 结论 OS大鼠较单纯IH或单纯肺气肿大鼠系统及内皮损伤更加严重,同时内皮修复能力损伤也更严重,因而增加了心血管疾病风险。
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    细胞与分子生物学
    Syk 参与单增李斯特菌感染中炎症复合体的形成
    刘倩倩,申艳娜,刘运德
    2014, 42 (5):  432-435 . 
    摘要 ( 739 )   PDF(323KB) ( 2930 )  
    【摘要】 目的 本研究旨在探讨单增李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)感染过程中炎症复合体形成的分子机制。方法 LM分别感染syk,P38MAPK以及PI3K抑制剂组小鼠腹腔由来巨噬细胞后,利用ELISA方法检测上清液中IL-18的蛋白水平;免疫荧光观察细胞内炎症复合体的关键蛋白组分ASC的变化情况;western blot检测LM感染巨噬细胞不同时间点syk蛋白激酶的磷酸化水平。结果 LM感染后,syk抑制剂组产生的IL-18蛋白水平与未处理组相比显著降低,而其他抑制剂组产生的IL-18的蛋白水平未明显改变,进而免疫荧光结果又显示syk抑制剂可明显降低胞内ASC-speck的形成个数。syk磷酸化水平在LM感染5min即可被检测到,进一步证实syk参与炎症复合体活化的过程。结论 syk参与调控单增李斯特菌感染过程中炎症复合体的活化。
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    实验研究
    康脑液对局灶性脑缺血再灌注大鼠Pi3kmRNA与AktmRNA的影响
    肖志娟1 ,赵志敏1 ,薛茜1 ,邹玉安1 ,邢立强2
    2014, 42 (5):  436-439 . 
    摘要 ( 649 )   PDF(500KB) ( 2816 )  
    目的:观察康脑液对SD大鼠脑缺血再灌注(I/R)后的治疗效果并研究其对I/R大鼠Pi3kmRNA及AktmRNA的影响。方法:180只雄性SD大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、康脑液高、中、低剂量组和尼莫地平组。药物治疗组分别给予康脑液(24g.kg-1.d-1、12g.kg-1.d-1、6g.kg-1.d-1),尼莫地平(1mg.kg-1d-1),每天灌胃1次,其他组每天给予等量的蒸馏水,给药7天后,除假手术组外,线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉闭塞模型。大鼠缺血2h,于再灌注24h后观察各组神经功能,再灌注12h、24h、48h、72h、168h原位杂交技术观察各组大鼠Pi3kmRNA、AktmRNA表达。结果:与模型组相比,康脑液各剂量组神经功能明显改善,Pi3kmRNA及AktmRNA的表达明显高于模型组,尼莫地平组Pi3kmRNA及AktmRNA的表达也明显高于模型组,但较康脑液高、中剂量组低。结论:康脑液能治疗脑缺血再灌注大鼠,其机制可能是其促进脑缺血再灌注大鼠缺血周围区域Pi3kmRNA及AktmRNA表达,从而实现其对脑组织的保护作用。
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    利莫那班对肝纤维化模型C57小鼠肝组织大麻素受体 1及α-SMA表达的影响
    叶立红
    2014, 42 (5):  440-442 . 
    摘要 ( 757 )   PDF(291KB) ( 2830 )  
    [摘要]目的:研究CB1拮抗剂利莫那班对肝纤维化模型C57小鼠肝组织中大麻素受体1(CB1)及α-SMA的影响,分析利莫那班在肝纤维化进展中的作用机制。方法: 30只C57小鼠随机分为3组,分别为正常对照组、模型对照组及模型利莫那班治疗组,每组10只。采用四氯化碳腹腔注射诱导形成小鼠肝纤维化模型。第6周结束时处死小鼠,留取肝脏组织标本,应用免疫组织化学染色方法检测肝组织中CB1和α-SMA的表达,并进行肝组织纤维化评分(S)。结果: 模型对照组和模型莫那班治疗组肝组织肝纤维化评分、CB1和α-SMA阳性表达量均高显著于正常对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);模型利莫那班治疗组肝组织CB1和α-SMA阳性表达量和纤维化评分较模型对照组均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);各实验组小鼠CB1、α-SMA和S评分相关性分析显示,正常对照组、模型对照组和模型利莫那班治疗组CB1评分、α-SMA评分与S评分相互之间均具有显著相关性(P均<0.05)。结论:肝组织CB1的激活可促进肝纤维化的形成,CB1拮抗剂利莫那班通过抑制CB1表达,进而抑制HSC的增殖和激活,从而起到抗肝纤维化的作用。
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    镁离子对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响 , 镁离子对大鼠血管平滑肌细胞钙化的影响
    白亚玲
    2014, 42 (5):  443-446 . 
    摘要 ( 613 )   PDF(573KB) ( 2809 )  
    目的 探讨不同浓度镁离子对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响。方法 原代培养获取 VSMCs,进行形态学及免疫细胞鉴定,后将VSMCs随机分为阴性对照组、高磷组、镁干预组。阴性对照组采用含10%胎牛血清培养,高磷组采用高磷培养基培养,镁干预组在高磷培养基的基础上分别加入不同浓度氯化镁,使镁离子终浓度分别为1、2、3 mmol/L(镁干预组1~3),刺激7 d后行钙化检测,测定钙含量及碱性磷酸酶(ALP)活性,并行反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内核心结合因子α1(Cbfα1)mRNA的表达。结果 高磷组和镁干预组VSMCs均有钙盐沉积,其钙含量均高于阴性对照组;镁干预组随镁离子浓度增大钙化结节逐渐缩小,除镁干预组1钙含量与高磷组无差异外,镁干预组2和镁干预组3均低于高磷组(均P<0.05)。VSMCs ALP活性和Cbfα1 mRNA的表达除镁干预组3与阴性对照组无差异外,其余组均高于阴性对照组(P<0.05)。镁干预组随镁离子浓度增大,ALP活性和Cbfα1 mRNA的表达水平均逐渐降低,且均低于高磷组(P<0.05)。结论 镁离子可在一定程度上抑制高磷诱导的VSMCs钙化和成骨样转分化,其可能是通过降低VSMCs中Cbfα1的表达来实现的。
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    microRNA-21通过促进成纤维细胞的增殖和分化调节心肌梗死后的心脏重塑
    郭东1 ,张闽红2 ,3 ,肖清萍2 ,3 ,刘建文1
    2014, 42 (5):  447-450 . 
    摘要 ( 775 )   PDF(543KB) ( 2987 )  
    目的 探讨小鼠心肌梗死模型中microRNA-21(miR-21)对心脏成纤维细胞增殖和分化的影响。方法 利用左前降支结扎法构建C57/BL6小鼠心肌梗死模型,以心电图及病理改变作为建模成功的观察指标。采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组心肌组织miR-21的表达。体外实验分为3组:随机对照组、空白对照组和miR-21 mimic组。利用miR-21的模拟物(miR-21 mimic)转染小鼠成纤维细胞,使其在细胞中呈过表达状态,然后标记5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU),通过荧光显微镜观察成纤维细胞的增殖情况,并利用蛋白质印迹技术(Western Blot)检测成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和小鼠Smad同源物7(Smad7)的表达。结果 与假手术组比较,心梗手术组梗死交界区的miR-21的表达量较远端区[(4.839 ±0.705)×10-4 vs(1.620±0.451)×10-4]明显上调(P <0.01)。与随机对照组和空白对照组比较,miR-21 minic组miR-21的表达[(4.839±0.705)×10-4 vs(1.143±0.064)×10-4 vs(1.017±0.201)×10-4]显著上调(P<0.01)。与随机对照组和空白对照组比较,miR-21 minic组成纤维细胞EdU染色阳性率[(27.892±1.645)% vs(12.553±1.227)% vs(13.946±1.550)%]显著增加(P<0.01);同时,miR-21 minic组成纤维细胞Smad7基因的表达明显下调,而α-SMA的表达显著上调。结论 心肌梗死后,上调的miR-21可以通过调节转化生长因子(TGF)-β信号通路中Smad7的表达促进成纤维细胞的增殖和分化,进而调节心梗后的心脏重塑。
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    1,25-二羟维生素D3减轻严重烫伤小鼠应激反应的作用
    刘曼1 ,张明谏2 ,李小兵2 ,刘光晶3 ,王玉亮4 ,张建1 ,刘宁2
    2014, 42 (5):  451-454 . 
    摘要 ( 806 )   PDF(553KB) ( 2798 )  
    目的:探讨1,25-二羟维生素D3对严重烫伤小鼠应激状态下胰岛素抵抗和炎症反应的影响。方法: 130只小鼠随机分为:健康组10只,实验组Ⅰ、实验组Ⅱ、对照组各40只。实验组Ⅰ、实验组Ⅱ和对照组小鼠制成30%全身体表面积(TBSA)Ⅲ°烫伤模型。每隔1日晨8时,实验组Ⅰ小鼠1,25-(0H)2VitD3 1μg?kg-1+0.6mL花生油灌胃;实验组Ⅱ小鼠1,25-(0H)2VitD3 4μg?kg-1+0.6mL花生油灌胃;对照组小鼠0.6mL花生油灌胃。分别于伤后1、3、7、14 天测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FIns)、血清TNF-α浓度和创面组织NF-κB阳性率。结果:(1)实验组Ⅰ、实验组Ⅱ和对照组各时相点胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清TNF-α含量和创面组织NF-κB表达阳性率均数均高于健康组水平。(2)实验组Ⅰ和实验组Ⅱ小鼠伤后同一时相点胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均数均低于对照组水平,且实验组Ⅱ低于实验组Ⅰ(P<0.05);同一组内不同时相点实验小鼠伤后第3天HOMA-IR均数最高,以后逐渐降低(P<0.05)。(3)实验组Ⅰ和实验组Ⅱ小鼠伤后同一时相点血清TNF-α含量、创面组织NF-κB表达阳性率均数均低于对照组水平,且实验组Ⅱ低于实验组Ⅰ(P<0.05);同一组内不同时相点血清TNF-α含量、创面组织NF-κB表达阳性率均数均逐渐降低(P<0.05)。结论:1,25-二羟维生素D3能够减轻严重烫伤小鼠应激状态下胰岛素抵抗作用和炎症反应。
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    MicroRNA-1对大鼠心肌细胞凋亡的影响
    王霁翔1 ,丛洪良2
    2014, 42 (5):  455-457 . 
    摘要 ( 603 )   PDF(430KB) ( 2755 )  
    摘要 目的 探讨microRNA-1(miR-1) 对大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法 应用转染的方法使培养的H9C2大鼠心肌细胞高表达miR-1(miR-1组),荧光定量PCR的方法确定miR-1上调后,采用MTT法和流式细胞术检测各组细胞活力和凋亡情况、用荧光定量PCR和Western Blot的方法检测凋亡抑制因子Bcl-2的mRNA和蛋白表达情况。正常细胞和转染随机合成的miRNA阴性对照片段分别为正常对照组和阴性对照组。结果 与正常对照组相比,阴性对照组各个指标的变化均没有统计学差异。miR-1组的miR-1 mRNA表达水平显著升高,细胞活力下降,凋亡率增加,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平均明显降低。 结论 转染的miR-1 mimic能够上调细胞内的miR-1mRNA表达水平,抑制心肌细胞增殖,促进细胞凋亡。
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    临床研究
    成人隐匿性自身免疫性糖尿病早期C1酯酶抑制物的变化及其临床意义
    秦雯
    2014, 42 (5):  458-461 . 
    摘要 ( 773 )   PDF(350KB) ( 2690 )  
    目的:检测成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者早期血浆中C1酯酶抑制物(SERPING1)的水平,探讨其临床意义。方法:检测LADA组患者SERPING1水平,并与经典1型糖尿病(T1DM)组、2型糖尿病(T2DM)组和健康成人组进行比较。对SERPING1与年龄、病程、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、餐后2小时血糖(2hPG)、空腹C肽(FCP)、餐后2小时C肽(2hCP)、谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)进行相关性分析和多元逐步回归分析。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析SERPING1早期预测LADA的效果。结果:LADA组血浆SERPING1水平明显高于T2DM组和健康成人组(P<0.05); SERPING1与FCP、HbA1c、FPG、2hPG明显相关(P<0.05),与年龄、病程、2hCP等其他指标无明显相关(P>0.05)。FCP可进入回归方程(P<0.05),是血浆SERPING1的主要影响因素。SERPING1预测LADA的ROC曲线下面积提示,单独依靠SERPING1早期预测LADA的精准性不足,而同时联合其他指标检测将大大提高其诊断效能。结论:SERPING1结合其他指标可能成为早期预测LADA的有效工具,帮助临床早期鉴别LADA与T2DM。
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    虾有效致敏组分的提取及在sIgE检测中的初步应用*
    任杰1 ,单立新2 ,陈凯3 ,李韶深4 ,李会强5
    2014, 42 (5):  462-465 . 
    摘要 ( 698 )   PDF(691KB) ( 2949 )  
    目的 通过改善虾类包被抗原质量,提高血清sIgE检测的敏感性。方法 制备中华对虾蛋白溶液,经葡聚糖凝胶层析初步分离大于55KD蛋白组分,经SDS-PAGE技术分析其蛋白组成,采用酶免疫印迹和酶联免疫法初步评价纯化后抗原是否能够提高血清sIgE检测结果的敏感性。结果:葡聚糖凝胶层析法可初步分离>55kD的蛋白组分,其中主要包含10条明显蛋白条带;如以纯化后蛋白作为包被抗原,斑点酶免疫印迹显示,可提高弱阳性血清斑点光密度。同时,两种包被抗原的酶联免疫吸附试验结果显示,虾有效致敏成分作为包被抗原时,92.9%的虾过敏患者血清sIgE检测值升高。结论 采用中华对虾有效致敏原组分作为虾过敏检测抗原,有望提高血清sIgE检测结果的敏感性。
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    终末期肝病评分模型在评价慢性肝衰竭人工肝治疗效果中的应用
    宋立文1 ,李谦1 ,刘欢1 ,李菲1 ,曹武奎2 ,杨积明1
    2014, 42 (5):  466-469 . 
    摘要 ( 680 )   PDF(403KB) ( 3065 )  
    目的 比较终末期肝病模型(MELD)、MELD-Na 模型、iMELD模型评分系统对预测慢性肝功能衰竭患者短期预后的价值。方法 选取159例慢性肝衰竭患者,分为存活组(108 例)和死亡组(51 例),测量并比较2组的总胆红素(TBIL)、血清肌酐(Cr)、凝血酶原时间(PT)、PT 的国际标准化比率(INR)、血清钠(Na+)、MELD、MELD-Na 和iMELD评分值。应用受试者工作特征(ROC)曲线下面积评价MELD、MELD-Na 及iMELD评分对慢性肝衰竭短期预后的预测价值。结果 死亡组的年龄、TBIL、Cr、Na+、INR、MELD、MELD-Na 及iMELD 评分高于存活组,血清Na+水平低于存活组,差异有统计学意义(P < 0.01)。MELD、MELD-Na 和iMELD评分越高,病死率越高。MELD、MELD-Na 及iMELD 评分所得最佳临界值分别为25.8、31.0 和53.5。MELD评分的曲线下面积(AUC)与MELD-Na 评分(Z=0.041,p >0.05)和iMELD 评分(Z=0.700,p >0.05)无统计学差异,MELD-Na 评分的AUC与iMELD 评分(Z=0.655,p>0.05)无统计学差异。结论 MELD、MELD-Na 和iMELD评分均能较好地预测肝衰竭患者经过人工肝联合内科综合治疗后短期临床预后。
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    短篇与病例报告
         侵袭性NK细胞白血病一例报告
    贾垂明,刘志强,梁欢,刘爱春
    2014, 42 (5):  469-469 . 
    摘要 ( 809 )   PDF(342KB) ( 2755 )  
    目的 提高对侵袭性NK细胞白血病的认识,探讨其治疗方法。方法 报告一例我院最近诊断的ANKL及其治疗过程,同时进行文献复习。结果 该病发病率低,进展快,含门冬酰胺酶及甲氨蝶呤化疗方案对其有效。结论 ANKL是一种罕见的独立的白血病,EB病毒感染与其有关,诊断时应结合临床特征,细胞形态学,免疫分型,基因重排等检查。治疗上以联合门冬酰胺酶及(或)甲氨蝶呤方案为主,序贯造血干细胞移植有可能延长患者生存期。
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    儿童系统性红斑狼疮合并银屑病一例报告
    任悰1 ,马继军2 ,胡坚2
    2014, 42 (5):  469-469 . 
    摘要 ( 361 )   PDF(246KB) ( 783 )  
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    临床研究
    椎间孔镜TESSYS技术治疗腰椎间盘突出症
    徐宝山1 ,马信龙2 ,夏群3 ,吉宁3 ,杨强1 ,黄洪超1 ,兰杰1
    2014, 42 (5):  470-472 . 
    摘要 ( 1023 )   PDF(326KB) ( 3301 )  
    目的 探讨椎间孔镜TESSYS技术治疗腰椎间盘突出症的疗效。方法 采用该技术治疗且随访半年以上的腰椎间盘突出症31例,男27例,女4例,年龄18-58岁,平均39岁,病变节段包括L34 2例,L45 21例,L5S1 8例。均采用局部浸润麻醉,在C形臂X光机透视下靶向穿刺至病变节段的椎间孔外侧,环锯逐级扩大椎间孔,经椎间孔安置工作通道至椎管内,镜下显露并摘除突出到椎管内的髓核、椎间隙内松动的髓核,直至神经根和硬膜囊完全松解,切口缝合一针。术后随访6-12个月。结果 均未发生神经损伤等严重并发症,27例顺利摘除突出髓核,并充分显露神经根和硬膜囊。首例患者极外侧椎间盘突出摘除髓核后未充分显露神经根,第2例椎间盘突出行椎间盘内摘除未显露神经根,此2例术后症状均缓解。2例中转全麻椎间盘镜手术,1例为向远侧脱出的巨大突出物取出困难,1例为女性患者不能耐受疼痛。术后1-2天下地活动,患者均感神经根性疼痛明显缓解。术后2周复发突出1例,保守治疗好转。末次随访时VAS腿痛由8.1±1.9降至1.1±0.9,ODI评分自31±8降至3.4±3,根据MacNab评分,优25例,良6例。结论 椎间孔镜TESSYS技术治疗腰椎间盘突出症创伤小、恢复快,效果优良,但存在学习曲线。
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    骨性Ⅲ类错牙合畸形患者拔牙矫治后的软硬组织变化研究
    张红1 ,王建国2 ,张锡忠2 ,魏志强2 ,郭晨3
    2014, 42 (5):  473-476 . 
    摘要 ( 806 )   PDF(452KB) ( 2803 )  
    【摘要】 目的 探讨成人骨性Ⅲ类错牙合畸形患者拔牙矫治后软硬组织变化的相关关系。 方法 应用回顾性研究方法,选取符合纳入标准的34例成人骨性Ⅲ类错牙合畸形患者,对其头颅侧位片进行测量分析,比较骨性Ⅲ类错牙合畸形患者正畸治疗前后相关测量项目的变化。 结果 骨性Ⅲ类错牙合畸形患者经过正畸治疗后,上切牙长轴与前颅底平面交角(U1-SN)(°)减小5.22°,下切牙长轴与下颌平面角交角(L1-MP)(°)减小13.86°,下颌平面角增加1.78°,差异有统计学意义(P<0.01);以SL垂直线为参考线,上颌切牙牙冠突度减小2.41mm,下颌牙冠突度减小6.49mm,差异有统计学意义(P<0.01);上唇突度减小1.34mm,下唇突度减小3.82mm,颌凸角增大3.36°、H角减小2.96°,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),颏部变化无统计学差异;上唇突度的变化与上切牙突度变化有显著相关性,下唇突度的变化与上切牙突度变化、下切牙突度变化均有相关性,且上唇突度变化与下唇突度变化间有相关性。结论 骨性Ⅲ类错牙合畸形患者拔牙矫治后侧貌得到明显改善,软组织与硬组织的变化存在中度相关关系。
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    动态动脉硬化指数的影响因素和对靶器官损害的研究
    陈云1 ,袁如玉2 ,李广平3 ,闫哲慧1
    2014, 42 (5):  477-480 . 
    摘要 ( 939 )   PDF(298KB) ( 2751 )  
    目的 探讨原发性高血压患者动态动脉硬化指数(AASI)的相关因素和对靶器官损害的关系及其临床意义。方法 行24h动态血压(ABPM)监测并计算AASI的原发性高血压患者330例,依据AASI结果分为低AASI组(n=167)及高AASI组(n=163),记录2组患者的一般临床资料、动态血压相关指标、冠状动脉造影结果、左室质量指数(LVMI)、估算肾小球滤过率(eGFR)及踝臂指数(ABI)。结果 高AASI组在年龄(64.91±9.70vs59.12±10.00)、合并糖尿病比例(33.8%vs14.8%)、非杓型血压比例(65.6% vs43.7%)、24 h脉压(PP)(65.27±11.31 vs56.06±10.51)、24 h舒张压标准差(DBPSD)(9.64±2.47 vs8.31±2.31)、冠状动脉病变支数(1.78±1.10 vs1.27±1.07)、LVMI(125.74±29.65 vs107.69±23.23)、外周血管病变(27.3% vs16.4%)大于低AASI组;高AASI组eGFR水平小于低AASI组(85.31±20.31 vs 99.67±17.76)。相关分析显示AASI与冠脉病变数(r=0.235)、LVMI(r=0.168)、外周血管病变(r=0.167)呈正相关,与eGFR(r=-0.187)呈负相关;多元线性回归分析显示年龄、糖尿病、PP、DBPSD、非杓型血压是AASI的预测因素。结论 AASI受年龄、糖尿病、PP、血压变异性及血压杓型的影响,其升高和原发性高血压患者出现心、肾及外周血管疾病有关,有助于临床医生评估高血压患者并发症的发生和发展。
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    结肠镜下金属肠道支架与经肛肠梗阻导管治疗左半结直肠癌急性梗阻的临床研究
    陈震1 ,王西墨2 ,尹注增3 ,4 ,王效民3 ,4
    2014, 42 (5):  481-484 . 
    摘要 ( 750 )   PDF(367KB) ( 2860 )  
    【摘要】目的 探讨结肠镜下金属支架与经肛肠梗阻导管治疗左半结直肠癌急性梗阻的临床疗效。方法 回顾性研究我院2011年8月至2013年12月,符合诊断标准的左半结直肠癌急性梗阻患者共80例,分为支架组和导管组,各40例。两组均在结肠镜并X线辅助下进行,支架组放置金属肠道支架治疗,导管组经肛放置肠梗阻导管治疗。待梗阻消失后(7~10d),患者行一期肿瘤根治性切除并吻合。对比研究两组技术操作、肠梗阻改善情况以及手术治疗效果。结果 两组技术上相比,支架组成功率为87.5%,导管组为97.5%,P>0.05,无统计学差异,且均未出现并发症;但支架组操作时间及费用均明显高于导管组。从梗阻缓解情况相比,两组患者梗阻缓解率分别为100%和95%,P>0.05,但导管组2例患者因梗阻未能缓解,行急症手术治疗。此外,支架组梗阻缓解时间及C反应蛋白差值均优于导管组。梗阻缓解后,两组患者行一期肿瘤根治切除并吻合,均未出现吻合口瘘。并且手术时间、切口感染率和住院时间也无显著差异。结论 上述两种方案均可作为治疗左半结直肠癌急性梗阻的安全有效手段,并能达到一期根治性切除和吻合,降低围手术期并发症发病率。但经肛肠梗阻导管治疗卫生经济学价值更优;而从肠梗阻改善情况角度考虑,选择肠道金属支架在一定程度上优于经肛肠梗阻导管。
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    短篇与病例报告
    1例以全血细胞减少为主要表现的IgG4相关性疾病
    邢健
    2014, 42 (5):  484-484 . 
    摘要 ( 766 )   PDF(229KB) ( 2845 )  
    目的 报告1例以全血细胞减少为主要表现的IgG4相关性疾病,提高对该病的认识。方法 分析我院2013年诊治的IgG4相关性疾病1例,并结合国内外文献,对本病的临床表现,诊断进行分析讨论。结果 患者以血小板减少、口腔出血为突出表现,合并贫血、白细胞减少,血清IgG4异常增高,淋巴结活检可见IgG4阳性浆细胞浸润,糖皮质激素治疗有效。结论 IgG4相关性疾病是一种少见的自身免疫性疾病,可能产生血细胞的自身抗体,引起全血细胞减少。
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    临床研究
    儿童胆汁反流性胃炎与幽门螺杆菌感染的关系
    赵煜1 ,张书红2 ,刘风林1 ,李娟1 ,李妍1
    2014, 42 (5):  485-486 . 
    摘要 ( 722 )   PDF(245KB) ( 2972 )  
    【摘要】目的 探讨儿童胆汁反流性胃炎(BRG)与幽门螺杆菌(HP)感染之间的关系。方法 258例胆汁反流性胃炎患儿为BRG组,1749例无胆汁反流的胃粘膜炎症患儿为对照组,对两组HP感染率做比较性分析;根据病情分级将胆汁反流性胃炎患儿分为3组,各组间HP感染率做比较性分析;根据胆汁反流分度将胆汁反流性胃炎患儿分为3组,各组间HP感染率做比较性分析。结果 BRG组较对照组HP感染率高,结果有统计学意义,BRG组中不同病情分级组间感染率无统计学意义,BRG组中不同胆汁反流分度组间感染率有统计学意义。结论 在儿童患者中Hp感染是BRG的致病因素之一,随胆汁反流程度的加重,HP感染率增高。
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    应用研究
    腭侧微螺钉型种植体支抗治疗上颌前突的临床应用研究
    李孝英1 ,彭诚1 ,郭奕2 ,孙维娥1 ,陈晓英1 ,王东3
    2014, 42 (5):  487-489 . 
    摘要 ( 715 )   PDF(406KB) ( 2963 )  
    【摘要】 目的 观察腭侧微螺钉型种植体支抗在上颌前突治疗中的临床应用。方法:选择上颌前突的拔牙矫正患者22人,矫治设计需强支抗,随机分成研究组和对照组两组,每组11人,患者年龄为18岁-25岁,试验组上颌双侧腭侧应用微螺钉型种植体支抗,对照组用口外弓支抗,对治疗前后利用X线头颅片进行测量,运用统计学方法比较两组治疗前后软硬组织的变化差异。结果 试验组: 治疗后U1-NA、U1 -SN较治疗前减小,U1 -L1较治疗前增大(P<0.05)。对照组:治疗后U1-NA、U1 -SN较治疗前减小, U1 -L1、U6-PtPNS数值较治疗前增大(P<0.01)。试验组U1 -L1数值改变量大于对照组,U6-PtPNS数值该变量小于对照组(P<0.01)。结论 治疗上颌前突患者,上颌需要强支抗时,可应用腭侧微螺钉型种植体支抗。
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    玻璃纤维桩长度和纤维含量对牙体抗折强度的影响
    孙宁宁,殷恺,李玉民
    2014, 42 (5):  490-492 . 
    摘要 ( 735 )   PDF(328KB) ( 3150 )  
      【摘要】 目的 研究玻璃纤维桩长度和纤维含量对牙齿抗折强度的影响,探索进行牙体缺损修复所适宜的玻璃纤维桩长度和纤维含量。方法 选择42颗因正畸拔除完整的下颌前磨牙,随机分为3个 (A、B、C) 实验组。自釉牙骨质界上2mm截冠后行完善的根管治疗,进行桩道预备,桩道深度分别为A组10mm、B组8mm、C组6mm。每一个实验组再各分成2个亚组,A1、B1、 C1组应用纤维含量42%玻璃纤维桩,A2、B2、C2组应用纤维含量75%玻璃纤维桩,进行桩粘接、树脂核塑型及金属冠修复。将所有实验标本制成试件,置于万能材料实验机上进行抗折裂强度测试,记录牙根折断时的瞬间压力值以及试件折断的模式。结果 玻璃纤维桩修复后的牙体抗折强度,A组 (3211.16±378.94) N高于B组(1843.22±359.61) N及C组(1251.82±217.48) N(P< 0.05),B组高于C组(P< 0.05);纤维含量75%玻璃纤维桩(2328.62±827.98) N高于纤维含量42%玻璃纤维桩(1902.17±891.21) N(P< 0.05)。结论 用玻璃纤维桩修复缺损牙体时,在一定范围内,桩的长度越长,牙体抗折强度越大。纤维含量75%玻璃纤维桩修复后牙体抗折强度大于纤维含量42%玻璃纤维桩。
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    切削纯钛嵌体冠修复短冠隐裂磨牙的临床应用
    刘霜,闫卉
    2014, 42 (5):  493-494 . 
    摘要 ( 916 )   PDF(260KB) ( 2912 )  
    目的 评价切削纯钛嵌体冠修复短冠隐裂磨牙的临床效果。方法切削纯钛嵌体冠修复45例经完善根管治疗的短冠隐裂磨牙,并追踪观察3年。结果 42例修复体固位良好、边缘密合、未发现继发龋及牙周病变,咀嚼功能良好,修复成功率达93.3%。结论:切削纯钛嵌体冠有效提高了短冠隐裂磨牙修复时的固位,增强了抗力。
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    4种冲洗方法对弯曲根管玷污层影响的体外研究
    马艳华,殷恺
    2014, 42 (5):  495-497 . 
    摘要 ( 734 )   PDF(374KB) ( 2945 )  
       【摘要】目的 研究有效去除弯曲根管玷污层的冲洗方案。方法 选取40颗近中根管弯曲的下颌第一磨牙,截冠。手用ProTaper根管锉预备近颊根管至F3后,依最终冲洗方法不同随机分为4组,A组:注射器冲洗;B组:#30K锉提拉冲洗;C组:被动超声冲洗(passive ultrasonic irrigation,PUI);D组:#30K锉提拉冲洗+PUI,超声锉位于弯曲起始处冠方0.5 mm内。沿根管近远中向劈开,并在弯曲起始处、弯曲起始处以下2 mm处刻痕,将根管分为三部分,由冠方及根方分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。扫描电镜下观察各部分根管壁玷污层。结果 在各处根管壁,D组均为少量、散在的或者薄的玷污层,分值最低。在Ⅰ、Ⅱ处,D组与C组玷污层评分差异无统计学意义,但均低于A、B组(P<0.05);在Ⅲ处,D组低于A、B、C组,B、C组低于A组(均P<0.05)。 结论 超声锉位于弯曲起始处冠方时,采用与根尖预备大小相同的K锉提拉和PUI能有效去除弯曲根管的玷污层。
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    药物临床观察
    从最新中国高血压指南观察分析大样本门诊处方
    闫鹏丽1 ,2 ,王林3
    2014, 42 (5):  498-501 . 
    摘要 ( 689 )   PDF(315KB) ( 2782 )  
    [摘要] 目的 调查分析天津市某三级甲等医院门诊抗高血压处方,分析其与《中国高血压指南2010》(以下简称指南)的差距与不足,以期提高高血压控制率。方法 回顾性调查天津市某三级甲等医院2012年1-12月门诊高血压电子处方154262例,统计患者常用降压药物及联合用药情况,并根据患者年龄、性别、高血压分级、科室、季节等进行分组统计患者联合用药情况。结果 1.门诊最常用的降压药物为钙离子拮抗剂(52.3%),其后依次为血管紧张素II受体拮抗剂(34.0%),β受体阻滞剂(25.9%),血管紧张素转化酶抑制剂(12.1%),固定复方制剂(11.0%),利尿剂(1.4%)。2.门诊处方联合用药少于单药治疗(43.9% vs 56.1%)并且应用有指南不常规推荐用药方案(大于4.4%)。3.分组分析显示3级高血压联合用药高于2级高血压、1级高血压(44.5% vs 37.7% P<0.01);心内科联合用药高于其他科室(均P<0.01);老年患者较非老年患者更趋向于联合用药(P<0.01);夏季处方数少于春、秋、冬季,且夏季联合用药少于春、秋、冬季(均P<0.01)。结论 门诊抗高血压处方联合用药比例偏低,利尿剂使用不足,用药方案与指南要求存在一定差距,需适当增加利尿剂及联合用药比例。
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    循证医学
    中国人群TGFβ1基因多态性与乙型肝炎肝硬化关系的Meta分析
    薛敏敏1 ,徐忠良2 ,董公明3 ,谢芳1 ,吴佩群1 ,白岚1
    2014, 42 (5):  502-506 . 
    摘要 ( 517 )   PDF(858KB) ( 2775 )  
    目的 探索转化生长因子(Transforming growth factor β1, TGFβ1)基因多态性与我国人群乙型肝炎肝硬化的关系。方法 计算机检索中国生物医学文献数据库、重庆维普中文科技期刊全文数据库,清华CNKI数据库、万方科技期刊全文数据库、Pubmed,检索时间范围为建库到2013年7月。按纳入、排除标准选择TGFβ1基因509位点、869位点基因多态性与乙型肝炎肝硬化关系的病例对照研究。应用RevMan 5.1软件对纳入的研究进行定量分析。结果 共纳入6个病例对照研究。Meta分析结果显示509位点携带T等位基因的乙型肝炎肝硬化的合并OR值为1.02,95%CI为(0.67~1.54),CT和TT基因型者乙型肝炎肝硬化的合并OR值为0.80,95%CI为(0.36~1.78);869位点携带C等位基因的乙型肝炎肝硬化的合并OR值为1.05,95%CI为(0.69~1.62),TC和CC基因型者乙型肝炎肝硬化的合并OR值为0.98,95%CI为(0.48~2.00)。未发现显著发表偏倚。结论 未发现中国人群中TGFβ1 基因多态性与乙型肝炎肝硬化有联系。
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    综述
    前列腺癌超声微泡介导药物及基因治疗研究进展
    刘芸1 ,赵云1 ,刘朝奇2 ,胡兵1
    2014, 42 (5):  507-509 . 
    摘要 ( 628 )   PDF(307KB) ( 2751 )  
    【摘要】前列腺癌是老年男性常见的恶性肿瘤。目前,对于前列腺癌晚期患者而言,基因治疗是其最有效的治疗方式。然而,病毒或非病毒载体多存在安全性低、靶向性差、免疫原性高等缺点。超声微泡造影剂作为一种新型基因载体,具有靶向性高、转染率高、安全性高等特点,为晚期前列腺癌患者的基因治疗带来了新的希望。现就该技术在前列腺癌治疗方面的研究进展做一综述。
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    短篇与病例报告
    大气道、声门真菌病导致呼吸困难一例
    李冠华1 ,张力2 ,贾玮3 ,李月川2
    2014, 42 (5):  511-512 . 
    摘要 ( 535 )   PDF(517KB) ( 2971 )  
    本文报道了1例免疫功能正常,无任何基础疾病的侵袭性气管支气管肺曲霉菌病并声门受累及大气道阻塞的病例。气管支气管曲霉菌病这种侵袭方式通常发生在有严重免疫抑制和长期中性粒细胞减少症的病人。本例患者无任何基础疾病,体液免疫及细胞免疫正常,说明免疫功能正常患者同样可以罹患气道曲霉菌感染。支气管镜在诊断气管支气管曲霉菌病的过程中起到关键的作用。支气管镜检查可以直接观察到气管支气管的粘液栓子及假膜性分泌物和易出血的脆的或溃疡性的支气管粘膜,并且可以获取标本明确诊断,清理气道,迅速解除气道阻塞。在一些病例中,明视病变可能是唯一的诊断线索。真菌除可引起侵袭性感染外,还可引起变态反应性改变。本例患者抗真菌治疗3周后复查胸部CT肺内病变有游走性,考虑有变态反应性曲霉菌病可能,故在抗真菌治疗的同时加用了口服糖皮质激素治疗,患者肺部阴影吸收好转。本例患者仅抗真菌治疗6周,患者痊愈且随访9个月无复发。抗真菌治疗的疗程应个体化,注意鉴别肺部阴影是真菌侵袭还是变态反应所致,应根据患者的免疫功能状态及原发病的转归情况来决定。
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