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    细胞与分子生物学
    PKH26荧光标记牛尾髓核细胞的实验研究
    丁晓明1 ,伍耀宏2 ,杨强3 ,马信龙4 ,张春秋5 ,李秀兰3 ,张扬6 ,徐宝山3
    2014, 42 (9):  849-852 . 
    摘要 ( 632 )   PDF(1244KB) ( 2962 )  
    【摘要】 目的 探讨PKH26荧光标记在牛尾髓核细胞的应用研究。方法 从牛尾椎间盘中分离髓核组织,通过酶消化法获取原代细胞,倒置显微镜下观察,P1代髓核细胞进行番红O、甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色,对P1代髓核细胞进行PKH26荧光染料标记,并对标记后细胞的活性、荧光强度(0、14、28d)及增殖特性进行评估。结果 分离得到的髓核细胞数为1.56±0.35×106/g,倒置显微镜下,原代细胞4d开始贴壁,细胞成群生长,13d铺满瓶底,原代细胞、 P1代细胞均呈类软骨样细胞形态;P1代髓核细胞甲苯胺蓝染色异染、番红O染色和Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色阳性;PKH26标记前后细胞活性均在95%以上,0d、14d、28d呈递减趋势,但28d时细胞仍可以检测出较强的荧光,标记后的细胞生长曲线与标记前的细胞生长曲线差异无统计学意义(P>0.05)。结论 牛尾髓核组织中可以分离出数量满意的髓核细胞,而且具有软骨样细胞的表型,可以用作种子细胞;PKH26标记后的髓核细胞无生物学特性的变化,可以用作髓核细胞体内研究的示踪染料。
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    胱硫醚β-合酶/胱硫醚γ-裂解酶-硫化氢体系小干扰RNA对大鼠正常肝细胞系BRL凋亡的影响
    闫骏1 ,李彦敏2 ,郭雪西1 ,章明放1
    2014, 42 (9):  853-858 . 
    摘要 ( 504 )   PDF(820KB) ( 2793 )  
    目的 探讨内源性胱硫醚 β-合酶(CBS)/胱硫醚 γ-裂解酶(CSE)-硫化氢(H2S)体系在生理状态肝细胞凋亡中的影响。方法 培养大鼠正常肝细胞株BRL。小干扰RNA(siRNA)序列筛选:随机分组为阴性siRNA序列转染组、CBS siRNA序列转染组和CSE siRNA序列转染组,转染时间为48h或24h;siRNA转染后细胞凋亡检测:随机分组为siRNA阴性对照组、溶剂对照组、CBS siRNA组、CSE siRNA组、(CBS+ CSE)siRNA组,作用时间为转染后0、4、8、12、24 h;凋亡机制探讨:随机分组为siRNA阴性对照组、CBS siRNA组、CSE siRNA组、(CBS+ CSE)siRNA组,作用时间为转染后4、8、12、24 h;每组均为4个平行样。RT-PCR、Western blot检测BRL细胞中CBS、CSE的表达,siRNA基因静默CBS、CSE,去蛋白法检测H2S生成,Hoechst荧光染色、流式细胞术检测BRL细胞凋亡,荧光染色检测线粒体膜电位(MMP)变化,Western blot检测胞浆内细胞色素C(Cyt C)和激活型caspase 3蛋白表达变化。结果 BRL细胞株存在CBS、CSE表达。CBS/CSE siRNA转染后,细胞内源性H2S生成降低,细胞凋亡且凋亡率随时间延长而逐渐增加。结论 抑制内源性H2S体系可引起生理状态肝细胞凋亡,机制可能部分涉及凋亡线粒体途径。
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    冬凌草甲素通过下调XIAP增强吉西他滨对胰腺癌SW1990的抑制作用
    周黎明1 ,卜贺启2 ,刘殿雷3 ,金海敏3 ,周蒙滔4
    2014, 42 (9):  859-862 . 
    摘要 ( 573 )   PDF(638KB) ( 2792 )  

     【摘要】目的探讨冬凌草甲素在体外联合吉西他滨对胰腺癌细胞株SW1990抑制作用及其可能机制。方法 不同浓度的冬凌草甲素(0、10、20、40、80、160μmol/L)作用胰腺癌SW1990细胞24、48、72h后,CCK-8法检测胰腺癌细胞株SW1990细胞的增殖作用;冬凌草甲素(40μmol/L)与吉西他滨(20μmol/L)单独及联合处理细胞48h,并设立对照组, CCK-8法检测SW1990细胞的存活率;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况;RTPCR检测SW1990细胞中NF-κB和XIAP基因的表达水平。结果冬凌草甲素对胰腺癌SW1990细胞的增殖抑制作用呈明显的剂量与时间依赖性;与其他各组相比,冬凌草甲素联合吉西他滨组细胞存活率明显降低(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05);另外,联合组明显下调胰腺癌细胞中NF-κB和XIAP表达水平(P<0.05)。结论冬凌草甲素在体外能显著增强吉西他滨对胰腺癌SW1990细胞的抗瘤效果,其机制可能是通过下调NF-κB及其下游XIAP 的表达,进而诱导胰腺癌细胞的凋亡而实现.

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    人胰腺癌细胞SOCS1基因沉默对细胞增殖和干扰素-γ敏感性的影响
    吕清林
    2014, 42 (9):  863-866 . 
    摘要 ( 461 )   PDF(501KB) ( 2774 )  

    【摘要】目的在人胰腺癌细胞中观察细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)沉默对细胞增殖及干扰素-γ (IFN-γ)敏感性的影响,探讨SOCS1作为胰腺癌治疗靶点的可能。方法Western blot及PCR验证SOCS1干扰序列沉默人胰腺癌细胞系PANC1中SOCS1的表达;给予IFN-γ刺激后,采用Western blotting方法观察转录激活因子(STAT)1及磷酸化STAT(pSTAT)1的变化;采用定量PCR的方法观察IFN-γ调节因子1(IRF-1)表达水平变化; MTT法检测胰腺癌细胞对IFN-γ敏感性的变化;细胞计数的方法观察细胞的增殖速度;采用流式细胞术的方法检测细胞周期的变化。结果将SOCS1干扰序列转染PANC1细胞后,SOCS1mRNA及蛋白表达水平均明显下降。沉默 SOCS1表达后,pshSOCS1-PANC1组细胞的IRF-1mRNA水平及pSTAT1蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),IFN-γ 对PANC1细胞的半数抑制浓度(IC50)显著降低(P<0.01);转染72h后PANC1细胞数量较对照组显著减少(P< 0.05);SOCS1表达抑制后PANC1细胞G0/G1期细胞比例明显升高,而S期和G2/M期细胞比例明显减小,与对照组比较差异均有统计学意义。结论SOCS1表达抑制后,人胰腺癌细胞株PANC1的增殖能力下降,并且对IFN-γ的敏感性增强。

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    γH2AX对肺癌放射敏感性的预测效果*
    韩宝林
    2014, 42 (9):  867-869 . 
    摘要 ( 662 )   PDF(338KB) ( 2805 )  

    【摘要】目的 探讨人肺癌细胞受照后γH2AX表达量变化与肺癌细胞放射敏感性之间的关系。方法 选择肺腺癌A549和小细胞肺癌SBC-3细胞株,采用细胞克隆形成实验检测经不同剂量(0、2、4、6、8、10Gy)照射后A549 和SBC-3细胞的克隆形成率,并绘制细胞生存曲线;应用Western blot检测经2Gy放射剂量照射后不同时间点(0 min、30min、1h、2h、6h、12h、24h、36h、48h)的细胞中γH2AX蛋白表达量。分析γH2AX蛋白表达量变化与肿瘤细胞放射敏感性的相关性。结果 小细胞肺癌SBC-3细胞的放射敏感性明显高于肺腺癌A549细胞。两种细胞受照后1h和6h,γH2AX的表达量均与肿瘤细胞的平均致死剂量(D0)相关。结论 γH2AX可以作为肺癌细胞放射敏感性的一个预测指标。

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    CXCL12/CXCR7对胃癌生长、粘附、侵袭的影响
    张娜,1 ,辛琪2 ,张传山2
    2014, 42 (9):  870-873 . 
    摘要 ( 581 )   PDF(479KB) ( 2774 )  
    目的:运用免疫组化方法研究CXCL12/CXCR7在胃癌组织中的表达,并选取与粘附、侵袭有关的几个细胞因子进行相关性研究,揭示CXCR7与胃癌生长、粘附及侵袭的关系。方法:收集160例胃腺癌病人的癌组织和30例正常胃组织,采用免疫组化方法,检测CXCL12/CXCR7、Survivin、CD44v6、MMP-3在胃癌和正常组织中的表达,并用统计学方法分析其相关性。结果:CXCL12/CXCR7在胃癌组织中的表达明显高于对照组正常胃组织(P=0.000),并且其在胃癌中的表达与胃癌的大小、浸润深度、是否有淋巴结转移及临床分期有关(P﹤0.05)。在胃癌组织中CXCR7表达与Survivin、CD44v6及MMP-3呈正相关。结论:CXCR7通过抗凋亡(Survivin)参与胃癌的生长,在胃癌的粘附及侵袭过程中通过CD44V6及MMP-3发挥作用,并可能参与胃癌的淋巴结转移。
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    实验研究
    Vav-Cre介导的YFP报告基因系统标记小鼠NK细胞的
    李丹丹1 ,孟歆怿2 ,雷蕾2 ,尹洁3 ,王玺2 ,张玲4
    2014, 42 (9):  874-877 . 
    摘要 ( 597 )   PDF(807KB) ( 2935 )  
    目的 探索Vav-Cre介导的YFP报告基因系统标记小鼠体内自然杀伤(NK)细胞的特异性和效率。方法 通过基因型分型筛选ROSA26R-YFP与Vav-Cre小鼠杂交后代中双阳性基因型小鼠,流式细胞术分析免疫器官淋巴结、脾、胸腺以及骨髓细胞的黄色荧光蛋白(YFP)表达效率,通过细胞表面抗体标记淋巴结、脾及骨髓的NK细胞,流式细胞术分析NK细胞群体中YFP阳性细胞百分比。结果 ROSA26R-YFP与Vav-Cre小鼠杂交后代共17只,双阳性基因型小鼠(ROSA26R-YFP(+/-)Vav-Cre)11只;流式细胞术分析淋巴结、脾、胸腺、骨髓细胞中YFP阳性细胞的百分比(%)分别为73.87±1.51、56.07±1.47、86.17±1.74、53.60±3.56,与阴性对照组相应器官分别为0.27±0.01、1.33±0.91、0.11±0.01,0.29±0.03相比,差异有统计学意义(均P<0.01),两种类型小鼠非免疫器官肾中均无明显YFP 表达(双阳性鼠0.72%±0.43,对照鼠0.92%±0.27,P>0.05);淋巴结、脾和骨髓中NK细胞YFP阳性百分比(%)76.94±0.84、81.66±1.18、88.92±0.77,与阴性对照组比较均明显增高(均P<0.01)。 结论 Vav-Cre介导的YFP报告基因系统标记小鼠体内NK细胞具有特异性及高效性。
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    神经降压素在雄激素非依赖性前列腺肿瘤动物模型中的表达
    王江1 ,权昌义1 ,李博1 ,常文亮1 ,陈靖2 ,尚芝群1 ,李刚3 ,蒋宁4 ,牛远杰3
    2014, 42 (9):  878-882 . 
    摘要 ( 558 )   PDF(1021KB) ( 2856 )  
     【摘要】目的观察神经降压素(NT)在原位前列腺肿瘤动物模型中的表达。方法利用原位种植包埋法和外科手术去势技术对Balbc-nu裸鼠分别构建雄激素依赖、去势3d和雄激素非依赖性原位前列腺肿瘤动物模型;Af? fymetrix基因芯片技术检测NT在3组肿瘤组织中mRNA的表达差异,运用荧光实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)验证结果;HE染色在光镜下观察肿瘤组织病理学改变;ELISA法测定裸鼠血清前列腺特异性抗原(PSA)浓度;免疫组织化学法检测3组肿瘤组织中NT的蛋白相对表达量。结果与雄激素依赖组比较,雄激素非依赖组和去势3d 组NTmRNA表达分别上调5.10和下调0.33;用RT-PCR和qRT-PCR验证其结果,雄激素非依赖组的表达水平较雄激素依赖组分别上调1.41和7.27(P<0.01),去势3d组的表达水平分别下调0.78和0.46(P<0.05);肿瘤组织HE 染色可见明显的核异型性和瘤节结构;雄激素依赖组PSA和NT结果均分别为(0.48±0.03)μg/L和0.031±0.008,去势3d组均分别为(0.17±0.03)μg/L和0.021±0.004,雄激素非依赖组均分别为(0.87±0.02)μg/L和0.042±0.010;与雄激素依赖组比较,去势3d组表达降低,雄激素非依赖组表达升高(P<0.01)。结论NT在前列腺肿瘤由雄激素依赖向雄激素非依赖这一变化过程中起着一定的作用,可以作为雄激素非依赖性前列腺肿瘤治疗靶点和特异性诊断指标。
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    Notch1(NICD)过表达真核载体构建及对大鼠BMSCs增殖分化的影响
    杜红阳
    2014, 42 (9):  883-888 . 
    摘要 ( 793 )   PDF(896KB) ( 3000 )  
    目的 构建Notch1(NICD)过表达真核载体,探讨其对大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenehymal stem cells,BMSCs)增殖分化的影响。方法 以大鼠BMSCs为研究对象,构建Notch1(NICD)过表达真核载体,将pEGFP-N1-NICD质粒转染BMSCs,实验分为空白对照CON组、空载体组和转染组,转染48h后观察细胞一般形态,Realtime PCR和Western blotting检测NSE、GFAP 和Notch1基因和蛋白表达,流式检测转染后细胞凋亡和细胞周期情况;MTT检测增殖情况。结果 经DNA测序结果,重组质粒pEGFP-N1-NICD编码序列与设计完全一致,转染48h后转染组和空载体组的BMSCs均可表达绿色荧光。转染组Notch1、GFAP基因相对表达量显著高于空载体组和CON组(P<0.05),Western blotting检测结果与之类似。转染48h后,转染组活细胞比率及早期凋亡率、晚期凋亡率与CON组和空载体组比较差异均具有统计学意义(P<0.05);空载体组与CON组晚期凋亡率比较差异具有统计学意义(P<0.05),转染组细胞处于G1/G0细胞比例显著高于CON组和空载体组(P<0.01),而处于S和G2/M期细胞比例显著低于CON组和空载体组(P<0.01),转染组增殖曲线值随时间逐渐低于CON组和空载体组,到第4d时显著低于CON组和空载体组(P<0.05)。结论Notch1(NICD)过表达真核载体构建成功,高表达Notch1(NICD)基因可能在一定程度上诱导BMSCs凋亡、抑制其增殖,且表现诱导向神经胶质样细胞分化。
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    人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠nNOS,iNOS表达的影响
    屈惠莹,袁静
    2014, 42 (9):  889-892 . 
    摘要 ( 602 )   PDF(1004KB) ( 2835 )  
    【摘要】 目的 探讨人参皂苷Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法 将大鼠随机分成假手术组,模型组(脑缺血再灌注损伤组),人参皂苷Rg1 10,20,40mg/kg组,尼莫地平组(阳性药物对照组),每组10只。采用大鼠中动脉栓塞法制作大鼠脑缺血再灌注模型,观察大鼠再灌注后神经功能缺损情况,采用比色法检测大鼠nNOS,iNOS和一氧化氮(NO)的含量,应用免疫组化和免疫印迹法检测脑组织缺血再灌注后nNOS,iNOS的表达。结果 (1)人参皂苷Rg1各组大鼠脑缺血后神经功能评分明显低于模型组(p<0.05);(2)与模型组相比,人参皂苷Rg1各组随浓度增高nNOS含量及表达增高(p<0.05),iNOS含量及表达明显降低(p<0.05);(3)免疫组化和免疫印迹的结果也证明这一趋势。结论 人参皂苷Rg1防治大鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与激活nNOS,抑制iNOS有关,且以高剂量效果较好。
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    三七有效成分对免疫性肝损伤的保护作用
    韦维,李韬
    2014, 42 (9):  893-895 . 
    摘要 ( 724 )   PDF(944KB) ( 2788 )  

    【摘要】目的 研究三七有效成分三七总皂苷、总黄酮及多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法昆明种小鼠60只随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、三七总皂苷组(C组)、三七总黄酮组(D组)、三七多糖组(E 组)。C、D、E组分别给予三七总皂苷、三七总黄酮、三七多糖灌胃,1次/d,14d后B、C、D和E组于尾静脉注射卡介苗,26d于尾静脉注射脂多糖,禁食12h后于眼球静脉丛采血,检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、白细胞介素-4(IL-4)的含量;取肝、脾、胸腺计算脏器指数;另取肝脏做病理学检查。结果与B组比较, C、D、E组小鼠肝、脾、胸腺指数、血清ALT水平明显降低(P<0.01),IL-4、T-SOD显著升高(P<0.01);病理学示C、 D、E组肝脏炎症细胞浸润、水肿和点状、片状坏死程度均比B组明显减轻。结论三七总皂苷、总黄酮及多糖对免疫性肝损伤均有明显的保护作用。

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    临床研究
    病毒性肝炎患者血清铁代谢指标的临床分析
    韩梅丽1 ,江宇泳2 ,于浩2
    2014, 42 (9):  896-898 . 
    摘要 ( 796 )   PDF(325KB) ( 2792 )  
    目的 探讨血清铁代谢指标与病毒性肝炎患者肝脏炎症活动度的关系;乙型肝炎患者与丙型肝炎血清铁代谢指标有无差异。方法 入组135例乙肝患者和31例丙型肝炎患者,收集患者血清铁(SI)、血清铁蛋白(SF)、转铁蛋白(TRF)、总铁结合力(TIBC)并计算转铁蛋白饱和度(TS),肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)。结果 TRF、TIBC与年龄成负相关;SI、SF、TS分别与ALT、AST、TBIL有显著正相关,SF、TS与ALB成显著负相关;TRF、TIBC分别与ALT、AST、TBIL成负相关,与ALB成正相关(r=0.551,P<0.001)。丙型肝炎患者的SF高于乙型肝炎患者,TRF及TIBC低于乙型肝炎患者(P=0.003),SI及TS在两组中无显著性差异。结论 血清铁代谢指标与肝脏炎症活动度有显著相关性; 慢性丙型肝炎与慢性乙型肝炎患者相比,铁超载现象明显。
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    脑梗死患者同型半胱氨酸与颈动脉内膜中层厚度的关系
    王渝1 ,张哲成1 ,朱炬1 ,张静2 ,王素红1 ,金凤艳3 ,杨新忠4 ,田丽1
    2014, 42 (9):  899-902 . 
    摘要 ( 583 )   PDF(292KB) ( 2734 )  

    【摘要】目的探讨脑梗死患者血浆总同型半胱氨酸(tHcy)与颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的关系。方法从急性脑梗死住院患者中选取tHcy 水平≤10μmol/L(非Hhcy组)、tHcy 水平>10μmol/L且≤15μmol/L(H1组)、tHcy 水平>15μmol/L(H2组)的患者各60例,测量3组患者CIMT,并检测三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBS)、叶酸(FA)、维生素B12 (VitB12)、糖化血红蛋白(HbA1c)等临床生化指标。结果3组患者CIMT差异有统计学意义(P<0.01),其中H2组[0.98(0.90,1.05)mm ]与非 Hhcy组[0.85(0.80,0.95)mm]、H2组与H1组[0.85(0.85,0.95)mm]比较均增加(均P<0.05)。3组患者tHcy、FA、VitB12 水平差异有统计学意义。以CIMT的常用对数为因变量进行多重线性逐步回归分析,结果显示年龄增长、吸烟史、糖尿病史、LDL-C升高、tHcy升高与CIMT增加有关。结论伴有tHcy水平升高的脑梗死患者常有FA、VitB12水平降低,CIMT增加,且当tHcy 水平>15μmol/L时CIMT明显增加,脑梗死患者CIMT增加与部分脑血管病危险因素有关。

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    原发性高血压患者血清脂联素及其基因多态性与冠心病的相关性研究
    李杨1 ,秦勤2 ,任蓓1 ,赵丽丽1 ,毛用敏3 ,郑萍4
    2014, 42 (9):  903-907 . 
    摘要 ( 565 )   PDF(342KB) ( 2842 )  

    【摘要】目的探讨原发性高血压患者血清脂联素水平及其基因单核苷酸多态性(SNP)rs266729、rs7649121、 rs1501299、rs3774262与冠心病及冠脉病变程度的关系。方法以高血压患者414例(其中单纯高血压患者180例,高血压合并冠心病患者234例)和正常对照组185例为研究对象,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清脂联素水平,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测脂联素rs266729、rs7649121、rs1501299、rs3774262位点多态性。结果高血压合并冠心病组脂联素水平较对照组和单纯高血压组显著降低。脂联素rs7649121位点杂合子AT基因型较AA基因型可降低冠心病风险(校正OR=0.566,95%CI0.346~0.925,P=0.023)。多元Logistic回归分析显示年龄、LDL-C为冠心病的危险因素,脂联素为冠心病的保护因素。随着病变支数增加,脂联素水平呈逐渐降低趋势。脂联素SNP位点基因型对血清脂联素水平无明显影响。结论脂联素水平降低是高血压患者发生冠心病的独立危险因素,且随着冠脉病变程度的加重,脂联素水平逐渐降低。脂联素rs7649121位点多态性可能与高血压患者并发冠心病有关。

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    甲状腺功能亢进患者硬骨素与骨代谢的关系
    张梦媛,任安
    2014, 42 (9):  908-911 . 
    摘要 ( 571 )   PDF(321KB) ( 3038 )  

    ?【摘要】目的 比较甲状腺功能亢进(甲亢)患者和健康人群血清硬骨素(SOST)水平,研究甲亢患者SOST与骨代谢相关指标及骨密度(BMD)的关系。方法? 收集60例甲亢患者作为甲亢组,同时选取甲状腺功能正常的30例健康体检者作为对照组;依据BMD T值将甲亢患者分为骨密度正常组和骨量减少/骨质疏松组。肘正中静脉采血检测所有受试者甲状腺功能和SOST,同时检测甲亢患者甲状腺相关抗体,甲状旁腺激素(PTH)、N-MID骨钙素(NMID)、总1型胶原氨基端延长肽(tP1NP)、β-胶原特殊序列(β-CTX);双能X线吸收仪(DEXA)测量桡骨、股骨颈及腰椎的BMD。结果?? (1)甲亢组血清SOST水平高于对照组(P<0.01)。(2)甲亢患者中,骨量减少/骨质疏松组的 SOST、N-MID、tP1NP、β-CTX、游离甲状腺素(FT4)显著高于骨密度正常组,PTH显著低于骨密度正常组(P<0.05)。(3)甲亢患者SOST与游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、β-CTX呈正相关(rs分别为0.380、0.296, P<0.05),与PTH、桡骨全部BMD、股骨颈BMD、腰椎BMD呈负相关(rs分别为-0.485、-0.322、-0.266、-0.455,P<0.05)。结论 甲亢患者血清SOST水平升高,其可能与甲亢患者骨代谢异常的发生有关。

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    持续气道正压通气治疗老年阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并糖尿病的临床分析
    李志刚,钱凤文,崔如众
    2014, 42 (9):  912-914 . 
    摘要 ( 559 )   PDF(282KB) ( 2799 )  

    【摘要】目的   研究持续气道正压通气(CPAP)对老年阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并糖尿病患者的疗效。方法   选取OSAHS 合并糖尿病患者80 例,随机分为对照组和治疗组,各40 例。对照组给予糖尿病饮食、降血糖药物等常规治疗;治疗组在常规治疗基础上,同时使用福通ST-25 持续气道正压通气呼吸机治疗;监测治疗前后空腹血糖(FPG)、餐后2 h 血糖(2 hPG)及胰岛素、睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、最低血氧饱和度(LSpO2)、最长呼吸暂停时间。结果经治疗4 周后,治疗组的FPG、2 hPG、AHI 和最长呼吸暂停时间均低于对照组;空腹胰岛素、餐后2 h 胰岛素、LSpO2 均高于对照组(均P < 0.01)。结论   CPAP  治疗   老年OSAHS 合并2 型糖尿病患者可有效降低血糖水平,改善AHI、LSpO2和最长呼吸暂停时间。

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    脊柱后路术后早期感染的细菌学分析及治疗效果
    石发勇
    2014, 42 (9):  915-917 . 
    摘要 ( 527 )   PDF(293KB) ( 2786 )  

    【摘要】目的   分析脊柱后路手术后早期切口感染的病原菌,观察不同处理方法治疗并发症的临床效果。方法回顾性分析30 例脊柱后路手术早期切口感染患者,其中表浅感染7 例,深部感染23 例,分析患者的临床表现、诊断、治疗、病原学、药敏试验及随访结果。结果   30 例患者感染时间为术后2~15 d,共分离出菌株33 株,其中革兰阳性球菌18 株(54.5%),以金黄色葡萄球菌多见(13 株,39.4%);革兰阴性杆菌15 株(45.5%),以大肠杆菌居多(6株,18.2%)。药敏试验提示革兰阳性球菌对万古霉素、利福平、替考拉宁、复方新诺明敏感性高,未发现对万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌;革兰阴性菌对亚胺培南敏感性较高(100%)。7 例表浅感染者经换药后治愈;23 例深部感染者经伤口彻底清创,置管冲洗引流,且均保留内固定,亦未见感染复发。结论  脊柱后路术后早期切口感染病原菌多为金黄色葡萄球菌,对于深部感染者,应早期扩创、持续灌注冲洗引流并使用万古霉素。

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    钙敏感受体在人骨关节炎软骨中的表达研究
    刘军1 ,曹建刚1 ,姚庆斌2 ,李稚君2 ,付鑫3 ,马信龙4
    2014, 42 (9):  918-919 . 
    摘要 ( 530 )   PDF(907KB) ( 2791 )  
    【摘要】目的  研究钙敏感受体(CaSR)在人骨性关节炎(OA)软骨中的表达强度,探讨其与OA 发病机制的关 系。方法收集5 例因膝关节OA 接受全膝关节置换术患者的股骨远端及胫骨近端标本,HE 染色后根据Collins 病 理学分级标准进行关节软骨退变分级,Collins 0 级切片8 张为软骨正常组,Collins Ⅱ级切片8 张为软骨退变组,免疫 组织化学染色后比较2 组软骨组织内CaSR 的表达强度。结果 CaSR 在OA 软骨中阳性表达,CaSR 在软骨正常组 的表达强度低于退变软骨组(评分:1.63±0.95 vs 3.52±0.78,t=8.99,P<0.05)。结论 CaSR 活化与关节软骨退变 有关。 
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    DJ-1蛋白在卵巢癌患者血清中的表达及意义
    刘辉1 ,王伟明2 ,蔡智慧2 ,左群1 ,刘金2 ,刘树芳1 ,董玉平1 ,鲁晓芳1
    2014, 42 (9):  920-922 . 
    摘要 ( 549 )   PDF(265KB) ( 2740 )  

    【摘要】目的  研究DJ-1蛋白在卵巢癌患者血清中的表达水平及其意义。方法 选取卵巢上皮性肿瘤患者 52例为患者组,其中良性卵巢肿瘤9例,交界性卵巢肿瘤5例,卵巢癌38例;非卵巢肿瘤患者20例为对照组,采用双抗体夹心法测定2组患者血清中DJ-1蛋白的水平。结果 对照组血清中DJ-1蛋白水平明显低于各种卵巢肿瘤患者(P < 0.05)。卵巢癌患者血清DJ-1蛋白水平高于交界性卵巢肿瘤和良性卵巢肿瘤患者,交界性卵巢肿瘤高于良性卵巢肿瘤患者(P < 0.05);低分化和中分化卵巢癌患者血清DJ-1水平均高于高分化卵巢癌患者(P < 0.05);不同手术病理分期和不同组织学分类的卵巢癌患者血清DJ-1水平差别无统计学意义(P > 0.05)。结论  DJ-1参与了卵巢癌的发生和发展,可作为卵巢癌诊断及预后预测的血清学指标。

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    应用研究
    胆道支架治疗胆总管巨大结石
    迟海本
    2014, 42 (9):  923-924 . 
    摘要 ( 1118 )   PDF(300KB) ( 2743 )  
    摘要:目的 探讨胆道支架在治疗胆总管巨大结石中的作用和价值。方法 对32例胆总管巨大结石患者,在oddi括约肌切开术内镜取石失败后行塑料胆道支架置入术治疗,术后随访6个月。结果 32例患者均顺利置入胆道支架,术后黄疸、腹痛等症状均得到缓解,术后六个月行二次ERCP,32例胆总管巨大结石3例结石消失,25例均有不同程度缩小,4例未见明显缩小;残余结石再次取石,均成功取石,有4例仍取石困难,继续放置胆道支架引流观察。胆道支架治疗胆总管巨大结石成功率87.5%。结论 胆道支架治疗胆总管巨大结石具有操作简便、操作时间短,并发症少、疗效满意、安全有效等优点。
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    经显微镜下颈前路手术治疗颈椎病效果观察
    邵高升1 ,江泽华2 ,张学利3
    2014, 42 (9):  925-927 . 
    摘要 ( 582 )   PDF(334KB) ( 2689 )  

    【摘要】目的 探讨显微镜下颈椎前路手术治疗颈椎病的手术疗效。方法 选择在显微镜下采用经颈椎前路椎体次全切减压,钛网置入融合内固定术或颈椎间盘切除减压cage置入内固定术治疗的颈椎病患者75例。其中1 个椎间隙41例,2个椎间隙30例,3个椎间隙4例。术后定期随访,采用日本矫形外科学会评分系统(JOA)评分法分别对患者术前和术后末次随访时脊髓功能进行评分,并计算神经功能改善率,以此评定显微镜下颈椎前路手术的临床疗效。结果  75例患者均获得随访,其神经功能改善情况为优44例,良25例,可6例,优良率为92%,各椎间隙组间优良率比较,差异无统计学意义。各椎间隙组内患者术后末次随访JOA评分均高于术前(均P < 0.05)。结论  显微镜下颈椎前路手术治疗颈椎病安全有效,术中创伤小,出血少,减压彻底,术后恢复快,可早期下床活动,治疗效果满意。

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    高频超声诊断乳腺微小癌误诊原因分析
    杨培胜
    2014, 42 (9):  928-930 . 
    摘要 ( 710 )   PDF(315KB) ( 2727 )  
    目的 探讨高频超声诊断乳腺微小癌的常见误诊原因。方法 回顾性分析经病理证实的90例乳腺微小癌的超声征象,根据病灶最大径,分为0.5-1.0cm组55例和≤0.5cm组35例,两组又分别分为正确提示组与误诊组。采用西门子公司SIEMENZ S2000型、GE公司vivid7及vivid9大型彩色多普勒超声仪器,仔细观察二维声像图结果,分析其误诊原因。结果 90例乳腺微小癌,误诊32例,病灶最大径0.5-1cm组与≤0.5cm组误诊原因边界具有统计学意义(p<0.05)。其中最大径在0.5-1.0cm组的病灶在边界、微钙化在正确提示组与误诊组之间差异有统计学意义(p<0.05)。最大径≤0.5cm 组病灶,其中纵横比、多发结节在其正确提示组与误诊组之间差异有统计学意义(p<0.05)。结论 乳腺微小癌的误诊原因在不同病灶大小之间有所不同,病灶最大径在0.5-1cm时表现为边界清晰,无微钙化等良性结节声像图特征时容易误诊,而最大径在≤0.5cm时表现为纵横比<1、多发结节特征时容易误诊。
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    改良瑞-姬氏染色法的染色效果研究
    沈兴娅
    2014, 42 (9):  931-932 . 
    摘要 ( 530 )   PDF(859KB) ( 3020 )  
    【摘要】目的 研究改良瑞-姬氏染色法的染色效果。方法 采用传统与改良瑞-姬氏染色法对40例精液标本进行染色,观察改良瑞-姬氏染色对精子、精液细胞及阴道分泌物的染色效果。结果 改良瑞-姬氏染色下的中段缺陷精子率及尾部缺陷精子率分别是7.02± 2.4%和11.02±2.03%,而传统的瑞-姬氏染色下的中段缺陷精子率及尾部缺陷精子率分别是5.48±2.8%和8.05±2.56%。两方法比较差异明显(P<0.05)。两方法的正常形态精子率及头部缺陷精子率的比较无统计学差异(P>0.05)。但是染色效果不同,改良方法下精子可见明显头核的深染和顶体的突出而传统方法染色效果较模糊。改良瑞-姬氏染色下的精液细胞及阴道分泌物中细胞及滴虫等成分染色效果良好,阴道毛滴虫的鞭毛和轴柱结构尤其清晰。结论 改良瑞-姬氏染色法染色过程简单、实用,值得临床推广应用。
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    药物临床观察
    瑞芬太尼对小儿七氟烷麻醉自主呼吸的影响
    罗俊1 ,孙瑞强1 ,王永旺2 ,顾恩华1
    2014, 42 (9):  933-936 . 
    摘要 ( 605 )   PDF(328KB) ( 2675 )  
    目的 研究不同剂量瑞芬太尼持续输注对小儿七氟烷麻醉下自主呼吸的影响。方法 选择3~6岁七氟烷麻醉下斜视手术患儿120例,根据术中给予瑞芬太尼的剂量,将患儿随机分为四组(n=30):C组(生理盐水)、L组(瑞芬太尼0.03μg?kg-1?min-1),M组(瑞芬太尼0.06μg?kg-1?min-1)和H组(瑞芬太尼0.09μg?kg-1?min-1),每组30例。观察记录喉罩置入后(T1)、静注负荷量后(T2)、持续输注10min(T3)、持续输注15min(T4)、拔出喉罩(T5)时患儿呼吸频率(RR)、潮气量(VT)、分钟通气量(MV)、呼末CO2浓度(PETCO2)、呼末七氟烷浓度(PETSev)以及平均动脉压(MBP)、心率(HR)等循环指标,记录手术、麻醉、苏醒时间和术中不良反应情况。结果 四组患儿的基本情况和循环指标无统计学差异,四组患儿术中均无体动和低氧血症的发生。H组T3、T4时点RR和MV明显低于其他三组(P<0.05),PETCO2则高于其他三组;M组与L组RR和MV比较无统计学差异,但均显著低于C组(P<0.05);四组VT比较无统计学差异。结论 0.03~0.09μg?kg-1?min-1瑞芬太尼持续输注对小儿七氟烷麻醉下自主呼吸具有抑制作用,但不会造成低氧血症的发生。呼吸抑制作用主要表现为患儿RR的降低,0.09μg?kg-1?min-1剂量抑制作用最明显,0.03~0.06μg?kg-1?min-1剂量间差异不显著。根据手术需要,选择中低剂量瑞芬太尼持续输注,既可保留患儿自主呼吸,又可减少对呼吸的抑制作用。
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    不同剂量瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征患者血清sOX40L、MMP-9的影响
    王林军
    2014, 42 (9):  937-939 . 
    摘要 ( 599 )   PDF(271KB) ( 2713 )  
    目的 探讨不同剂量瑞舒伐他汀对急性冠脉综合征(ACS)患者血清可溶性OX40配体(sOX40L)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的影响。方法 选择ACS患者60例,空白对照组20例。随机将ACS患者分为20 mg瑞舒伐他汀治疗组(20mg组)30例和10 mg瑞舒伐他汀治疗组(10mg组)30例,比较治疗前后各组间血清sOX40L、MMP-9的水平变化。结果 瑞舒伐他汀治疗2周后,两治疗组患者血清sOX40L、MMP-9水平均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。其中20mg组较10mg组降低更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 ACS患者早期使用较大剂量瑞舒伐他汀可明显减少冠状动脉粥样斑块基质成分的降解和炎症反应,从而起到稳定动脉粥样硬化斑块,改善ACS患者的预后的作用。
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    更昔洛韦治疗幼儿感染人巨细胞病毒的预后评估指标的探讨
    李娟
    2014, 42 (9):  940-942 . 
    摘要 ( 647 )   PDF(275KB) ( 2971 )  

    【摘要】目的  探讨IE mRNA 和pp67 mRNA 在更昔洛韦治疗后的人巨细胞病毒(HCMV)感染患儿中的表达情况。方法 在接受更昔洛韦治疗前,治疗2 周和停药4 周时检测HCMV 患儿总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL);丙氨酸转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)及荧光定量PCR 的方法检测HCMV-DNA 拷贝数,IE mRNA 和 pp67 mRNA 的表达采用实时荧光定量PCR 法进行检测。结果 更昔洛韦治疗2 周后,患儿肝功能及血HCMVDNA 均较治疗前降低,停药4 周后TBIL、DBIL、ALT、ALP 及HCMV-DNA 拷贝数均较治疗前显著降低,但是与治疗 2 周比较差异无统计学意义。治疗后2 周,仍有12 例患儿血液中表达pp67 mRNA,表达量显著低于治疗前的pp67 mRNA 表达量,但检测不到患儿表达IE mRNA。停药4 周,pp67 mRNA 阳性表达的患儿数量显著低于治疗2 周的患儿数量,有3 例患儿表达微弱的IE mRNA。2 个基因的mRNA 表达量与治疗2 周比较差异无统计学意义。结论 在更昔洛韦治愈患儿,HCMV-DNA 检测呈现阴性时,应再进行病毒mRNA 检测,对RNA 表达阳性的患儿,应该加强随访与复查,预防病毒复发。

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    新技术交流
    液态芯片技术联合检测IFN-γ、IP-10诊断结核性胸腔积液
    刘佳庆1 ,张立1 ,孙海柏1 ,吴敏1 ,杜岩青1 ,冯爽1 ,刘树业2
    2014, 42 (9):  943-945 . 
    摘要 ( 1072 )   PDF(330KB) ( 2785 )  

    【摘要】目的 应用液态芯片技术联合检测胸腔积液中干扰素(IFN)-γ、IFN-γ诱导蛋白(IP)-10 水平,探讨其在临床快速诊断及鉴别诊断结核性胸腔积液中的应用价值。方法 选取渗透性胸腔积液患者,其中结核性胸腔积液组52 例;恶性胸腔积液组38 例。利用结核感染T 细胞斑点试验(T-SPOT.TB)测定其对结核杆菌反应的效应T 细胞数量,即斑点形成细胞数(SFCs),同时利用液态芯片技术测定其IFN-γ和IP-10 水平,通过Logistic 逐步回归法评估IFN-γ和IP-10 联合诊断时的价值,并比较两种诊断方法的价值。结果 T-SPOT.TB 法诊断结核性胸腔积液的灵敏度为90.38%,特异度为84.21%,ROC 曲线下面积(AUC)及95%CI 为0.938(0.867~0.978);IFN-γ、IP-10 联合诊断结核性胸腔积液时的灵敏度为98.08%,特异度为97.37%,AUC 及95%CI 为0.995(0.951~1.000)。2 种诊断方法灵敏度和特异度的差异不明显;2 种方法诊断一致性良好(Kappa=0.703);方法间AUC 比较差异有统计学意义(Z=1.996, P < 0.05),检测IFN-γ、IP-10 水平联合诊断时AUC 较大(AUC=0.995)。结论  利用液态芯片技术同时检测IFN-γ、 IP-10 水平联合诊断结核性胸腔积液满足了临床快速、准确诊断及鉴别诊断结核性胸腔积液的需要。

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    综述
    睡眠呼吸暂停模式间歇低氧对心脑血管的影响
    韩苗苗1 ,何庆2 ,施遥3 ,冯靖4 ,陈宝元4
    2014, 42 (9):  946-948 . 
    摘要 ( 750 )   PDF(340KB) ( 2806 )  
    阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)的特点是睡眠期间反复发生气道阻塞导致间歇性低氧(IH)、高碳酸血症、睡眠片段化和胸内压改变。其中,IH与高血压、动脉粥样硬化、冠心病、心律失常、脑卒中、心衰和猝死等病理生理过程相关。OSA模式下IH会导致代谢调节异常、内皮功能障碍、系统性炎性反应、氧化应激反应及神经体液的变化,可增加心血管疾病的风险。本文主要描述了目前对IH导致各种心血管疾病的发病机制的理解。
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    血管生成负反馈调节因子Vasohibin家族研究进展
    史刚刚
    2014, 42 (9):  949-952 . 
    摘要 ( 645 )   PDF(302KB) ( 2863 )  
    血管生成依赖于血管生成刺激因子和抑制因子之间的平衡。Vasohibin家族作为新近发现的血管生成调节因子,参与多种病理生理过程。其中Vasohibin-1是迄今为止发现的唯一以负反馈为作用机制调节血管生成的因子,抑制血管生成;而Vasohibin-2促进血管生成,表达于肿瘤细胞和单核细胞;研究还发现了一个小分子的Vasohibin结合蛋白,其存在于内皮细胞,可以Vasohibin-1和 Vasohibin-2结合,其与Vasohibin-1结合时,增强抗血管生成的活性,扮演分泌伴侣作用。本文就Vasohibin家族成员的结构特点、生物活性及在抑制病理性血管生成中的作用做一综述。
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    代谢综合征与三阴性乳腺癌关系的研究进展
    田垚1 ,王毅2 ,朱科云3 ,汪百川4 ,曹旭晨5
    2014, 42 (9):  953-955 . 
    摘要 ( 627 )   PDF(320KB) ( 2798 )  
    【摘要】代谢综合征(MS)、乳腺癌是女性常见疾病,三阴性乳腺癌(TNBCs)是近年来备受关注的乳腺癌的一个类型。MS的重要组分向心性肥胖、高血糖、高甘油三酯和低高密度脂蛋白(HDL-C)增加了TNBCs的患病风险。MS的常见生物标记物胰岛素、脂联素和瘦素等在乳腺癌特别是TNBCs的发生发展中起到重要作用。胰岛素样生长因子-IImRNA结合蛋白3(IMP3,是一种癌胚蛋白)可能是TNBCs浸润性癌新的生物标记物。本文对MS与TNBCs关系的研究进展进行综述。
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    Notch通路及维甲酸与肾纤维化研究进展
    杜轩,涂卫平
    2014, 42 (9):  956-960 . 
    摘要 ( 632 )   PDF(352KB) ( 2951 )  
    摘要:维甲酸(retinoic acid,RA)对肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)存在着重要的影响,Notch信号途径在肾纤维化中发挥了关键作用,本文就维甲酸对肾纤维化与Notch通路的影响做综述,探索维甲酸干预Notch途径能否成为新的抗肾纤维化策略。
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